ANTICUERPOS ANTI NUCLEARES Y SU RELACION CON EL AC. ANTI DFS70

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1 ANTICUERPOS ANTI NUCLEARES Y SU RELACION CON EL AC. ANTI DFS70
XVI Congreso Uruguayo de Patología Clínica ANTICUERPOS ANTI NUCLEARES Y SU RELACION CON EL AC. ANTI DFS70 Rodríguez, Natalia; Márquez, Alison; Buzzi, Celia; Garay, Micaela; Ballesté, Raquel. Depto.de Inmunología del Laboratorio de Patología Clínica, HOSPITAL DE CLINICAS, ,Montevideo - Uruguay  INTRODUCCIÓN  El patrón moteado fino denso (MFD) se visualiza típicamente como finos puntos distribuidos uniformemente en el núcleo en las células en interfase y en la cromatina de las células en metafase por Inmunofluorescencia indirecta (IFI) sobre células HEp-2. En los últimos años ha sido relacionado a la presencia de Anticuerpos (Ac) contra el antígeno (Ag) nuclear DFS-70/LEDGFp75(1). Dichos Ac. se han descrito en pacientes con enfermedades distintas a la enfermedad autoinmune sistémica (EAS) y también en sujetos sanos. La presencia del Ac Anti DFS-70 en forma aislada, sería un criterio de exclusión de EAS (2). Los sueros con patrón MFD por Ac. Anti DFS-70, al someterse al proceso de inmunoadsorción con  dicho Ag y ser nuevamente procesados por IFI sobre células HEP-2, se negativizan bajo el microscopio de inmunofluorescencia (MIF). El Ac puede ser confirmado  por técnicas de inmunoblot, quimioluminiscencia, entre otras. OBJETIVOS Determinar la frecuencia de sueros adsorbidos con Ag DFS-70 identificados como patrón MFD aislados (MFDa) y MFD acompañados de otros Ac. y confirmar la presencia de Ac Anti DFS-70 en los sueros que presentaron adsorción. METODOLOGÍA: Es un trabajo descriptivo de corte transversal. Se seleccionaron 35 sueros con ANA positivos con títulos ≥ 1/80, 25 (71,4%) con patrón MFD y 10 (28,6%) Homogéneo, procesados desde Marzo a Setiembre del 2016, por IFI sobre sustrato de células HEP-2 según indicación del fabricante (Kallestad-BIORAD); se les realizó inmunoadsorción con Ag DFS70 (NOVA Lite Hep-2 Select Kit with DAPI, en equipo semiautomatizado (PhD). Las láminas se evaluaron al MIF por 2 observadores, considerándose adsorción de DFS-70 cuando dichos sueros negativizaron su fluorescencia. Se buscaron Ac anti DNAds por IFI sobre sustrato de Crithidia luciliae (Kallestad) y Ac Anti Ag extraíbles del núcleo (ENA) por técnica de ELISA (INOVA). En 23 sueros se determinó Ac Anti DFS-70 por Inmunoblot (NOVA Dot Inova). Se definieron como MFDa a aquellos sueros con ANA positivos y patrón MFD que no se acompañan de Ac. Anti (ENA) ni Ac. Anti DNAds. RESULTADOS-Y-DISCUSIÓN:   Se procesaron 35 sueros de 33 pacientes, 28 de sexo femenino y 5 masculino, con edades entre 19 y 82 años (promedio: 49.7). 10 del total de 25 sueros con patrón MFD (40%) y 1 del total de 10 sueros con patrón homogéneo (10%) fueron adsorbidos. De los 11 sueros que presentaron adsorción de DFS-70, 5 (45,4%) fueron MFDa, 5 (45,4%) tuvieron DNAds o ENA positivos (4 con valores débiles positivos) y 1 (9,2%) con DNAds negativo pero sin dato de ENA. De los 23 sueros (11 adsorbidos y 12 sin adsorción) con determinación de Ac Anti DFS-70, solo 2 de 11 sueros adsorbidos fueron positivos, correspondiendo a un mismo paciente. Del total de sueros que presentaron adsorción, destacamos un 45,4% con MFDa, mientras que, un 90% de los sueros con patrón Homogéneo no presentaron adsorción. CONCLUSIONES:  Debido a, que de los 11 sueros que presentaron adsorción en solo 1 paciente confirmamos la presencia de Ac Anti DFS-70 por inmunoblot consideramos importante evaluar en un futuro el desempeño de esta técnica. Destacamos la importancia para el especialista del laboratorio de inmunología, el entrenamiento visual de reconocer los verdaderos patrones MFD siendo para ello fundamental contar con los test para la determinación de DFS-70. Referencias: 1. (M. Mahler, Hanly J., M. Fritzler. Importancia del patrón moteado fino denso sobre células HEp-2 y anticuerpos anti-DFS70 para el diagnóstico de enfermedades autoinmunes sistémicas. 11 Comentarios de autoinmunidad (2012) ). 2. (N. Bizzaro, E. Tonutti,M. Tampoia, M. Infantino. Specific chemoluminescence and mmunoasdorption tests for anti-DFS70 antibodies avoid false positive results by indirect immunofluorescence. Clinica Chimica Acta 451 (2015) 271–277).