Presencia de residuos de pyraclostrobin en mandarinas luego de ser aplicado en el control químico de Mancha marrón Kulczycki Waskowicz C. 1 ; Sosa A. 1 ; Garrán, S. 1 ; Mika, R. 1 ; Mousqués, J. 1 ; Magni, F. 2 ; García, S. 2 ; Beldoménico H. 2, Repetti M. 2 1 Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria, Concordia, Entre Ríos. 2 PRINARC, Programa de Investigación y Análisis de Residuos de Contaminantes Químicos Facultad de Ingeniería Química, Universidad Nacional del Litoral, Santa Fe. Mancha marrón (Alternaria alternata patovar citri) es una enfermedad que afecta severamente algunas variedades de mandarinas disminuyendo la productividad y calidad. Uno de los fungicidas más usados es pyraclostrobín. El control químico constituye la medida más eficiente en lotes afectados. En INTA Concordia, se desarrollan programas de control teniendo en cuenta el concepto de manejo integrado de plagas y momentos de aplicación, con el fin de obtener fruta de mejor calidad e inocuidad, además de minimizar el impacto ambiental. Bajo estos requisitos y para cumplir la legislación nacional e internacional, es necesario realizar estudios de residuos que pueden generar problemas durante la comercialización ya sea por no cumplir con las normativas del “límite máximo de residuos” (LMR: 0.5 mg/kg) estipuladas por SENASA (2010), y/o internacionales. Los principales mercados de exportación de cítricos del NEA son la Unión Europea (UE), LMR 1 mg/kg y “dosis de referencia aguda” - ARfD de 0.03mg/kg); y la Federación de Rusia (FR), LMR 1 mg/kg, cada uno con requisitos específicos sobre inocuidad. Además se suman cadenas de hipermercados con demandas mas restrictivas que la propia legislación; como permitir la presencia de solo 3-5 residuos de diferentes principios activos, 30-50% del LMR estipulado legalmente. El objetivo fue determinar residuos de pyraclostrobin en mandarina Nova cuando esta alcanza la madurez comercial estudiando las posibles variaciones, persistencia y efecto acumulativo de sucesivas aplicaciones para controlar mancha marrón. INTRODUCCIÓN Y OBJETIVO Como se puede observar en la Fig. 6 los diferentes tratamientos, durante las 3 temporadas (campañas 2009/2010, 2010/2011 y 2011/2012) los valores de residuos son extremadamente bajos, pudiendo ser considerados bajo el concepto de “trazas”. Oscilan desde valores “no cuantificables”, es decir menores a 0.33 ng/g (< mg/kg-LC) hasta valores que no superan de 0.77 ng/g (ó mg/kg). Esto puede explicarse ya que la primer aplicación de pyraclostrobin comienzan en los meses de septiembre (año 2010) u octubre (año 2009 y 2011) como protección de los brotes cuando todavía no se ha realizado el “cuaje” de los frutos o esta es reciente. Con el paso del tiempo, se produce un rápido aumento del volumen del fruto, luego de pasar entre uno y 3 meses sin aplicar, se realiza la 2° aplicación de pyraclostrobin. Durante este periodo la fruta está expuesta a los factores climáticos (radiancia, temperatura, lluvia, etc.) que producen la degradación del fungicida. La disipación a través de la cáscara y en el interior de la fruta continúa, y por último, la dilución por el abrupto crecimiento de su tamaño (valores que se multiplican varias veces hasta alcanzar su tamaño final) al momento de cosecha. Así, no se observa efecto acumulativo de residuos. