Microbiología Clínica: Tema 1

Presentación del tema: "Microbiología Clínica: Tema 1"— Transcripción de la presentación:

1 Microbiología Clínica: Tema 1
Microbiología Clínica: Tema 1

2

3

4

5 INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA CLÍNICA
Microbiología Clínica: Tema 1

6 PROCESO DE APRENDIZAJE
Conocimientos SABER. Microbiología Medica. Microorganismos productores Hábitos SABER HACER. Microbiología Clínica. Pacientes con síndromes de etiologia microbiana Actitudes SABER SER MEDICO. Microbiología Clínica: Tema 1

7 MICROBIOLOGÍA CLÍNICA
Diagnósticos etiológicos preliminares. Utilización racional de las técnicas diagnósticas. Correcta obtención de muestras. Fundamentos de técnicas y métodos diagnósticos. Evaluación correcta de los resultados. Microbiología Clínica: Tema 1

8 FASES EN EL DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO
Clasificación inicial. Tiene una infección ? Clasificación sindrómica. Que muestras tomar ? Cuando tomarlas ? Como tomarlas ? Diagnósticos simultáneos o sucesivos Microbiología Clínica: Tema 1

9 FASES DEL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
Fase pre analítica: Proveer información sobre recogida/transporte y conservación de las muestras. Interpretación de los resultados. Utilización de la prueba. Fase analítica: Producir resultados de calidad. Fase post analítica: Revisar exactitud del resultado. Evaluar la relevancia clínica. Microbiología Clínica: Tema 1

10 Microbiología Clínica: Tema 1
RELEVANCIA CLÍNICA Modificación de nuestra actitud con el paciente: Gravedad del proceso Otras actividades derivadas Declaración obligatoria Aislamiento del paciente Indicación de profilaxis Microbiología Clínica: Tema 1

11 MISIONES DE UN SERVICIO DE MICROBIOLOGÍA
Información necesaria para tomar una decisión clínica y adopción de medidas preventivas. Normas de obtención de muestras para un correcto diagnóstico microbiológico. Identificación de microorganismos. Estudio de sensibilidad a antimicrobianos. Facilitar recepción de muestras. Envío rápido de resultados. Valoración de las técnicas diagnósticas. Puesta al día de los conocimientos. Microbiología Clínica: Tema 1

12 NO PIDAS NADA QUE SI ES POSITIVO NO SEPAS QUÉ HACER
UTILIZACIÓN DE UNA TÉCNICA DIAGNÓSTICA NO PIDAS NADA QUE SI ES POSITIVO NO SEPAS QUÉ HACER Microbiología Clínica: Tema 1

13 UTILIZACIÓN DE UNA TÉCNICA DIAGNÓSTICA
Valoración previa de que un paciente presente o no la enfermedad. Planteamiento inicial antes de solicitar una prueba diagnóstica de cual va a ser nuestra actitud y decisión después del resultado de la misma. Conocimiento de la eficacia de una prueba a utilizar. Microbiología Clínica: Tema 1

14 PARÁMETROS DE UNA TÉCNICA DIAGNÓSTICA
Sensibilidad Especificidad V.P.Positivo V.P.Negativo Eficiencia Relevancia clínica Verdadero positivo Verdadero negativo Falso positivo Falso negativo Microbiología Clínica: Tema 1

15 Microbiología Clínica: Tema 1
SENSIBILIDAD (S) Verdadero positivo (VP) S = X 100 (VP) + Falso negativo (FN) ESPECIFICIDAD (E) Verdadero negativo (VN) E = X 100 (VN) + Falso positivo (FP) Microbiología Clínica: Tema 1

16 Microbiología Clínica: Tema 1
EFICIENCIA VP + VN X 100 Total Microbiología Clínica: Tema 1

17 VALOR PREDICTIVO POSITIVO (VPP)
X 100 (VP) + (FP) VALOR PREDICTIVO NEGATIVO (VPN) (VN) VPN = X 100 (VN) + (FN) Microbiología Clínica: Tema 1

18 Microbiología Clínica: Tema 1
ERRORES DIAGNÓSTICOS Falso Positivo: Diagnóstico microbiológico de un paciente que no padece la enfermedad infecciosa. I.T.U. Falso Negativo: Descartar una patología infecciosa en un paciente infectado. Meningitis meningocócica. Microbiología Clínica: Tema 1

19 Microbiología Clínica: Tema 1
VALOR PREDICTIVO DE UNA PRUEBA CON UN 95% DE S. Y UN 95% DE E. VARIACIONES EN FUNCIÓN DE LA PREVALENCIA DE LA ENFERMEDAD Prev. Enfermedad (%) Valor Predictivo (%) 1 2 5 10 15 20 25 50 16’1 27’9 50 67’9 77 82’6 86’4 95 Microbiología Clínica: Tema 1

