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Resultados de la restricción del plásmido Nov, 2010.

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Presentación del tema: "Resultados de la restricción del plásmido Nov, 2010."— Transcripción de la presentación:

1 Resultados de la restricción del plásmido Nov, 2010

2 Std de peso molecular: Lambda HindIII Ladder The λ HindIII DNA Ladder is prepared by restriction digestion of phage Lambda DNA to completion with HindIII, followed by heat inactivation of the enzyme. The resulting 7 fragments range from 564 base pairs to kilobases in size. 564, 2027, 2322, 4361, 6557, 9416, bp

3 Gel modelo 1. Std de peso molecular 2. Sin restringir 3. Sin muestra 4. Restringido con 2 enzimas 5. Restringido con 2 enzimas e incubado toda la noche 6. Restringido 1 enzima T VR Inserto P T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto RNA

4 Comentarios Sólo los geles del equipo 3 y 7 muestran bandas. Para su discusión y reporte pueden usar estos dos geles y también el gel modelo. Lo siento chicos.

5 Equipos 1 y 2 El mismo gel de la derecha, solo que inverti los colores y si se logran ver bandas de alto peso molecular. Aunque no hay mucha diferencia entre tratamientos SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz

6 Equipos 4 y 3 En este gel al que le invertí los colores se logra ver una bandita tenue que marque con una flecha como posible inserto. SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz Solo se logran ver bandas en el gel del equipo 3, en el del cuatro parece que hay algo pero no es muy claro.

7 Equipos 6 y 5 Ya le moví la intensidad al gel y no se logra ver nada. Solo el std. 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz

8 Equipo 7 Muy bien chicos, Se ve claramente que la cantidad de topoisómeros disminuye cuando ponen 1 enzima y más cuando ponen 2 enzimas En el gel sobrepuesto, invertí los colores y cambie la intensidad, se observan más claramente las bandas pero aún no se nota la banda del inserto. Creó que lo que sucedió es que hay menos DNA en el carril de las dos enzimas, porque todas las bandas están más tenues. Std SD 1Enz 2Enz


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