Determinación de Volátiles por GC-NPD

Presentación del tema: "Determinación de Volátiles por GC-NPD"— Transcripción de la presentación:

1 Determinación de Volátiles por GC-NPD
Hikichi N., Mariño J. Laboratorio de Química y Toxicología. Instituto Técnico Forense. Poder Judicial. Montevideo. Uruguay

2 Para la búsqueda de tóxicos orgánicos fijos en muestras forenses, el Laboratorio de Química y Toxicología realiza un screening toxicológico basado principalmente en el Análisis Toxicológico Sistemático (ATS).

3 Análisis Toxicológico Sistemático
TLC GC/NPD y GC/ECD HPLC

4 GC/NPD Equipo: Agilent 6890 Detector: NPD; 300°C
Inyector: Split 1/10; 280°C Columna: OV1, 30m, 0.53mm,0.88µm. Carrier: Helio, 5 mL/min Horno: 150 °C - 2min °/min - 290° - 8 min

5 La búsqueda de compuestos volátiles no está incluído en esta sistemática.
Se desarrollaron técnicas basadas en el análisis del espacio de cabeza por GC/NPD para la detección de HCN y PH3, sin modificar los parámetros cromatográficos usados en el screening general, para no afectar el trabajo rutinario.

6 Fosfuro de Aluminio El fosfuro de aluminio es uno de los agrotóxicos clase I más usados en nuestro país; en el año 2003 se importaron kg. Por la acción de la humedad se genera fosfuro de hidrógeno. Se implementó una técnica para la detección de PH3 por GC/NPD.

7 Fosfuro de Aluminio Es utilizado en la fumigación de granos y semillas en silos, fundamentalmente en cultivos extensivos. También es usado en la fumigación del cuero, lana y semilla de ajo. Su presentación en pasta es utilizada en el control del taladro, plaga que ataca algunas especies frutales.

8 Fosfuro de Aluminio La fosfina es irritante pulmonar y tiene un TLV de 0.3ppm. No existen antídotos para este tipo de intoxicación, por lo tanto sólo se trata al paciente en forma sintomática, necesitándose asistencia respiratoria y reanimación hemodinámica en los casos graves. La muerte sobreviene en forma rápida cuando la exposición excede los 400 ppm en aire.

9 Preparación de la muestra para PH3
Colocar muestra en vial, precintar. Agregar H2SO4 1M Calentar a 60°C Inyectar 1 mL en GC-NPD

10 GC/NPD Equipo: Agilent 6890 Detector: NPD; 300°C
Inyector: Split 1/10; 280°C Columna: OV1, 30m, 0.53mm, 0.88µm. Carrier: Helio, 5 mL/min Horno: 30° - 5 min

11 Caso positivo AlP3 + H2O Caso negativo

12 Detección de HCN por colorimetría
Agregar 3 mL de NaOH 0.1M en el centro de la cámara de Conway. Agregar 4 mL de muestra y 4 mL de H2SO4 0.5M en la parte externa. Dejar 3 h a temperatura ambiente A 1 mL del reactivo del centro, agregar 2 mL de buffer fosfato y 1 mL de cloramina T. Dejar 2 min. Agregar 3 mL de piridina-ácido barbitúrico. Dejar 10 min. Leer a 580 nm.

13 Preparación de la muestra para HCN por GC/NPD
Preparar calibradores a 0.1; 0.5; 1.0; 2.0; 5.0 ppm. Colocar 500µL muestra o calibrador en vial con septum. Agregar 10 µL de ACN (1/2.000). Agregar 50 µL de H2SO4 1N. Tapar. Calentar a 60°C. Inyectar 1 mL en GC-NPD.

14 GC/NPD Equipo: Agilent 6890 Detector: NPD; 300°C
Inyector: Split 1/10; 280°C Columna: OV1, 30m, 0.53mm, 0.88µm. Carrier: Helio, 5 mL/min Horno: 30° - 5 min

15 HCN ACN

16 Estudio de tiempo y temperatura de calentamiento
Se analiza HCN a 5 ppm en agua a 25°C y 60°C, y a diferentes tiempos.

17 Estudio de tiempo y temperatura de calentamiento

18 Estudio de tiempo y temperatura de calentamiento

19 Estudio de volumen de vial
Se hacen curvas de calibración de HCN en agua a 0.1, 0.5, 1.0, 2.0 y 5.0 µg/mL con 3 réplicas en viales de 8 mL y de 20 mL, manteniendo el resto de las variables.

20 Estudio de volumen de vial
Vial de 8 mL

21 Estudio de volumen de vial
Vial de 20 mL

22 Estudio de efecto matriz
Se hacen curvas de calibración con vial de 20 mL en agua y se analizan controles en sangre a 0.2, 1.5 y 3 ppm.

23 Estudio de efecto matriz
* Control en sangre

24 Conclusiones El uso de esta metodología permitió determinar la presencia de fosfuro de hidrógeno en dos casos forenses, tanto en muestras de contenido gástrico como en sangre. El método implementado permite la detección y cuantificación de cianuro en muestras de sangre con un nivel de detección adecuado.

25 Conclusiones Estas técnicas fueron incoporadas a nuestro arsenal analítico, dado la rapidez para obtener el resultado y su bajo costo en reactivos.

26 Muchas gracias!!

27 Estudio de efecto matriz