UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOS Junio 2007

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOS ESTUDIO PILOTO DESARROLLO DE UN SISTEMA, EN MODELO ANIMAL, PARA EL ESTUDIO BIOFARMACEÚTICO DE CEFEPIME CON BASE EN LA CORRELACIÓN DE PROPIEDADES FK/FD Y APLICACIÓN EN LA VALORACIÓN DE PRODUCTOS COMERCIALES. PIEDAD RESTREPO V. QUÍMICA FARMACÉUTICA, FARMACÓLOGA. Junio de 2007

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOS ESTUDIO PILOTO DESARROLLO DE UN SISTEMA EN MODELO ANIMAL PARA EL ESTUDIO BIOFARMACEÚTICO DE CEFEPIME CON BASE EN LA CORRELACIÓN DE PROPIEDADES FK/FD Y APLICACIÓN EN LA VALORACIÓN DE PRODUCTOS COMERCIALES. GLORIA SHIRLEY RAMÍREZ, Q.F. LUIS FELIPE MURIEL Bacteriólogo INÉS MALES Tecnóloga Química ALEJANDRA ARANGO Médica Veterinaria MILENA PÉREZ G. Q.F. PAOLA FERNÁNDEZ Auxiliar De Enfermería OSIBAR JAMAUCA Auxiliar de Laboratorio

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOS ESTUDIO PILOTO DESARROLLO DE UN SISTEMA EN MODELO ANIMAL PARA EL ESTUDIO BIOFARMACEÚTICO DE CEFEPIME CON BASE EN LA CORRELACIÓN DE PROPIEDADES FK/FD Y APLICACIÓN EN LA VALORACIÓN DE PRODUCTOS COMERCIALES. El autor agradece a Vitalis S.A.C.I, el apoyo económico y material para la realización de este estudio piloto con lo cual contribuyó al mejoramiento de la capacidad técnica y científica de la Unidad de Estudios Biofarmacéuticos de CIDEIM y a la consolidación de hipótesis de investigación para la proyección de estudios complementarios y novedosos en este campo

ESQUEMA ESTUDIO IV IV

ANÁLISIS DE DATOS

RESULTADOS

Resultados por inspección visual Pruebas Farmacodinámicas para inhibición del crecimiento (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM) de Cefepime en las muestras en Suero de Conejo Resultados por inspección visual

RESULTADOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA Pruebas Farmacodinámicas para inhibición del crecimiento (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM) de Cefepime en las muestras en Suero de Conejo RESULTADOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA K. pneumoniae

Según estos resultados la función matemática que explica los valores de densidad óptica en la muestra Conejos-Cefepime Vitalis, cumple una correlación entre las variables de 99.95% con un valor P < 0.01 en el nivel de confianza de 99%, de acuerdo a la siguiente ecuación: DO CONEJOS = -0.0130607 + 1.10517*DO PRODUCTO + 0.28521*DO USP

RESULTADOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA: E. coli Pruebas Farmacodinámicas para inhibición del crecimiento (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM) de Cefepime en las muestras en Suero de Conejo RESULTADOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA: E. coli

El resultado obtenido mostró una alta significancia estadística en la interacción de las variables y su ajuste al modelo con un coeficiente de correlación de 99.3571% y un valor P < 0.01 en un nivel de confianza de 99%. El modelo propuesto por este análisis de regresión es: DO CONEJOS- Cefepime Vitalis = 0.0029933 + 1.63103*DO PRODUCTO - 0.476984*DO USP

Simulación de Eficacia Farmadocinámica Los parámetros definidos para el efecto inhibitorio sobre el crecimiento del cefepime son calculados según modelación proyectada, con base en los parámetros de concentración y densidad óptica para cada una, de acuerdo con la función matemática siguiente: E=Emax*(1-(C**Gamma/(C**Gamma+EC50**Gamma)))

Del análisis farmacodinámico descrito, el menor valor necesario para obtener efecto máximo proyectado, de la muestra Producto-Cefepime Vitalis (0.3485), que permite presumir mayor eficacia para inhibir el crecimiento de K. pneumoniae ATCC 700603, en comparación con los resultados proyectados para las muestras de Conejos-Cefepime Vitalis y Cefepime estándar USP, cuyo valor estuvo por encima de 0.50 en ambos casos.

