R ESULTADOS DE TRANSFORMACIÓN, R ESTRICCIÓN DE PLÁSMIDO E INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE Realizado por: Godínez Villanueva Diana Pamela Rodríguez Espinosa.

Presentación del tema: "R ESULTADOS DE TRANSFORMACIÓN, R ESTRICCIÓN DE PLÁSMIDO E INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE Realizado por: Godínez Villanueva Diana Pamela Rodríguez Espinosa."— Transcripción de la presentación:

1 R ESULTADOS DE TRANSFORMACIÓN, R ESTRICCIÓN DE PLÁSMIDO E INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE Realizado por: Godínez Villanueva Diana Pamela Rodríguez Espinosa Sofía Kesara

2 T RANSFORMACIÓN Objetivos Realizar la técnica de transformación bacteriana. Aprender a identificar células transformantes mediante su fenotipo.

3 Desarrollo experimental

4 El equipo 6 repitió el experimento y después de 4 días de incubación se obtuvo: Aprox. 130 colonias

5 R ESTRICCIÓN

6 F ACTORES CRÍTICOS AL TRABAJAR CON ENZIMAS : Pureza del DNA Temperatura y pH DNAsas Contaminantes con carga (-) DNA contaminado con otro DNA Grados de metilación Tipo de molécula de DNA Buffer adecuado

7 G EL MODELO 1. Std de peso molecular 2. Sin restringir 3. Sin muestra 4. Restringido con 2 enzimas 5. Restringido con 2 enzimas e incubado toda la noche 6. Restringido 1 enzima 1 2 3 4 5 6 T VR Inserto P T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto RNA Std usado

8 N UESTRO GEL No se logró ver mejor Std P E1 E2 P E1 E2 P Std P E1 E2 E1 E2 E1 E2

9 R ESULTADOS DEL SEMESTRE PASADO 1 Std 2 Plásmido sin restringir (todo el vol) 2 Plásmido sin restringir (5uL) 3 Restricción 2 enzimas (todo el vol) 4 Restricción 2 enzimas (todo el volumen toda la noche) 5 Restricción 1 enzima (todo el volumen, toda la noche)

10 I NDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE Objetivos -Realizar la inducción de una proteína recombinante (β- lactamasa).

11 Desarrollo experimental

12 ¿Q UÉ ESPERAMOS ? Tiempo de inducción 0 0.5 1.0 1.5 Std Proteína recombinante

13 R ESULTADOS INDUCCIÓN Equipo 1 Equipo 2Equipo 3 Equipo 4Equipo 5 Equipo 6