ESPECIES Y BIOTIPOS DE Brucella spp AISLADAS EN ANIMALES SILVESTRES Y BOVINOS DE CASTILLA Y LEON CONCLUSIONES 1.No se aisló B. abortus, especie de gran especificidad en el ganado bovino, lo que en principio permitiría descartar la hipótesis de la fauna silvestre como reservorio de gran importancia para B. abortus, al menos en Castilla y León. 2.El aislamiento de B.melitenses biotipo 1 (cepa vacunal Rev-1) en animales silvestres confirmaría la existencia de vías de contagio entre poblaciones silvestres y domésticas. Especialmente importante se revela el papel de jabalí como especie que debe ser objeto de un mayor control. 3.El hallazgo de B.suis biotipo 3 en jabalíes vuelve a poner de manifiesto la importancia del jabalí como agente implicado en la dinámica de transmisión de la brucelosis porcina. MAPAS DE DISTRIBUCION DE LOS DIFERENTES BIOTIPOS DE Brucella spp BIOTIPOS DE BRUCELA AISLADOS INTRODUCCIÓN Castilla y León es una Comunidad Autónoma con una superficie total de Km², Posee un censo de bovinos y ovinos/caprinos así como una red de treinta y nueve Espacios Naturales Protegidos con gran variedad de especies silvestres. Castilla y León instauró un plan de vigilancia epidemiológica en la fauna silvestre en el año 2004 con el fin, entre otros, de profundizar en el conocimiento de la epidemiología de diversas enfermedades comunes al ganado domestico y a la fauna silvestre. Entre las enfermedades objeto de vigilancia están incluidas aquellas producidas por especies del genero Brucella.spp. La importancia de realizar una tipificación de todas los aislamientos de Brucella spp obtenidos en los animales de Castilla y León se resume en: 1.Establecer la identidad de la especie de Brucella spp causante de brotes, elaboración de mapas de sus biotipos en Castilla y León y establecer programas de control en caso necesario. 2.Determinar la importancia de la fauna silvestre como posible reservorio de la enfermedad para el ganado domestico y establecer el posible sentido de la transmisión. 3.Evaluar las especies silvestres que presentan un mayor riesgo para esta enfermedad. 4.Valorar la posible presencia de aislamiento de cepas vacunales vivas. Biotipos de Brucella spp. aislados Bandas de PCR para Brucella suis B1: biotipo1 ; B2: biotipo2 ; B3: biotipo3 ; C: controles GRAU VILA, A.; MÍNGUEZ GONZÁLEZ, R.; MÍNGUEZ GONZÁLEZ, O.; DÍEZ GALLEGO, M.; GONZÁLEZ GONZÁLEZ, Y.; MARQUÉS PRENDES, S. RESULTADOS FAUNA SILVESTRE RESULTADOS GANADO BOVINO MÉTODOS LABORATORIALES: Las muestras utilizadas para la realización del presente estudio, se remitieron al Laboratorio Regional de Sanidad Animal (León) para la identificación de Brucella spp y al Laboratorio Nacional de Referencia Español de Santa Fe (Granada) para la determinación de la especie y biotipo. La identificación y tipificación de las cepas de Brucella spp. aisladas mediante cultivo fueron realizadas mediante técnicas bacteriológicas standard y técnicas de biología molecular, en concreto esta última mediante PRC-AMOS modificada (PCR múltiple para la diferenciación de las distintas especies y biotipos de Brucella.) Adicionalmente, las cepas de Brucella suis fueron identificadas molecularmente mediante el método rápido INgene Bruce-ladder suis, que permite la detección de los 5 biotipos existentes a partir de DNA purificado o de colonias aisladas mediante la amplificación por PCR de seis bandas de diferente tamaño cuya combinación proporciona unos perfiles característicos en función del biotipo de B.suis de que se trate.MUESTREO: Las determinaciones microbiológicas se realizaron sobre muestras procedentes de:  Abortos y anejos fetales, básicamente de bovinos domésticos.  Muestras procedentes de matadero de órganos de animales de la especie bovina positivos y negativos a serología (Fijación del Complemento y/o ELISA)  Muestras de órganos, en animales silvestres, recogidas en cacerías. Biotipos de Brucella spp. en fauna silvestre RESULTADOS: El porcentaje de aislamientos de Brucella spp.,considerando todas las muestras analizadas, es del 0,62% en fauna silvestre y 32.54% en ganado bovino. En los aislamientos de fauna silvestre destaca el jabalí, donde se ha aislado Brucella spp. en el 0.74% de las muestras, seguida del ciervo, con un 0,34% No se ha aislado B. abortus en fauna salvaje en el periodo Las especies de Brucella spp. aisladas en jabalíes fueron B. melitensis biotipo 3,y B.suis biotipo 3. Como hallazgo, se aislaron 4 muestras de B.melitenses biotipo 1 (cepa vacunal Rev-1) en jabalíes, circunscritas al norte de la provincia de Palencia. En bovinos el porcentaje los distintos biotipos en los aislamientos positivos no vacunales fue: B. abortus biotipo 3 (97,33%), B. abortus biotipo 1 (1,13%) y B.melitenses (1,54%) El porcentaje de aislamientos de biotipos vacunales en bovino es del 12,82%