Prof. Juan López Márfull Agosto de 2011 Electroforesis Prof. Juan López Márfull Agosto de 2011
Técnica La electroforesis es una técnica para la separación de mezclas de biomoléculas sobre la base de su tamaño molecular y carga eléctrica. Por biomoléculas entendemos lípidos, proteínas y ácidos nucleicos.
El inventor… En 1937 el bioquímico sueco Arne Tiselius (1902 – 1971), dio a conocer un nuevo método para separar las proteínas de una mezcla. Este consistía en colocar un volumen de una mezcla proteica en un tubo de vidrio en forma de U sin llenarlo completamente. Luego el espacio restante en cada extremo se ocupaba con el volumen necesario de una solución de electrolitos libre de proteína, que actuaba como amortiguador. Debía tenerse mucha precaución al adicionar la solución amortiguadora, evitando que se mezclara con la solución de proteínas a separar.
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo eléctrico, experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta.
Procedimiento básico
Electroforesis en gel de agarosa
resultados El ADN tiene carga negativa, y en un campo eléctrico migra hacia el electrodo positivo. La velocidad de migración a través del gel es inversamente proporcional al tamaño del fragmento.
La movilidad electroforética depende de
resultados
autorradiografía To visualize the results after electrophoresis, the gel is soaked in a solution that causes DNA to fluoresce when exposed to ultraviolet light.
Aplicaciones
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