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TOMA DE MUESTRAS PARA MICROBIOLOGÍA Bioq. Natalia Zalazar Hospital F. Abete 2014.

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1 TOMA DE MUESTRAS PARA MICROBIOLOGÍA Bioq. Natalia Zalazar Hospital F. Abete 2014

2 Toma de muestras Toda la información diagnóstica que el laboratorio de Microbiología puede proporcionar, DEPENDE DE LA CALIDAD DE LA MUESTRA RECIBIDA

3 RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS SIEMBRA EN MEDIOS DE CULTIVO IDENTIFICACIÓN DEL MICROORGANISMO PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS INFORME DE RESULTADOS

4 Cómo debería ser una buena muestra????

5 Es IMPRESCINDIBLE la comunicación entre el Médico y Microbiólogo para optimizar la toma de muestras y aumentar la calidad en la fase preanalítica

6 REQUISITOS DE UNA BUENA MUESTRA MICROBIOLOGICA Representativa del sitio de la infección En cantidad suficiente, y tomada en el momento adecuado( idealmente antes del uso de antibióticos) Tomada con técnica aséptica. En contenedor adecuado y estéril. Transporte óptimo al laboratorio. (tiempo, Temperatura, medios de transporte adecuados) Recipientes rotulados adecuadamente (nombre apellido, tipo de muestra y fecha de obtención) Protocolo de pedido completo

7 Nombre y Apellido. DNI Servicio de ingreso Hospitalario Fecha Diagnostico, enfermedad de base Tratamientos antibióticos previos Tipo de muestra y método de obtención DETERMINACIONES MICROBIOLOGICAS SOLICITADAS (gérmenes comunes, hongos, micobacterias) PROTOCOLO DE PEDIDO MICROBIOLÓGICO

8 HOSPITAL DE TRAUMA Y EMERGENCIAS DR. FEDERICO ABETE PEDIDO PARA ESTUDIOS MICROBIOLÓGICOS Fecha:________________ Nombre y Apellido: _________________________________________________________ DNI: _______________________________________ Edad: __________Sexo: M __ F __ Teléfono:_______________________ Ambulatorio: _________ Internado: ____________ Sala:___________ Cama:­­­­­­­___________ Material: __________________________________Método de obtención:____________________ Estudios solicitados: Bacteriológico: _____ Micológico: ____ (completar orden p/ estudio micológico) Métodos: Directo: ___ Cultivo: ______________ Antibiograma: _______ Otros:_______________ Diagnóstico presuntivo:____________________________ Estudios anteriores: SI___ NO___ Tratamiento Antibiótico: SI___ NO___ Cuál:_________________________________________ Firma y Sello del Médico solicitante:

9 HOSPITAL DE TRAUMA Y EMERGENCIAS DR. FEDERICO ABETE PEDIDO PARA ESTUDIOS MICOLÓGICOS Nombre y Apellido:_________________________________________________________ DNI:_______________________________________ Edad:______________ Teléfono:_______________________ DATOS CLINICOS Diagnóstico presuntivo: Fecha de inicio de los síntomas: Inmunodepresión: No__ Si __ Especificar: Otra enfermedad subyacente Antecedente de enfermedad pulmonar No __ Si __ Especificar: Paciente con catéter No __ Si __ Desde Hasta Paciente con sonda No __ Si __ Desde Hasta Tratamiento: AB__ 5FC__ FCZ __ ITZ __ Otros: Desde Hasta Dosis: Lugar de Residencia: Otras provincias o países que visitó o habitó: Otros datos (contacto con animales, vegetales, madera, trabajo rural, etc.): SOLICITUD Examen directo Cultivo Identificación de aislamiento Búsqueda de Pneumocystis jirovesi Sensibilidad Fluconazol MOTIVO Diagnóstico Control de Tratamiento Episodio recidivante Nº de episodio: Nº referencia de muestra/s anterior/es: Todos los datos requeridos a continuación son imprescindibles para el procesamiento de la muestra Tipo de Muestra Hemo-retrocultivo LCR Hemocultivo Orina por sonda Orina por punción Micción media Cortes histológicos o improntas para coloraciones especiales Muestra de origen pulmonar Especificar Biopsia (especificar) Ex. Ex. Orofaríngeo Ex. Vaginal F Fecha: Firma del Médico solicitante:

