CÉLULAS TUMORALES CIRCULANTES EN PACIENTES CON CÁNCER DE MAMA PRECOZ Tema: cáncer de mama Autores: Luz Pombo Parada*, Antonio Fernández Aramburo*, Ana Isabel Ferrer Pérez*, Manoli Baldoví Martínez-Falero*, Carmen GIl Gas#, Paloma Honrubia Gómez#, Carmen Ramírez Castillejo#, Carmen Soriano, Rodríguez*, José Luis Sánchez Sánchez*, José María García Bueno*. Filiación: *Sección de Oncología Médica, Complejo hospitalario Universitario de Albacete. #Centro Regional de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Castilla-la Mancha. Introdución y objetivo: Pacientes y métodos: Pacientes con cáncer de mama localizado que reciben quimioterapia adyuvante. Se han estudiado los niveles de CTC en muestras de sangre mediante los marcadores BCRP1 y EpCAM. -Extracción de la fracción de células nucleadas presentes en sangre periférica mediante gradiente de Ficoll-Paque -Marcaje con anticuerpos monoclonales. -Análisis mediante citometría (clitómetro LSRII). Anticuerpos:EpCAM (clon HEA-125) Miltenyi, BCRP1 (clon 5D3) Millipore. Las células tumorales circulantes (CTC) han sido estudiadas en pacientes con cáncer avanzado. Su presencia se relaciona con el pronóstico y existe ya un método validado por la FDA para su utilización en la práctica clínica, basado en la detección del marcador de membrana EpCAM. El presente estudio pretende establecer los niveles de CTC en pacientes con cáncer de mama precoz. El objetivo de este estudio es analizar los niveles de CTC en dichas pacientes tras el tratamiento quirúrgico. La expresión de BCRP1 es significativamente mayor en el grupo de pacientes con neoplasia activa respecto a los pacientes libres de neoplasia, mientras que la expresión de EpCAM no muestra diferencias significativas. El análisis de los marcadores se realizó a partir de la fracción de células nucleadas de sangre periférica de pacientes con carcinoma de mama y posteriormente inmunofenotipicada con anticuerpos monoclonales anti-BCRP1-FITC y anti-EpCAM-PE (dilución 1:10). Las pacientes se agruparon en función de la evolución clínica. La comparación de medias mediante el test de la T de student para la expresión de cada una de las proteínas generó un p-valor de 0,0002 para la expresión de la proteína BCRP1 y un p-valor de 0,13 para la proteína EpCAM. A: Comparación de medias para las poblaciones de BCRP1 y EpCAM B: Diagrama de puntos mostrando la expresión de la proteína BCRP1 y EpCAM en poblaciones celulares sanguíneas de pacientes con neoplasia activa y libres de neoplasia Resultados: Se analizaron muestras de sangre de 20 pacientes con cáncer de mama precoz tras la cirugía radical. Ninguna de ellas presentó niveles significativos del marcador EpCAM pero 7 sí presentaron valores elevados de BCRP1, presentando todas ellas afectación axilar. El estudio continúa en marcha con el reclutamiento de más pacientes. Agradecimiento: Estudio financiado en parte gracias a la colaboración de la Asociación de Mujeres Afectas de Cáncer de Mama y Ginecológico de Albacete (AMAC). Conclusiones: Para la detección de CTC tras la cirugía en cáncer de mama precoz el marcador EpCAM no es útil. Sin embargo, el marcador BCRP1 sí puede resultar eficaz. El presente estudio se ampliará a más pacientes y se analizará la variación de los niveles de CTC con el tratamiento adyuvante y su influencia en el pronóstico.