BRUCELLA

TAXONOMIA Clase: Proteobacteria Subclase: Alfa Orden: Rizobiales Familia: Brucellaceae Género: Brucella

GENERO BRUCELLA abortus (8 biovars) suis (5 biovars) HUÉSPEDES HABITUALES ESPECIE abortus (8 biovars) suis (5 biovars) melitensis (3 biovars) canis (1 biovar) ovis (1 biovar) neotomae (1 biovar) maris (2 biovars) BOVINO PORCINO CAPRINO OVINO CANINO ROEDORES MAMÍFEROS MARINOS

AISLAMIENTO DE LAS ESPECIES DE Brucella 1886 - Bruce - Br. melitensis del hombre 1897 - Bang - Br. abortus de bovinos 1914 - Traum - Br. suis de porcinos 1953 - Buddle y Boyes - Br. ovis de ovinos 1957 - Stoenner y Lackman - Br. neotomae de ratas 1966 - Carmichael - Br. canis de caninos 1994 – Ross et al – Br. cetaceae de delfines, bufeos 1994 – Ross et al – Br. pinnipediae de focas

CARÁCTERÍSTICAS DEL MICROORGANISMO COCOBACILO AEROBIO, GRAM NEGATIVO, INTRACELULAR FACULTATIVO. INMOVIL, NO ESPORULADO, NO CAPSULADO. SE TIÑE DE COLOR ROSADO CON LA TINCIÓN MODIFICADA DE ZIEHL-NIELSEN. NECESIDAD DE CO2

Intracelulares facultativos Intracelulares obligados RELACIÓN CON LA CÉLULA HOSPEDADORA Membrana celular Intracelulares facultativos Intracelulares obligados Célula hospedadora Extracelulares

TIPOS CARACTERÍSTICOS DE ENVOLTURA GRAM + GLUCOPÉPTIDO PROTEÍNAS ÁCIDO LIPOTEICOICO ÁCIDOS TEICURÓNICOS POLISACÁRIDOS AAR GLUCOPÉPTIDO POLIPÉPTIDOS GLUCOLÍPIDOS ÁCIDO MICÓLICO ARABINOGALACTANOS CERA DE SULFOLÍPIDOS MICÓSIDOS GRAM - GLUCOPÉPTIDO LIPOPROTEÍNAS MEMBRANA EXTERNA LIPOPOLISACÁRIDOS PROTEÍNAS FOSFOLÍPIDOS POLISACÁRIDOS

ESTRUCTURA ANTIGÉNICA B. abortus B. suis B. melitensis A M

catalasa FAGOSOMA Gránulo secundario 5´GMP NADPH oxidasa NADPH NADP+ primario Lisozima Proteasas Defensinas O-2 H+ SOD H2O2 catalasa Cl- Cl- MPO Lisozima Lactoferrina HOCl DEGRADACIÓN

Bacteria Sideróforo Célula Fe3+ Fe3+ Fe3+ Fe3+ Receptor Fe2+ Fe2+ Proteínas portadoras Bacteria Sideróforo Célula Lactoferrina Fe3+ Fe3+ Transferrina Fe3+ Fe3+ Receptor Fe2+ Hemoglobina Fe2+

POSIBLES MECANISMOS DE SUPERVIVENCIA PERMANECE EN EL FAGOSOMA INTACTO Y BLOQUEA LA FUSIÓN POSTERIOR CON EL LISOSOMA DEBE RESISTIR POTENTES INTERMEDIARIOS DEL O2 (H2O2 Y RADICALES OXHIDRILOS) INHIBE EL ESTALLIDO RESPIRATORIO O LO PROVOCA MUY DÉBILMENTE Y DE CORTA DURACIÓN) SE PUEDE REFUGIAR FUERA DEL ALCANCE DEL LISOSOMA. SE DESCRIBIÓ SU PRESENCIA EN EL RER DE DIFERENTES CÉLULAS, AUNQUE NO EN MACRÓFAGOS PRODUCCIÓN DE GUANOSINA 5´MONOFOSFATO (GMP) Y ADENINA QUE INHIBEN FUSION FAGO-LISOSOMA, DEGRANULACIÓN, ACTIVACIÓN SISTEMA MIELOPEROXIDASA-HALURO Y LA PRODUCCIÓN DE TNF

