1 Tutorial de Uso Metamorph. Como Medir distancias Unidad de Microscopia

2 Para medir elementos en cualquier imagen capturada, abrimos la aplicación: MEASURE>>CALIBRATE DISTANCES

3 Accedemos a la ventana de Control que contiene 2 pestañas: -Apply -Setup Sólo modificaremos la pestaña “APPLY” Paso previo: Lo primero que debemos hacer siempre es cargar la plantilla de calibrado guardada en el disco duro con nombre: “Calibraciones.CAL”

4 Aplicamos “LOAD FROM FILE “ para cargar la plantilla con los settings de calibrado. La plantilla se localiza en: C>>ControladoresNikon21 CopiaSeguridad>> Calibraciones.CAL Importante: Es necesario cargar esta plantilla de calibrado para cada nueva sesión de trabajo en la que queramos medir ya que por defecto el equipo está configurado para expresar las medidas en PIXELES y no en MICRAS.

5 -Una vez cargada la plantilla de settings de calibrado (calibrado.cal) tenemos que seleccionar y aplicar el objetivo con el cual ha sido capturada la imagen. Si no recordamos el objetivo con el que fue capturada la imagen usamos la aplicación EDIT>>IMAGE INFO para ver estas condiciones. -En el ejemplo aplicamos el objetivo 40x con el que ha sido capturada la imagen y clicamos en APPLY, de este modo el programa queda calibrado para realizar las medidas que queramos expresadas en micras (y no en pixeles) para imágenes capturadas con este objetivo 40x NOTA: Una vez que hemos cargado la plantilla de calibrado podemos ver en IMAGE CALIBRATION la relación pixel /micra para cada uno de los objetivos.La aplicación de esta correlación es otra forma de medir distancias.

6 Herramienta de medida: -Una vez cargada la plantilla de settings de calibrado y seleccionado el objetivo, el equipo queda configurado para expresar medidas en micras ( y no en pixeles). La principal herramienta de medida se encuentra en MEASURE>>CALIPERS Seleccionándola introducimos unas pinzas de medida en pantalla que podemos modificar en longitud, ángulo de orientación y color y que nos indica en micras la longitud exacta del elemento marcado en pantalla.

7 Podemos verificar que la calibración de medidas es correcta si aplicamos la herramienta de medida(“calpers”) para medir el mismo elemento capturado con objetivos diferentes.En el ejemplo comprobamos que la longitud del elemento es la misma para una captura en 20 x y 40 x: sólo hay que recordar marcar el objetivo con el que se ha capturado la imagen (en CALIBRATE DISTANCES) para obtener una medida real.

8 Metodo alternativo: Correlación Pixels/Micras Por defecto el programa expresa las medidas en pixeles. Otro método de medida sería aplicar una correlación directa pixel-micra según la tabla de calibración para cada objetivo. De este modo no sería necesario cargar los settings de calibrado.

9 Unidad de Microscopía Centro de Investigación del Cáncer Campus Miguel de Unamuno Salamanca (Spain).