CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA PARA STAPHYLOCOCCUS AUREUS AISLADOS DE MAMITIS BOVINA García, C., Méndez, A., Sanjuán, M.L., Díaz, A., Corrales, J.C., Areán, H., Fernández, G. Patología Infecciosa y Epizootiología. Departamento de Patología Animal. Facultad de Veterinaria de Lugo. Universidad de Santiago de Compostela. 16ª s JORNADAS NACIONALES Y 1ª s INTERNACIONALES DEL GRUPO DE TÉCNICOS ESPECIALISTAS EN MAMITIS Y CALIDAD DE LECHE 18 y 19 de octubre de 1999 Murcia Resumen Un total de 31 cepas de Staphylococcus aureus aisladas de infecciones intramamarias bovinas fueron investigadas para determinar su sensibilidad antibiótica. El método de antibiograma utilizado fue la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) mediante el sistema automatizado VITEK 32 (BioMérieux). Las CMI 90 de antibióticos de interés en la terapéutica de las mamitis bovinas fueron las siguientes: - Amikacina: 16  g/ml - Amoxicilina-clavulánico: 2  g/ml - Ciprofloxacino: 0,5  g/ml - Eritromicina: 2  g/ml - Gentamicina: 2  g/ml - Oxacilina: 2  g/ml - Penicilina G: 16  g/ml - Tetraciclina: 1  g/ml - Trimetoprim-sulfametoxazol: 0,25  g/ml Únicamente un aislado resultó resistente a la eritromicina, mientras que el 48% fueron resistentes a penicilina G; al resto de los antibióticos resultaron sensibles todos los S. aureus utilizados. A pesar del uso extendido de la cloxacilina como antibiótico de primera elección para el tratamiento de las mamitis por S. aureus, no se observa de momento la aparición de resistencias. No obstante, el 100% de las cepas se encuentran en el límite establecido para considerarlas sensibles (  2  g/ml), lo cual obliga a extremar la vigilancia por la posible aparición de cepas resistentes. Introducción El antibiograma no es únicamente una herramienta que nos permite conocer los antibióticos eficaces in vitro frente a un determinado patógeno aislado de una caso individual, sino que su realización permite conocer el desarrollo de resistencias, de modo que se puede adaptar la antibioterapia empírica en función de los resultados conocidos de antibiogramas. En lo que respecta a las mamitis bovinas producidas por S. aureus, el tratamiento de elección es la cloxacilina, antibiótico frente al que no han aparecido todavía resistencias, al contrario de lo que sucede en Medicina Humana, en la que las cepas resistentes a la meticilina constituyen un serio problema en pacientes hospitalizados. Material y métodos Se emplearon 31 cepas de S. aureus aisladas de mamitis bovinas. Para su obtención se inoculó secreción láctea, recogida siguiendo las recomendaciones habituales (desecho de los primeros chorros, desinfección del pezón, recogida en tubos estériles, transporte en refrigeración), en agar sangre esculina mediante asas desechables, calibradas y estériles. Las placas fueron incubadas a 37 ºC y la identificación presuntiva de las colonias se realizó siguiendo las recomendaciones del National Mastitis Council (Harmon et al., 1990). La identificación específica se realizó por el sistema ATB 32 Staph (BioMérieux), y Resultados y discusión La CMI 90 de los antibióticos utilizados de interés en la terapéutica de las infecciones intramamarias bovinas, quedan reflejadas en la Tabla 1. El sistema VITEK ha sido señalado como uno de los más adecuados para la detección de cepas meticilín resistentes, siguiento las directrices marcadas por la NCCLS para este tipo de pruebas (Frebourg et al, 1998). Según los resultados obtenidos, y a pesar del uso extendido de la cloxacilina como antibiótico de primera elección para el tratamiento de las mamitis por S. aureus, no se observa de momento la aparición de resistencias. No obstante el 100% de las cepas se encuentran en el límite establecido para considerarlas sensibles (  2  g/ml), lo cual obliga a