Diagnóstico en Genética

¿Qué es lo que se puede diagnosticar? Mutaciones Cromosómicas Genéticas o puntuales Dinámicas Del ADN mitocondrial Microdelecciones o duplicaciones en tándem

Orientación al diagnóstico de: Cromosomopatías: Hipocrecimiento Retardo del desarrollo / RM Dismorfias / malformaciones Mutaciones puntuales: Ej.: Acondroplasia Enfermedades mitocondriales: Encefalomiopatías

 mutación Gly380Arg en FGFR3 (4p16)

Consecuencias de las mutaciones A nivel molecular alteraciones de la expresión génica (ej. Enfermedad de Friedreich) alteraciones proteicas (ej. Anemia Falciforme) A nivel de fenotipos intermedios alteraciones funcionales (ej. Sd. QT largo congénito, Test del sudor para FQ) alteraciones del metabolismo (ej. EIM) alteraciones histológicas (ej. Miocardiopatías Hipertróficas, Distrofias Musculares) A nivel clínico Sds. clínicos característicos (ej. Sd. de Down)

Anemia Falciforme Alelo normal Alelo Mutante HbA HbS

TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS EN GENÉTICA Genética Clínica, Historia Familiar y Genealogía Sindromes genéticos Modo de herencia “Sindrome completo” a nivel familiar. Genética de Poblaciones (ej. FMF, Tay-Sachs, HbS)

Exámenes complementarios habituales Hemograma y extendido de sangre periférica (Enfs. de atesoramiento) RX (displasias óseas) Ecocardiograma y ECG (Miocardiopatías, canalopatías) Estudios funcionales (Conducción nerviosa en neuropatías primarias)

Citogenética Técnica estándar. Técnicas de bandeo Bandeo de alta resolución

Técnicas bioquímicas y determinaciones cuantitativas EIM (PQ cualitativas, cromatografías semicuantitativas, dosificación de metabolitos, actividades enzimáticas). dosificación de FP sérica materna (Defectos del tubo neural). dosificación de Estriol y HCG en sangre materna (Sd. de Down). Electroforesis de proteínas (HbS). Biología Molecular detección directa de mutaciones necesidad de conocer secuencia del gen. diversas mutaciones en distintas familias o poblaciones. no existencia de correlaciones genotipo-fenotipo detección de marcadores ligados (diagnóstico indirecto) posible error por recombinación Conjunción de técnicas FISH

Electroforesis de Hb

Distrofias Musculares Diagnóstico a nivel: histopatológico: proteico:

Resistencia Proteína C activada Factor V de Leiden Bioquímica de la coagulación Trombofilia

Diagnóstico molecular directo Detection of 3 bp deletions (CF DF508 and DI507) on a Spreadex EL 300 gel. Lanes: 1 - M3 Marker (Elchrom); 2 - CF patient heterozygous for the DI507 mutation (DI507/N); 3 - CF patient with no 3 bp deletion (N/N); 4 - CF patient heterozygous for DF508 mutation; 5 - CF patient homozygous for DF508 (DF508/DF508). Receptor de Andrógenos

Distrofia Miotónica tipo I Caracterización molecular (CTG)n 3’ UTR Gen DMPK (CTG)n >1000, fenotipo congénito 100< (CTG)n <1000, fenotipo clásico 50< (CTG)n <100, fenotipo leve Cromosoma 19 5’ 3’

Distrofia Miotónica tipo I Diagnóstico molecular Diagnóstico por Southern blot: Permite detectar grandes amplificaciones N- paciente no afectado A- paciente afectado PCR/ Southern blot: Permite detectar alelos con expansiones cortas

¿Cómo diagnosticar qué gen está mutado en una Distrofia Muscular?

Diagnóstico molecular indirecto Ligamiento al X 5 Cm entre marcador y locus de la enfermedad

Fluorescent in situ hybridization

FISH se usa actualmente ante la sospecha de varios síndromes de microdelección, incluyendo: 22q deletion syndrome Williams syndrome Prader-Willi syndrome Angelman syndrome Smith-Magenis syndrome Miller-Dieker syndrome Cri-du-chat syndrome Wolf-Hirschhorn syndrome Retinoblastoma Kallmann

VARIOS TIPOS DE SITUACIONES DIAGNÓSTICAS Diagnóstico preimplantacional Diagnóstico prenatal Ecografía Técnicas genéticas Amniocentesis Biopsia de Vellosidades Coriales Screening poblacional De Recién nacidos Hipotiroidismo congénito (TSH). PKU. Galactosemia. EOJA De heterocigotos Enfs. AR frecuentes en algunas poblaciones (ej.Tay Sachs en judíos, FQ en poblaciones europeas). Enfs. XR (mujeres posibles portadoras). Enfs. AD en etapa presintomática (ej. EH, DM).

Screening de PKU

Diagnóstico nosológico de enfermedades monogénicas Hemocromatosis hereditaria LDLR – Hipercolesterolemia Familiar Fibrosis Quística Déficit de alfa 1 antitripsina Sd. de X-frágil Distrofias musculares Hiperplasia suprarrenal congénita Diagnóstico de marcadores de susceptibilidad y pronóstico en enfermedades multifactoriales LDLR ApoE MTHFR Factor V de Leiden Protrombina ACE I/D BRCA 1 y 2

Diagnóstico Genética Somática

Genética Predictiva Ej.: Enfermedad de Huntington

Diagnóstico de paternidad Aplicaciones forenses