Sin embargo, la modelación aplicada requiere una estandarización precisa y exacta para la cantidad de inóculo estándar a sembrar, puesto que la proyección del efecto en concentración cero afecta el modelo simulado y, por lo tanto, los resultados a obtener. Este asunto debe ser corregido en un diseño experimental posterior de mayor complejidad estadística, con el fin de comprobar los resultados del estudio piloto

Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603

Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603

CINÉTICA DE MUERTE EN HORAS Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603 CINÉTICA DE MUERTE EN HORAS Transformación logarítmica (UFC/mL)

CINÉTICA DE MUERTE EN HORAS Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603 CINÉTICA DE MUERTE EN HORAS

SELECCIÓN DEL MODELO MATEMÁTICO, POR CONCENTRACIÓN Y POR MUESTRA Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603 SELECCIÓN DEL MODELO MATEMÁTICO, POR CONCENTRACIÓN Y POR MUESTRA

Por minuto, según modelo matemático Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. Log UFC/mL Por minuto, según modelo matemático

PROYECCIÓN DE ABC, DE ACUERDO CON: UFC/mL por minuto

PROYECCIÓN DE ABC, DE ACUERDO CON: UFC/mL por minuto

El análisis de varianza aplicado (ver recuadrosiguiente) no encontró diferencias significativas entre las muestras en comparación, con referencia al ABC de cinética de muerte para K. pneumoniae 700603. Los datos transcritos a continuación, muestran el valor P de 0.4682 para F test, que por ser > 0.05, no se encuentran diferencias estadísticamente significativas entre las medias de las tres muestras. La comparación de las medianas mediante el test de Kruskal Wallis, proyecta un valor P de 0.1498, que como en el anterior análisis determina la igualdad entre las muestras, con un nivel de confianza de 95%.

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOS ESTUDIO PILOTO DESARROLLO DE UN SISTEMA EN MODELO ANIMAL PARA EL ESTUDIO BIOFARMACEÚTICO DE CEFEPIME CON BASE EN LA CORRELACIÓN DE PROPIEDADES FK/FD Y APLICACIÓN EN LA VALORACIÓN DE PRODUCTOS COMERCIALES. CORRELACIÓN ENTRE. ÁREA BAJO LA CURVA DE CONCENTRACIÓN (ug/mL) vs TIEMPO (min.) Y ABC DE MUERTE MICROBIANA(LogUFC/mL+1)(min.) Comparación del comportamiento farmacodinámico de las muestras de suero, sobre la cepa microbiana K. pneumoniae ATCC 700603, se procesa con base en el modelo PK/PD/NCA, 107 de WinNonLin®.

CORRELACIÓN ENTRE. ÁREA BAJO LA CURVA DE CONCENTRACIÓN (ug/mL) vs TIEMPO (min.) Y ABC DE MUERTE MICROBIANA(LogUFC/mL+1)(min.) PRODUCTO-CEFEPIME

CORRELACIÓN ENTRE. ÁREA BAJO LA CURVA DE CONCENTRACIÓN (ug/mL) vs TIEMPO (min.) Y ABC DE MUERTE MICROBIANA(LogUFC/mL+1)(min.) CEFEPIME ESTÁNDAR USP

MUESTRA: CONEJOS-CEFEPIME CORRELACIÓN ENTRE. ÁREA BAJO LA CURVA DE CONCENTRACIÓN (ug/mL) vs TIEMPO (min.) Y ABC DE MUERTE MICROBIANA(LogUFC/mL+1)(min.) MUESTRA: CONEJOS-CEFEPIME

Emáx Conejos = -5.71856 + 1.04519*Emax Producto + 0.207973*Emáx USP EC50 Conejos = -365.177 + 3.82576*EC50 Producto + 0.127502*EC50 USP

ENSAYO DE FARMACOCINÉTICA EN CONEJOS, DEL PRODUCTO-CEFEPIME

ENSAYO DE FARMACOCINÉTICA EN CONEJOS, DEL PRODUCTO-CEFEPIME

ENSAYO DE FARMACOCINÉTICA EN CONEJOS, DEL PRODUCTO-CEFEPIME

ENSAYO DE FARMACOCINÉTICA EN CONEJOS, DEL PRODUCTO-CEFEPIME

ENSAYO DE FARMACOCINÉTICA EN CONEJOS, DEL PRODUCTO-CEFEPIME Los datos de logaritmo de la concentración en los cinco últimos periodos de muestreo, para el cálculo de los parámetros: Lambda: 0.010712 (MIN.-1) Tiempo de vida media (t½): 64.69 min. Valor interpolado para el intercepto en el eje de concentración, en el tiempo cero: 137.16 ug/mL

del Producto Comercial de Cefepime. CONCLUSION Por lo anterior, se propone como producto de este estudio piloto, un diseño experimental con un tamaño muestral adecuado para comprobar la significancia de la interacción de las variables farmacodinámicas y farmacocinéticas enunciadas, y la no diferencia significativa de los resultados que correlacionan el comportamiento farmacocinético del producto cefepime inyectable, con las áreas bajo las curvas de muerte bacteriana, obtenidas por valoración In Vitro - Ex Vivo en muestras de suero de conejo, preparadas a partir de cefepime estándar USP y del Producto Comercial de Cefepime.