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Referencias Bibliográficas Los estudios se realizaron en una quinta perteneciente a un productor de Cnia. “La Argentina”, Entre Ríos, en lotes comerciales de mandarina Nova infectada con Alternaria, cuya edad de las plantas era de 25 años y la distancia de plantación: 5 x 2,5 m. En todas las campañas el pyraclostrobin se preparó al 0,02 % de producto comercial (25% EC) y se adicionó aceite mineral al 0,25%. Las aplicaciones se realizaron con manguera mediante un equipo PUMA hasta punto de goteo. En todos los casos se utilizó un diseño de bloques completos al azar, 3 repeticiones por programa y un testigo sin tratar. Se aplicó pyraclostrobin al 0,02 % de producto comercial con aceite mineral al 0,25 con manguera mediante un equipo PUMA hasta punto de goteo (Fig.2). En la campaña 2009/2010, las 2 aplicaciones del producto comercial (Trat 1 y 2) se realizaron en el mes de octubre y febrero respectivamente (intervalo de 3 meses sin aplicar). En los Trat. 3 y 4 se realizaron una sola aplicación en enero En la campaña 2010/2011, las 2 aplicaciones se realizaron en los meses de septiembre y enero del 2010 respectivamente (intervalo de 3 meses sin aplicar). En los Trat. 3 y 4, en noviembre y enero del 2011(intervalo de 1 mes sin aplicar). En la campaña 2011/2012, las 3 aplicaciones del producto comercial (Trat. 1,2 y 3) se realizaron en octubre y diciembre. En los Trat. 4 y 5, en noviembre y enero 2012 respectivamente (intervalo de 1 mes sin aplicar). Las muestras se tomaron al momento de cosecha, en el mes de mayo (Codex Alim., 1993) de las repeticiones 1, 2 y 3; y un “testigo”. Se trituraron y conservaron en freezer a -18 °C. MATERIALES Y MÉTODOS CONCLUSIÓN Fig. 2. Aplicación de pyraclostrobin Fig. 4. Momento de cosecha: mayo Fig. 3. Momento de aplicación de pyraclostrobin Fig. 5. Análisis de residuos de pyraclostrobin Los análisis de residuos se realizaron, por triplicado, en el laboratorio de residuos de la Facultad de Ingeniería Química de la Universidad Nacional del Litoral (PRINARC) con un equipo de cromatografía líquida de ultra alta resolución acoplado a detector de espectrometría de masas(UHPLC-MSMS). Se utilizó la metodología QuEChERS propuesta por Leseuer y col. (2008) para el análisis de plaguicidas basado en la extracción del plaguicida con acetonitrilo, “clean up” de la muestra hasta obtener el extracto listo para la inyección. El método fue validado de acuerdo al documento SANCO N ° 12495/2011. El límite de detección (LD) fue de 0.10 ng/g ( mg/kg) (evaluado como tres veces la señal de relación de ruido) y el límite de cuantificación (LC): 0.3 ng/g (0,0003 mg/kg) - % recuperación (n=6) 87 - Incertidumbre (%) 20. Fig. 6. Residuos de Pyraclostrobin al momento de cosecha de mandarina Nova – en ng/g Fig.1 Mandarina Nova con Alternaria alternata -- LD: Límite de detección – LC: límite de cuantificación LC LD Por otro lado, al momento de cosecha, ya pasaron entre meses de la última aplicación. La de 3 meses sería la de mayor riesgo de presencia de residuos debido a la fecha de pulverización más cercana a la cosecha. Esto no se observó y puede ser explicado debido a que el periodo de carencia (PC) del pyraclostrobin es de 15 días para alcanzar un valor sin riesgo toxicológico (por debajo del LMR de 0.5 mg/kg). Por lo tanto, 3 meses supera ampliamente el PC. Similar situación se da con la legislación internacional ya que los valores de residuos e pyraclostrobin están muy por debajo de las exigencias de la UE (ARfD, de 0.03mg/kg) y de la Fed. de Rusia y Canadá. Los programas de control de Alternaria Alternata desarrollados por INTA, solo generan “trazas” de residuos de pyraclostrobin, sin efecto acumulativo, que no superan las mg/kg reduciendo al mínimo el riesgo comercial y el riesgo toxicológico de los consumidores. Codex Alimentarius Mét. recom de muestreo para residuos de plag. Vol. 2// Leseuer, C., Knittl, P., Gartner, M, Mentler, A., Fuerhacker, M “Analysis of 140 pesticides from conventional farming foodstuff samples after extraction with the modified QuECheRS method”. Food Control. // SENASA Res 934/2010 Boletín Of de Rep. Argentina, Nº LMR (mg/kg) Reg. (EU) N o 51/2014 Fed. Rusia EUA - Canadá Argentina SENASAPyraclostrobin10,320,5 Fig. 7. LMR de pyraclostrobin en mandarina en diferentes destinos