20 Microbiología Clínica: Tema 1
NORMAS GENERALES DE TOMA DE MUESTRAS CLÍNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO DE LAS EE.II. La muestra debe ser representativa del cuadro clínico. Debe obtenerse antes de la instauración del tratamiento antimicrobiano. En determinados procesos infecciosos (p. ej. septicemia) el momento de la obtención puede ser importante. Debe transportarse rápida y adecuadamente al laboratorio. Debe rotularse correctamente y venir acompañada de una orientación o juicio clínico que permita realizar las técnicas adecuadas al microorganismo sospechado. Microbiología Clínica: Tema 1

21 MUESTRAS PARA EL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO: TIPOS
Muestras de obtención directa de localizaciones estériles. Alta rentabilidad. Muestras de obtención indirecta de localizaciones estériles. Rentabilidad dependiente de la flora saprofita. Muestras obtenidas de localizaciones con flora microbiana. Muestras para el diagnóstico virológico. Alta rentabilidad , si no es flora viral habitual. Microbiología Clínica: Tema 1

22 PRINCIPALES MUESTRAS CLÍNICAS PARA AISLAMIENTO DE VIRUS
Cuadro clínico Exudado faríngeo LCR Orina Heces Vesículas Otros Meningitis y Encefalitis V. de la parotiditis Enterovirus Herpes simple Respiratorios: Gripe y V. parainfluenzae Adenovirus (++++) (+++) (+/-)/(++++) (++) (+/-) (-) (+) Biopsia (++++) Microbiología Clínica: Tema 1

23 Microbiología Clínica: Tema 1
MÉTODOS DIAGNÓSTICOS Métodos directos: Visualización del microorganismo. Aislamiento del microorganismo. Detección de antígenos. Detección de metabolitos, componentes y ácidos nucleicos. Métodos indirectos: Detección de anticuerpos: Diag. Serológico. Detección Respuesta Inmune Celular. Microbiología Clínica: Tema 1

24 Microbiología Clínica: Tema 1
PRINCIPALES TÉCNICAS MICROSCÓPICAS USADAS PARA LA VISUALIZACIÓN DE MICROORGANISMOS EN MUESTRAS CLÍNICAS Técnica Utilidad Microscopía óptica: Fresco Microscopía óptica: Tinción Microscopía campo oscuro Microscopía contraste de fases Microscopía luz ultravioleta Microscopía electrónica Hongos, parásitos y virus (efecto citopático) Bacterias, hongos y parásitos. Treponemas (chancro sifilítico) Hongos y parásitos (poca utilidad diagnóstica) Inmunofluorescencia(bacterias, hongos y parásitos. Virus (poca utilidad diagnóstica) Microbiología Clínica: Tema 1

25 VISUALIZACIÓN DEL MICROORGANISMO
Microscopía: diferentes tipos Examen en fresco Tinciones: Tinción de Gram Tinción de Ziehl-Neelsen Microbiología Clínica: Tema 1

26 TINCIÓN DE GRAM: APLICACIONES
LCR y otros fluidos estériles Esputo Exudado uretral Exudado vaginal Exudados inflamatorios Orina Microbiología Clínica: Tema 1

27 Microbiología Clínica: Tema 1
INFORMACIÓN QUE APORTA UNA TINCIÓN DE GRAM EN MUESTRAS CLÍNICAS (EXUDADOS INFLAMATORIOS Y FLUIDOS ESTÉRILES) Permite evaluar la calidad de la muestra. Presencia de: Células inflamatorias → muestra adecuada Células epiteliales → posible contaminación Permite visualizar la morfología, su disposición y localización intra o extracelular de las bacerias Permite diferenciar bacterias: Gram + y Gram – Permite detectar la presencia de flora contaminante Permite cuantificar el número de bacterias. Microbiología Clínica: Tema 1

28 AISLAMIENTO DEL MICRORGANISMO
Cultivo en medios artificiales: Nutritivos Selectivos Diferenciales Cultivos celulares: C. de órgano C. primarios C. Secundarios Línea celular Inoculación animal Microbiología Clínica: Tema 1

29 CARACTERÍSTICAS UTILIZADAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS
Crecimiento en distintos medios de cultivo Características bioquímicas Producción de toxinas Estructura antigénica Estructura genómica Microbiología Clínica: Tema 1