Estrategias para evadir el sistema inmune Cápsula externa Proteasas especificas IgAasa Peptidasa C5b Modificación de la estructura del antigeno LPS O Exotoxina citolitica que matan fagocitos Produciendo y viviendo dentro de un biofilm Evitando la fagocitosis Uniendo antigenos del hospedador a la superficie celular. Específicamente la proteina A y G con el receptor Fc de las inmunoglobulinas. Supervivencia dentro de fagocitos Producción de proteasa no especifica Invasión no fagocítica de las células

SELECCIÓN DE MUESTRAS SUERO, CALOSTRO, LECHE FLUJO VAGINAL, PLACENTA Y COTILEDONES SEMEN LIQ. ABCESOS, HIGROMAS, BURSITIS ANIMALES VIVOS PRODUCTOS DE ABORTO CONTENIDO CUAJAR PULMÓN, BAZO MEMBRANAS FETALES

DISTRIBUCIÓN DE B abortus EN EL ANIMAL INFECTADO TEJIDO O LIQ. ORGÁNICO PROBABILIDAD EN % CONT CUAJAR 98 PULMÓN ÓRGANOS FETO 95 LIQ. HIGROMAS 90 GANG. RETROMAMARIOS 80 GANG. ILÍACOS 65 TESTÍCULOS 60 LECHE 50 OTROS GANG. 10-30 BAZO 10 HÍGADO 5

DIAGNÓSTICO HISTOPATOLÓGICO SEROLÓGICO BACTERIOLÓGICO

DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO Método de Köster Método de Ziehl-Neelsen modificado Inmunofluorescencia TÉCNICAS BACTERIOSCÓPICAS Medios sólidos Medios líquidos Medio difásico PROCEDIMIENTOS DE CULTIVO Cobayos Lauchas Hámsters INOCULACION EXPERIMENTAL

Diferenciación de especies Ureasa requerimiento de CO2 producción de SH2 desarrollo en presencia de tionina desarrollo en presencia de fucsina aglutinación con sueros monoespecíficos tipificación por bacteriófagos

MEDIO DE CASTAÑEDA Usado de humanos para hemocultivo

INHIBICIÓN POR TIONINA

INHIBICIÓN POR FUCSINA

LISIS POR FAGO RESISTENCIA

COLORACIÓN DE STAMP COLORACIÓN DE STAMP COLORACIÓN DE STAMP

PRUEBAS PARA MEDIR E IDENTIFICAR LA RESPUESTA INMUNE TEST DE ELISA INMUNOFLUORESCENCIA RADIOINMUNOENSAYO PRIMARIAS AGLUTINACIÓN PRECIPITACIÓN FIJ COMPLEMENTO SECUNDARIAS NEUTRALIZACIÓN PROTECCIÓN TERCIARIAS PRUEBAS BÁSICAS MOLECULARES PCR HIBRIDACIÓN

TÉCNICAS UTILIZADAS PRUEBA TAMIZ: BPA PRUEBAS COMPLEMENTARIAS: 2 MERCAPTOETANOL - RIVANOL PRUEBA DEFINITORIA: FIJ COMPLEMENTO PRUEBA DE VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA: PRUEBA ANILLO EN LECHE (PAL) OTRAS: ELISA-I, ELISA-C

SEROLOGÍA

PRUEBA DE BPA (ANTÍGENO BUFFERADO)

PRUEBA LENTA EN TUBO – 2 MERCAPTOETANOL

FIJACIÓN DE COMPLEMENTO

PRUEBA DEL ANILLO EN LECHE (PAL)

INMUNODIFUSIÓN EN GEL DE AGAR (AGID)