1065. Inmunología Aplicada Enseñanza Experimental FAGOCITOSIS Y TINCIÓN DE MACRÓFAGOS MEDIANTE LA ACTIVIDAD DE LA ESTERASA INESPECÍFICA
FAGOCITOSIS DE LEVADURAS Rotular 5 portaobjetos: Tiempo 0, 5, 10, 15 y 30 Adicionar 1 gota de levadura a la susp celular Antes de incubar tomar 20 mL de la susp celular (tiempo 0) Después de 5, 10, 15 y 30 min de incubación a 37ºC tomar 20 mL de la susp Depositar en cubreobjetos Dejar secar la gota. Fijarla con etanol frío Lavarlos con agua destilada y secar al aire Teñir con azul de metileno 5-10 segundos Lavar con agua dest. Observar y calcular % de células fagocíticas
TINCIÓN DE LA ESTERASA INESPECÍFICA En un portaobjetos depositar 20 mL de susp. de macrófagos Fijar las células con etanol. Dejar secar al aire Lavar con agua destilada y secar al aire Preparar el sustrato: a-naftilbutirato pararosanilina Cubrir con el sustrato el portaobjetos sin derramar Incubar a 37ºC (5% de CO2) por 45 min en cámara húmeda Contrastar con azul de metileno 5-10 segundos Lavar con agua destilada y secar al aire. Observar