IDENTIFICACION DE MICORRIZAS EN Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal)

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1 IDENTIFICACION DE MICORRIZAS EN Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) Salas González Paola

2 INTRODUCCION ESPECIES
son Conjunto de individuos procedentes de antecesores comunes, capaces de reproducirse entre si y dejar descendencia fértil Se clasifican en DOMINIOS BACTERIA ARCHAE EUCARYA Reinos Eubacteria Archaeobacteria Fungi Plantae Animalia Protista heterótrofos autótrofos forman relaciones simbióticas llamadas

3 Simbiosis entre un hongo y la raíz de una planta
micorrizas son Simbiosis entre un hongo y la raíz de una planta en las que La planta El hongo recibe recibe nutrientes mayor Protección contra patógenos glucosa vitaminas Lípidos, P, N, Cu, Zn otros Absorción de agua Fijación de CO2 tipos ectomicorrizas endomicorrizas ectoendomicorrizas Hifas no penetran en la raíz Hifas introducidas en la raíz Hifas dentro y fuera de la raíz

4 Opuntia microdasys var. rufispina
Echinopsis multiplex Rosa spp. IMPORTANCIA Agricultura Economía Ecología

5 OBJETIVO GENERAL Identificar la presencia de micorrizas en Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal)

6 OBJETIVOS PARTICULARES
Observar presencia de micorrizas en Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) . Extraer esporas de los hongos que tienen asociaciones mirorrízicas en Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) . Identificar a los hongos que micorrizan a Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) .

7 HIPOTESIS Las cactáceas Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marron/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) . presentaran asociaciones micorrizicas

8 Se observo micelio extra e intrarradicular, vesículas y esporas
METODOLOGIA TINCION DE RAICES KOH 10% HCL 10% 10 min. Se colectaron raíces secundarias 24 hrs. lactoglicerol Azul de tripano al 0.05% x 24 hrs. a temp. ambiente Se observo micelio extra e intrarradicular, vesículas y esporas

9 EXTRACCION DE ESPORAS con agua destilada a 3 500 r.p.m por 4 min.
Pesar 100 gr de suelo seco Se enjuago con agua destilada. Suspender el pellet con sacarosa al 40% y mezclar. Centrifugar a 3500 r.p.m por 30 seg.

10 EXTRACCION DEL DNA POR EL METODO AP
Se extrajeron raíces micorrizadas Se macero en un tubo eppendorf con 250 µl de buffer AP. Después se completo a un volumen de 750 µl. Se incubo por 30 min a temp. ambiente Centrifugar a r.p.m. por 1 min. Tomó el sobrenadante y se paso a un tubo limpio. Se agrego 500 µl de fenol-cloroformo (V-V) Centrifugar a r.p.m. por 3 min. Ser recupero la fase acuosa y se paso a otro tubo Repetir últimos dos pasos Precipito con 500 µl de isopropanol y 50 µl de acetato de amonio 10 M, mezclar

11 Centrifugar a 12 000 r.p.m. por 10 min.
Se tiro sobrenadante y se conservo la pastilla. Lavo con 50µl de etanol al 70%. Centrifugar por 3 min. Tirar etanol. Repetir últimos dos pasos Se puso el tubo boca abajo sobre un papel para dejar secar la pastilla Se resuspendio la pastilla en 30 a 50 µl de agua libre de nucleasas o agua desionizada estéril. Se guardo el DNA a 4°C Se corrio en una electroforesis

12 Figura 1. Echinopsis multiplex (biznaga)
RESULTADOS Se observo la presencia de hifas y algunos arbúsculos en las diferentes plantas. CACTACEAS hifas Figura 1. Echinopsis multiplex (biznaga) arbúsculos

13 arbúsculos hifas

14 Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marron/rojizos)
hifas Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marron/rojizos)

15 DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Las diferentes especies de plantas mostraron estructuras fúngicas en sus raíces, con diferente nivel de colonización.

16 CONCLUSIONES Algunos factores como grosor de la raíz, tipo de suelo, cantidad de agua influyen en la presencia de micorrizas La presencia de micorrizas es importante para la disminución del costo al producir las especies de plantas

17 PROPUESTA Identificación hongos micorrizicos aislamiento propagación
para para propagación factores Para hacer biofertilizantes