DEFECTOS GENÉTICOS DE DEFICIENCIA DE CREATINA Becaria: Bioq. Adriana Fochesato Directora: Dra. Dora Martínez Centro de Estudio de las Metabolopatías Congénitas (CEMECO )

Deficiencia de Creatina Deficiencia de Creatina Constituyen un grupo de enfermedades provocadas por alteraciones en la síntesis y en el transporte de Creatina

Glicina 1. Síntesis de creatina (Hígado, páncreas) Arginina Guanidinoacetato GAMT S-adenosilmetionina S-adenosilhomocisteína Ornitina Creatina CRTR Creatina 2. Captación de creatina (cerebro, músculo) 3. Sistema creatina/ creatina fosfato (cerebro, músculo) Creatina/fosfato CK Creatinina 4. Creatinina urinaria Conversión no-enzimática Conversión no-enzimática AGAT ATPADP VIA METABOLICA DE CREATINA

Deficiencia en GAMT (dGAMT) Deficiencia en transportador (dCRTR) Deficiencia en AGAT (dAGAT) PATOLOGIAS HEREDITARIAS EN LA BIOSINTESIS DE LA Cr

Glycina 1. Síntesis de creatina (Hígado, páncreas) Arginina Guanidinoacetato GAMT S-adenosilmetionina S-adenosilhomocisteína Ornitina Creatina CRTR Creatina 2. Captación de creatina (cerebro, músculo) 3. Sistema creatina/ creatina fosfato (cerebro, músculo) Creatina/fosfato CK Creatinina 4. Creatinina urinaria Conversión no-enzimática Conversión no-enzimática AGAT ATPADP DEFECTOS METABOLICOS EN LA DEFICIENCIA DE CR

d-AGAT d-GAMT d-CRTR  Tipo de herencia AR AR Ligada-X  Retraso del desarrollo +    Retardo mental +    Conducta autista -  +  Retraso en el lenguaje +  +  Convulsiones +  +  Hipotonía – + -  Signos piramidales y extra piramidales  Incremento circunferencia -- + cefálica Características Clínicas de los DGDC

ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS d-AGAT d-GAMT d-CRTR Espectroscopía  Espectroscopía de resonancia magnética de resonancia magnética H 1 “in vivo” ( ERM H 1 ) H 1 “in vivo” ( ERM H 1 ) Cr/CrP AusenteAusenteAusente GAA Normal RMN de cerebro  RMN de cerebro (Globus pallidus) Anormal EEG  EEG AnormalAnormal AnormalAnormalAnormal

Contribuir desde la bioquímica al desarrollo de un nuevo capítulo de la Genética Médica, relacionados a los severos defectos innatos de la biosíntesis y transporte de la Creatina, dentro de un contexto multidisciplinario de Investigación Clínica. Contribuir desde la bioquímica al desarrollo de un nuevo capítulo de la Genética Médica, relacionados a los severos defectos innatos de la biosíntesis y transporte de la Creatina, dentro de un contexto multidisciplinario de Investigación Clínica. OBJETIVOS GENERALES

OBJETIVOS ESPECÍFICOS Cumplimentar el algoritmo de los DGDC, a través de los siguientes objetivos: 1.Analizar el perfil bioquímico de los presuntos sujetos involucrados. 2.Confirmar el diagnóstico del probando e identificar portadores. 3.Difundir a la comunidad médica y científica los resultados obtenidos.

Determinación de GAA, Cr y Crn en orina Compatibilidad CompatibilidadFenotípica Determinar GAA en plasma Determinar GAA en plasma ERM H 1 ERM H 1 dAGATdGAMT Estudios Enzimáticos y Moleculares Determinar Cr en plasma ERM H 1 dCRTR Estudios de captación de Cr y Moleculares GAA GAA N Cr/ Crn  GAA N Cr/Crn N Investigar otras patologías Perfiles de los DGDC

RESULTADOS Se analizaron 93 muestras de orina Se analizaron 93 muestras de orina Método Cualitativo Sakaguchi: 3,09 % PositivoMétodo Cualitativo Sakaguchi: 3,09 % Positivo Método Cuantitativo por Cromatografía Gaseosa/FID:Método Cuantitativo por Cromatografía Gaseosa/FID:

1 mmol/molCrn; 2 no detectable; valores de referencia: GAA:2 – 220; Cr: 6 – 1208; 3 Cr/Crn: – 0.72 (Verhoeven et al.,2005). PacientesGrupo I Grupo II Grupo III Grupo IV n= GAA ± 45.7N.D ± 51.6 Cr397.9 ± ± ± Cr/Crn ± ± ± 4.1 Diagnóstico Presuntivo Improbable DGDC d-AGATd-GAMTd-CRTR RESULTADOS

FENOTIPO BIOQUIMICO FENOTIPO BIOQUIMICO d-AGATd-GAMTd-CRTR d-AGAT d-GAMT d-CRTR Cr/Crn GAA Cr N Metabolitos en orina

PERFILES CROMATOGRÁFICOS Testigos Referencias: 1: Creatina, 2: guanidinoacetato Grupo I Perfil normal Grupo II Perfil d-AGAT Grupo III Perfil d-GAMTGrupo IV Perfil d-CRTR

Confirmación del diagnóstico presuntivo  Medir la actividad enzimática de AGAT, GAMT y la funcionalidad del transportador.  Realizar el análisis molecular para identificar el gen mutado.

La importancia de este proyecto estriba en la disponibilidad de una terapia eficaz y de muy bajo costo para las deficiencias de GAMT y AGAT, que de no ser detectadas a tiempo conducen a una discapacidad psico-motora-emocional invalidante. Resulta importante además, el desarrollo de un área genética no explorada con anterioridad en nuestro medio y de gran impacto asistencial y académico. DEFECTOS GENÉTICO DE DEFICIENCIA DE CREATINA

Muchas Gracias !

MUCHAS GRACIAS !

INTERRELACIONES METABÓLICAS Se analizaron en orina los metabolitos de pacientes nosológicamente definidos: Se analizaron en orina los metabolitos de pacientes nosológicamente definidos:  ACIDURIA METILMALÓNICA: 2 pacientes con Cr valor normal y GAA no detectable.  ACIDURIA PROPIÓNICA: 1 paciente, Cr no detectable; GAA no detestable  DEFICIENCIA DE ORNITINA TRANSCARBAMILASA (OCT): 1 paciente, Cr valor normal; GAA valor normal.