extremar la vigilancia por la posible aparición de cepas resistentes en breve. Las CMI 90 más altas observadas son las correspondientes a la amikacina y la penicilina (que también presenta el porcentaje más alto de resistencias, coincidiendo con la mayoría de los estudios), lo que desaconseja su uso en terapéutica. A pesar de que algunos autores (Watts y Salmon, 1997) señalan que las cepas productoras de  -lactamasas tienen una CMI 90 más alta que las no productoras, nosostros no hemos encrontrado diferencia alguna. Las quinolonas (ciprofloxacino) exhiben la CMI 90 más baja de entre los antibióticos estudiados y comercializados como antimamíticos, coincidiendo también con Watts et al. (1995). Su farmacocinética, sin embargo, aconseja aplicarlos vía parenteral y no intracisternal. A pesar de la eficacia demostrada in vitro, Pyörälä et al. (1992) y nosotros mismos (observaciones no publicadas) hemos comprobado una baja respuesta in vivo. Podemos concluir, pues, que de los antibióticos que hemos probado, amoxicilina - ácido clavulánico, gentamicina, cloxacilina y tetraciclina son los más adecuados para su uso frente a S. aureus en procesos mamíticos, ya que sus bajas CMI permiten alcanzar óptimos resultados con bajas dosis. las cepas fueron liofilizadas y conservadas hasta la realización del presente estudio. El método de antibiograma empleado fue el sistema automatizado VITEK 32 (BioMérieux), que realiza la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) basándose en las normas de la NCCLS. El sistema consiste básicamente en la realización de una suspensión bacteriana cuya turbidez se ajusta a una determinada densidad mediante un colorímetro; dicha suspensión se utiliza para inocular unas tarjetas plastificadas que presentan una serie de pocillos con diferentes concentraciones de antibióticos. Las tarjetas son introducidas en un lector incubador que, cada hora, determina la presencia o ausencia de crecimiento bacteriano en los distintos pocillos. El lector incubador está conectado a un ordenador que interpreta los resultados según un sistema experto basado en las normas de la NCCLS. La tarjeta indicada por el fabricante para la realización de antibiogramas de estafilococos es la GPS 511, en cuya composición se incluyen 9 antibióticos cuyos resultados son equiparables a otros tantos disponibles como antimamíticos (Tabla 1), y además detecta la producción de  -lactamasas. Referencias bibliográficas Frebourg, N.B., Nouet, D., Lemée, L., Martin, E., Lemeland, J.F. Comparison of ATB Staph, Rapid ATB Staph, Vitek, and E-Test methods for detection of oxacillin heteroresistance in Staphylococci possessing mecA. J. Clin. Microbiol. 36(1): (1998). Harmon, R.J.; Eberhart, R.J.; Jasper, D.E.; Langlois, B.E., Wilson, R.A. Microbiological procedures for the diagnosis of bovine udder infection. Ed. National Mastitis Council, Inc Wilson Boulevard. Arlington VA pp., (1990). Pyörälä, S., Hirnoven, J., Pyörälä, E. Efficacy of enrofloxacin in the treatment of bovine clinical mastitis. Pag. 391 in Poc. XVII World Buiatrics Congr. Frontier Publ., Stillwater, OK. (1992). Watts, J.L., Salmon, S.A:, Yancey, R.J., Nickerson, S.C., Weaver, L.J., Holmberg, C., Pankey, J.W., Fox, L.K. Antimicrobial Susceptibility of Microorganisms Isolated from the Mammary Glands of Dairy Heifers. J. Dairy Sci. 78(7): (1995). Watts, J.L. y Salmon, S. Activity of Selected Antimicrobial Agents Against Strains of Staphylococcus aureus Isolated from Bovine Intramammary Infections that Produce  -Lactamase. J. Dairy Sci. 80: (1997). Tabla 1: Antibióticos utilizados disponibles como antimamíticos, grupo al que pertenecen y Concentración Mínima Inhibitoria para el 90% de las cepas de S. aureus. Agradecimientos Al Hospital Clínico Veterinario Rof Codina por la utilización del sistema VITEK 32.