10 Sin rotular, o rotuladas inapropiadamente o con datos discordantes con respecto a los que figuran en el pedido. Derramadas. Enviadas sin el medio de transporte correspondiente o incorrectamente conservadas, por Ej. Muestras remitidas en formol. Duplicadas en el transcurso de 24hs., sin la aclaración del médico solicitante que la justifique. Se exceptúan los Hemocultivos. MUESTRAS RECHAZADAS

11 TIPOS DE MUESTRA SITIOS ESTÉRILES Orina (PSP) Sangre (Hemocultivo) Líq. Punción LCR Sinovial Pericárdico Pleural Peritoneal BiopsiasPuede ser de cualquier órgano

12 TIPOS DE MUESTRA SITIOS NO ESTÉRILES Esputo/BAL Secreciones Vaginal Uretral oral óticas Heridas Materia fecal

13 SANGRE HEMOCULTIVOS Lavarse las manos con agua y jabón y secarse con toalla descartable o gasa estéril. Desinfectar con alcohol 70% Colocar el lazo, palpar la vena a punzar. Desinfectar la piel con yodo povidona al 10%, con movimientos circulares del centro hacia afuera. Dejar actuar 1-2 minutos, esto es: hasta que se seque. NO VOLVER A PALPAR LA VENA Colocarse guantes estériles.Punzar la vena seleccionada y extraer sangre. SI SE PIERDE LA VENA DEBE DESINFECTARSE NUEVAMENTE LA PIEL. UNA VEZ SELECCIONADA LA NUEVA VENA USAR JERINGA Y AGUJAS NUEVAS Quitar la tapa protectora del frasco.Inclinar el frasco antes de colocar la sangre para evitar reflujo, homogeneizar por rotación para evitar la coagulación. El volumen de sangre a cultivar es el factor más importante en la recuperación del microorganismo. Por botella (1 – 3 ml Niños,0,5-2ml Neo,9-10 ml Adultos, Mycolitic (para micobacterias y hongos) 1-5ml. Cada frasco debe ser inoculado con una punción diferente en diferentes tiempos. NUNCA llenar todos los frascos con sangre provenientes de una sola punción.

14 CATÉTERES PREVIO a la remoción, o a la toma de sangre transcatéter, extraer 1 muestra de Hemocultivo de vena diferente a la del catéter PERO NUNCA a través del mismo. Desinfectar la piel con yodo povidona. Dejar actuar 1-2 minutos, esto es: hasta que se seque el antiséptico sobre la piel. Removible: Punta de catéter. Retirar las conexiones del catéter. Retirar el catéter y cortar el extremo distal aproximadamente 3-5 cm. Colocarlo en tubo estéril. NOTA: cuando se retire más de un catéter colocarlos en tubos diferentes e indicar su ubicación. NO Removible: Retrocultivo. Tomar una muestra de sangre transcatéter en otra botella (siempre el mismo volumen de sangre que el hemocultivo y en el mismo tipo de botella), que se incubarán al mismo tiempo, para que el aparato nos dé el tiempo de positivización.

15 LÍQUIDOS BIOLÓGICOS Peritoneal (ascitis), pericárdico, pleural, articular, LCR. Realizar antisepsia de piel con alcohol, haciendo círculos concéntricos desde el centro hacia la periferia en una zona de unos 10 cm de diámetro. Repetir el paso anterior con Yodo povidona al 10%, dejando secar durante un minuto. La toma se hace por punción percutánea (toracocentesis, paracentesis, punción pericárdica, lumbar o punción articular). Colocar el material en tubos estériles con tres gotas de heparina estéril para evitar su coagulación. Para líquido peritoneal (sospecha de peritonitis primaria), líquido de diálisis peritoneal ambulatoria y líquido sinovial se recomienda enviar la muestra en tubo estéril más una inoculación de la muestra en frasco de hemocultivo. Pacientes con shunts ventriculares: Hacer la toma del LCR del lugar de recolección del reservorio previa desinfección y antisepsia.