30 DETECCIÓN DIRECTA DE ANTÍGENOS MEDIANTE TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
Antígenos bacterianos H. influenzae S. pneumoniae N. meningitidis Antígenos fúngicos C. neoformans Antígenos víricos Rotavirus Adenovirus Microbiología Clínica: Tema 1

31 DETECCIÓN DIRECTA DE ANTÍGENOS MEDIANTE TÉCNICAS DE ELISA
Antígenos bacterianos S. pyogenes L. pneumophila C. trachomatis C. difficile (toxina) Antígenos fúngicos C. neoformans A. fumigatus Antígenos víricos Adenovirus Herpesvirus V. respiratorio sincitial Rotavirus Antígenos parasitarios G. lamblia C. parvum E. histolytica Microbiología Clínica: Tema 1

32 VENTAJAS DE LAS TÉCNICAS DE AMPLIFICACIÓN
Sensibilidad extrema (detectan hasta 1-10 microorganismos) Alta especificidad (diseño de cebadores en función de secuencias específicas del microorganismo) Rapidez de realización (máximo 24 horas) Detección de microorganismos viables y no viables Automatizables Microbiología Clínica: Tema 1

33 INCONVENIENTES DE LAS TÉCNICAS DE AMPLIFICACIÓN
Posibles falsos positivos Acondicionamiento especial del laboratorio Alto nivel de entrenamiento del personal Elevado coste inicial Microbiología Clínica: Tema 1

34 DIAGNÓSTICO MEDIANTE BIOCHIPS-MICROARRAYS
Se fundamenta en una técnica de afinidad utilizando sondas de ácidos nucleicos para hibridación soportadas en un chip. Es una aplicación de la Bioinformática. Un microarray es una herramienta para analizar la expresión genética que consiste en una pequeña membrana o un portaobjetos de vidrio que contienen muestras de muchos genes organizados según un petrón determinado. Microbiología Clínica: Tema 1

35 Microbiología Clínica: Tema 1

36 Microbiología Clínica: Tema 1

37 Microbiología Clínica: Tema 1

38 Experimento con un Microarray de ADN
Microbiología Clínica: Tema 1

39 Microbiología Clínica: Tema 1
VENTAJAS DE LA DETECCIÓN RÁPIDA DE LA RESISTENCIA MEDIANTE TÉCNICAS MOLECULARES Reducir el tiempo requerido para instauración tratamiento definitivo Evitar tratamientos incorrectos Detección de portadores infectados con microorganismos resistentes Reducción de costes y tiempo de estancia hospitalaria Microbiología Clínica: Tema 1

40 Microbiología Clínica: Tema 1
INCONVENIENTES DE LAS TÉCNICAS MOLECULARES DEN LA DETECCIÓN DE RESISTENCIAS Desconocimiento de la secuencia del gen/es implicados Casos con múltiples genes implicados Diferente grado de expresión de los genes en condiciones ambientales diferentes Los microorganismos de la flora saprofita poseen también genes de resistencia Microbiología Clínica: Tema 1

41 DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO: UTILIZACIÓN
Agente causal: No cultivable Peligroso su cultivo Crecimiento lento Cambiar el diagnóstico o el tratamiento Comprender el proceso de la enfermedad Estado inmunológico del paciente. Datos para Epidemiología. Microbiología Clínica: Tema 1

42 DETERMINACIONES SEROLÓGICAS
Inmunofluorescencia Directa Indirecta Radioinmunoanálisis Enzimainmunoanálisis ELISA tipo1 ELISA tipo2 ELISA tipo3 (captura) Microbiología Clínica: Tema 1

43 DETERMINACIONES SEROLÓGICAS
Precipitación Medio sólido Medio líquido Aglutinación Directa Hemaglutinación Látex Fijación de complemento Microbiología Clínica: Tema 1

44 Interpretación de la Serologia
Parejas de sueros - Seroconversion. Negativo a Positivo - Serorefuerzo Titulo .inicial x 4 o más. Infecciones cronicas. -Deteccion IgM. Acs frente a diversos antigenos. Periodo Ventana

45 Diag. Serológico. Infecciones
Valoración de IgG E IgM específica. Valoración de IgG. Avidez. Diagnóstico de Primoinfección.

46 Diag. Serológico. Objetivos
Diag. Etiológico por la Respuesta Inmune Humoral. Determinar Protección Frente a Infecciones. Determinar Prevalencia de Infecciones.

47 DETECCIÓN DE RESPUESTA INMUNE CELULAR
Pruebas cutáneas Activación linfocitaria Inhibición de los macrófagos Linfotoxicidad. Actualmente NO se usan Microbiología Clínica: Tema 1