Hongos y Levaduras Laboratorio de Microbiología Aplicada Dra. Esther Z. Vega.

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1 Hongos y Levaduras Laboratorio de Microbiología Aplicada Dra. Esther Z. Vega

2 Características generales de crecimiento de hongos y levaduras  Requisitos ambientales versátiles  Mayoría son aeróbos obligados  Requerimientos de acidez/alcalinidad pH 2 a > 9 pH 2 a > 9  Rango de temperatura 10-35 o C 10-35 o C  Requerimientos de humedad A w 0.85 o menor aunque levaduras requieren una a w mayor A w 0.85 o menor aunque levaduras requieren una a w mayor

3 Uso de Medio Acidificado  Históricamente Se acidifica el medio para evita el crecimiento de bacterias Se acidifica el medio para evita el crecimiento de bacterias  Inferior al medio donde se anade antibíoticos  Utilice sólo si el pH del alimento es >8 Maíz Maíz Huevos Huevos Los antibíoticos no so efectivos a ese pH Los antibíoticos no so efectivos a ese pH Acidifique a pH 5.0 con 10% ácido tartarico Acidifique a pH 5.0 con 10% ácido tartarico Acidifique LUEGO de autoclavearAcidifique LUEGO de autoclavear

4 Medio con Antibíoticos  Evita el crecimiento de células bacteriales  Permite la recuperación de células débiles  Minimiza la precipitación de partículas de alimentos

5 Medio  Con Antibíoticos Plate Count Agar Plate Count Agar Dichloran Rose Bengal Agar Dichloran Rose Bengal Agar  Enumeración de levaduras y hongos utilizando métodos de dilución  Utilice técnica de esparcido Medio caliente elimina las levaduras y hongos Medio caliente elimina las levaduras y hongos

6 Antibíoticos  Tetracyclina  Chloramhenicol**  Oxytetracyclina  Gentamicina**  Estreptomicina  Kanamicina  **Recomendado por su amplio espectro y tolerancia al calor (puede ser autoclaveado, otros deben ser anadidos luego de autoclavear)

7 Rose Bengal  Restringe Crecimiento de micelio excesivo  No debe ser expuesto a la luz Fotodegradación de rosa de bengal resulta en la formación de Dichloran que puede restringir el crecimiento de hongos Fotodegradación de rosa de bengal resulta en la formación de Dichloran que puede restringir el crecimiento de hongos

8 Enumeración  Placas debe ser secadas en la noche antes de utilizar Evita los “Spreaders”  Incube con la tapa hacia arriba  22 to 25 C (room temp) por 5 días  Placas contables 15-150 colonias 15-150 colonias  No remueva las tapas Reacciones alérgicas Reacciones alérgicas No huela No huela

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