16 PUNCIONES- BIOPSIAS DE PARTES BLANDAS Y MATERIAL OSEO Líquidos de punción Lavado de manos, colocación de guantes estériles. Lesiones cerradas(celulitis, abscesos, colecciones) Realizar la antisepsia adecuada con alcohol al 70%y luego yodo povidona al 10%. Punción-aspiración de la lesión/absceso con jeringa y aguja, ingresando por la zona de mayor fluctuación. Colocar en un recipiente estéril de plástico con tapa rosca. Lesiones abiertas (traumatismos, abscesos) Lavar con solución fisiológica estéril la superficie de la herida para retirar la flora colonizante. Recoger la secreción mediante jeringa y aguja, punzando por piel sana y de zonas profundas. NOTA:Cuando la muestra sea insuficiente o fallida, cambiar descartables (jeringa y aguja), instilar solución fisiológica estéril (0,5 a 1ml.) y aspirar nuevamente.

17 Biopsias Si la lesión es grande o hay múltiples lesiones, obtener distintos especímenes de aproximadamente 0.5 x 0.5 cm cada una. Si es más de una muestra utilizar diferente bisturí para cada una, diferente frasco de envió, y rotular cada una con el tipo de material remitido (músculo, tejido celular subcutáneo, etc.) Si el envío no es inmediato colocar una gota de solución fisiológica estéril proporcional al tamaño de la biopsia. NO SE RECOMIENDA el hisopado de heridas o de fístulas: representa a menudo la colonización microbiana de la piel circundante.

18 TRACTO RESPIRATORIO Superior: Exudado de fauces Hisopar amígdalas y faringe posterior No tocar boca, lengua o úvula Colocar la muestra en tubo con medio de transporte. Inferior: Esputo Si usa dientes postizos retirarlos. Lavarse con cepillo sin dentífrico. Buches con agua y bicarbonato. Sonarse la nariz. Obtener el esputo tras una expectoración profunda, preferentemente matinal. La saliva no sirve para realizar este estudio. De no producirse expectoración espontánea, puede inducirse el esputo. Si el pedido incluye baciloscopía y/o micológico se deben recoger 3 muestras en 3 días sucesivos, en recipientes estériles de boca ancha.

19 Chorro medio: Lavarse las manos con agua y jabón y secar con una toalla limpia. Higienizar genitales con agua y jabón neutro (Colocar tampon vaginal) Primera de la mañana (mínimo 3 hs de retención) Recolectar la orina del chorro medio en recipiente estéril de boca ancha y cierre hermético. Paciente sondado Tomar orina luego del recambio de sonda. Por cateterización: Limpiar el orificio uretral/vestíbulo vaginal con jabón y agua. Con técnica estéril, introducir el catéter dentro de la vejiga. Recoger la parte media o final del flujo de orina en recipiente estéril. UROCULTIVO (ORINA)

20 COPROCULTIVOS (Materia fecal diarreica) Recoger la parte con moco, pus o sangre. Colocar la muestra en tubo con medio de transporte. Recolectar una porción de materia fecal diarreica recién emitida en frasco estéril sin conservante. PARASITOLÓGICO SERIADO DE MATERIA FECAL En frasco con formol al 5 % se recolectan 1 pequeña muestra de 1deposición diaria durante 7 días.

21 CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE Líq. de punción, sangre, humor vítreo, médula ósea, cérvix, conjuntiva, genitales, tracto respiratorio superior. BAL, lavado bronquial, aspirado traqueal, esputo, biopsias, pta. catéter, orina.

22 SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA Recepción de muestras Lunes a Viernes 8 a 18 hs. Sábados 8 a 12 hs. Revisión de resultados Lunes a Viernes 11:30 a 16 hs. Teléfono interno 439

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