PROSPECCIÓN DE GENES CANDIDATOS PARA CARACTERES ASOCIADOS AL RENDIMIENTO EN TRIGO PAN Ramírez IA 1, AC Pontaroli 2 Introducción 1 FCA-UNMdP; 2 EEA Balcarce INTA – CONICET. Ruta 226 km 73,5 (7620) Balcarce, Argentina. Los materiales y metodología utilizados se muestran en la Figura 1. El trigo es uno de los cultivos de granos más importantes del mundo. Las perspectivas actuales y futuras del mercado mundial de trigo marcan un aumento sostenido de la demanda; por lo tanto, debe continuar incrementándose el rendimiento por unidad de superficie. El rendimiento es un carácter de alta complejidad y de difícil mejora, por lo que se hace necesario identificar qué caracteres lo determinan y cuales son sus bases genéticas y moleculares. Generar este conocimiento en trigo es dificultoso dado que es una especie alohexaploide formada recientemente, con un genoma de gran tamaño. Sin embargo, existe un elevado grado de conservación en regiones génicas entre el trigo y otras gramíneas cuyo genoma se ha secuenciado. Por lo tanto, podrían seleccionarse genes candidatos en base a información disponible en especies relacionadas al trigo. El objetivo de este trabajo fue identificar, mediante la aplicación de herramientas de genómica comparativa, genes candidatos a utilizar en el desarrollo de marcadores moleculares para el mapeo de caracteres relacionados con el rendimiento en trigo pan. Materiales y MétodosResultados Conclusiones A partir de la búsqueda bibliográfica se seleccionaron 12 genes de arroz y 4 de cebada que controlan caracteres asociados al rendimiento [involucrados en la determinación de la arquitectura de la planta (cinco genes), índice de vuelco (un gen), peso por grano (cinco genes), tamaño de grano (dos genes) y número de granos (tres genes)]. Cada una de estas secuencias fue comparada con bases de datos públicas de secuencias de proteínas, ESTs y ADNc de trigo, cebada, arroz y Brachypodium. Como resultado, se detectaron secuencias similares para todos los genes seleccionados, en todas las especies. Sin embargo, dos de estos genes ya habían sido identificados en trigo; seis de las 14 secuencias restantes no cumplieron con las condiciones descriptas previamente, en tanto que ocho fueron seleccionadas (Tabla 1). Las secuencias de trigo fueron alineadas globalmente con aquellas de cebada y arroz y se obtuvo un alto porcentaje de similitud en todos los casos. Asimismo se identificaron y compararon los dominios proteicos, y se halló alto nivel de conservación en todas las secuencias analizadas. El enfoque metodológico utilizado en el presente trabajo permitió identificar, a partir de genes asociados al rendimiento en arroz y cebada, ocho secuencias de trigo no caracterizadas previamente en la bibliografía. Estas secuencias presentaron las condiciones necesarias para ser consideradas genes candidatos. A partir de las mismas se amplificarán fragmentos por PCR para determinar la variación alélica existente en variedades de trigo de distinto rendimiento potencial. EspecieNombre Función/motivo proteico Carácter Localización cromosómica en Trigo Arroz dwarf4Citocromo p450Hojas erectas5DL APO1Dominio F-box Tolerancia al vuelco 3AL/3B FLO2 Proteína con dominio de unión a proteínas Tamaño de grano2AL GS5CarboxipeptidasaTamaño de grano3DS HGWDominio UBAPeso de grano7DS PGL1 Inhibidor de proteínas que se unen al ADN Peso de grano4AL/4DL/4BL GIF1InvertasaPeso de grano2BL Cebadavrs1 Factor de transcripción N° de hileras de espiguillas por espiga 2DS Se consideraron genes candidatos aquellas secuencias que cumplieron con las siguientes condiciones: a) un valor e ≤10 -10, b) longitud mayor a 2/3 de la secuencia correspondiente en arroz o cebada (Pontaroli et al., 2009) y c) dominios proteicos conservados. Materiales Bases de datos públicas (NCBI, Gramene, RGAP, GrainGenes) Herramienta: BLAST Base de datos: NCBI Herramienta: BLAST Base de datos: NCBI Herramienta: Lalign Base de datos: Pfam y Prosite Búsqueda bibliográfica de genes asociados al rendimiento en Arroz y Cebada Búsqueda de secuencias similares en Trigo Alineamiento Global entre las secuencias de Trigo y las de Arroz/Cebada Análisis de Dominios Proteicos Selección de Genes Candidatos Métodos Figura 1. Bases de datos y herramientas bioinformáticas utilizadas para la prospección de genes candidatos. Tabla 1. Nombre, función/motivo proteico y carácter de siete genes de arroz y uno de cebada que afectan el rendimiento y la localización cromosómica de la secuencia homóloga en trigo. Bibliografía Pontaroli A, Rogers R, Zhang Q, SanMiguel P, Davis T, Bennetzen J (2009) Plant Genome 2:93–101. Salse J, Abrouk M, Murat F, Quraishi U, Feuillet C (2009) Briefings in Bioinformatics 10: