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INMUNOLOGIA
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COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD
CULTIVO MIXTO DE LINFOCITOS PRUEBA DE MICROTOXICIDAD
3
CULTIVO MIXTO DE LINFOCITOS
CELULAS IRRADIADAS CON MITOMISIN CAMARA CELULAS RESPONDEDORAS INCUBAR 37ºC x 5 DIAS MÁS 1 L THIMIDINA REINCUBAR X 18 HORAS. MUESTRA SUSPENSIÓN CONTEO POR CENTELLEO RADIACIÓN SI LOS Ag HLA SON DIFERENTES (INCOMPATIBLES) HAY DIVISIÓN
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PRUEBA DE MICROTOXICIDAD
3 ML DE S. HAVIS SEPARAR LINFOCITOS RECUENTO CAMARA DE NEBAUER CENTRIFUGAR 3000 RPM 15MIN 2 LAVADOS FICOL-HYPAQUE 2ML SANGRE SUSPENSIÓN MUESTRA PLACA DE TARASAKI ADICIONAR 2 L MX + 2 L DE SUERO INCUBAR 37ºC x 30MIN + 5 L DE AZUL DE TRIPAN INCUBAR 15M. LEER AL MICROSCOPIO POSITIVO FUERTE: 95-100% MUERTAS POSITIVO DEVIL: 40-50% MUERTAS NEGATIVO:20% MUERTAS
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