SINDROMES CON HEMOGLOBINA S Servicio de Hematología- Oncología Hospital de Pediatría “Prof. Dr. J. P. Garrahan” Buenos Aires, Argentina.

HEMOGLOBINA NORMAL Cromosoma 11-Familia de genes de b-globina gG gA  b  b 5’ 3’ Cromosoma 16-Familia de genes de a-globina 2 1  2  1 2 1 1 5’ 3’

DESARROLLO EMBRIONARIO Embrión Hb Gower 1:22 Hb Gower 2:22 Hb Portland: 22 Feto: Hb F: 2G2 Hb F: 2A2 Vida extrauterina Hb A: 2β2 Hb A2: 22

HEMOGLOBINA NORMAL 2-3DPG . a1b1 a2b1

HEMOGLOBINOPATÍAS Clasificación Variantes estructurales: Hemoglobinas con solubilidad alterada Hemoglobinas inestables Hemoglobinas con afinidad alterada por el O2 Metahemoglobinas Sindromes talasémicos:  talasemia  talasemia db talasemia y Persistencia hereditaria de hemoglobina fetal Hemoglobinopatías talasémicas

MUTACIÓN b GLOBINA Codón 6 GAG (glutámico)  GTG (valina) HEMOGLOBINA S MUTACIÓN b GLOBINA Codón 6 GAG (glutámico)  GTG (valina)

SÍNDROMES CON Hb S

SÍNDROMES CON Hb S Desórdenes con Hb S asintomáticos: Portador de Hb S (βA/ βS) Doble heterocigota Hb S y PHHF (βS/ βPHHF) Desórdenes con Hb S sintomáticos: Doble heterocigota Hb S y HB C (βS/ βC) Doble heterocigota Hb S y β talasemia (βS/ ββ) Doble heterocigota Hb S y β+ talasemia (βS/ β+) Homocigota Hb S (βS/ βS) Doble heterocigota Hb S y β0talasemia (βS/ β0) Doble heterocigota Hb S y Hb D PUNJAB (βS/ βD) Doble heterocigota Hb S y Hb O ARAB (βS/ βO)

SÍNDROMES CON Hb S Criterios básicos para iniciar screening Noción de la frecuencia de las diferentes patologías para la población en estudio Procedencia geográfica del paciente y sus ancestros Evitar estudiar a pacientes transfundidos Estudiar simultáneamente: Paciente Su familia Un control normal

SÍNDROMES CON Hb S Pruebas de laboratorio: Hemograma completo con recuento de reticulocitos Marcadores de hemólisis (LDH, Haptoglobina, Bt/Bd) Electroforesis de Hemoglobinas a pH alcalino Test de falciformación Test de isopropanol Cuantificación de hemoglobinas Metabolismo del hierro Estudio familiar Estudios adicionales: Electroforesis a pH ácido

Electroforesis de hemoglobina en acetato de celulosa, pH alcalino SÍNDROMES CON Hb S Electroforesis de hemoglobina en acetato de celulosa, pH alcalino

Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH alcalino SÍNDROMES CON Hb S Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH alcalino Hb A Hb F Hb S/D/G

TEST DE FALCIFORMACIÓN Paciente

Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH ácido LABORATORIO Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH ácido F A S C A2 D G Lepore

SÍNDROMES CON Hb S Cuantificación de Hemoglobinas: Cuantificación de Hb A2: 2.5 - 3.5% Cuantificación de Hb F: <1% Cuantificación de Hb S: 35 - 45%

SÍNDROMES CON Hb S Homocigota S/S Anemia normo o macrocítica: Hb: 7-8g/dl VCM: 85-95fl CHCM: normal o aumentado Anisopoiquilocitosis, hipocromía Drepanocitos Policromatofilia Cuerpos de Howell-Jolly Eritroblastos circulantes

SÍNDROMES CON Hb S Laboratorio general: Reticulocitos aumentados: 8-10% LDH aumentada Haptoglobina: disminuída Bilirrubina total aumentada a expensas de indirecta Ferritina: normal o aumentada

Electroforesis de hemoglobina en acetato de celulosa, pH alcalino LABORATORIO Electroforesis de hemoglobina en acetato de celulosa, pH alcalino

Test de falciformación SÍNDROMES CON Hb S Test de falciformación

SÍNDROMES CON Hb S Cuantificación de Hemoglobinas: Cuantificación de Hb A2: normal Cuantificación de Hb F: aumentada en forma variable Cuantificación de Hb S: mayor al 80%

SÍNDROMES CON Hb S Estudio familiar Hb A/S Hb A/S Hb S/S

Doble heterocigota S/b SÍNDROMES CON Hb S Doble heterocigota S/b Anemia microcítica hipocrómica: Hb: 8 -10g/dl VCM: 65 -75fl HCM: disminuído Anisopoiquilocitosis Drepanocitos Policromatofilia Dianocitos Cuerpos de Howell-Jolly Eritroblastos circulantes

SÍNDROMES CON Hb S Laboratorio general: Reticulocitos aumentados: 4-8% LDH: aumentada Haptoglobina: disminuída Bilirrubina total: aumentada a expensas de indirecta Ferritina: normal o aumentada

Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH alcalino LABORATORIO Electroforesis de hemoglobina en gel de agar, pH alcalino

TEST DE FALCIFORMACIÓN Paciente

SÍNDROMES CON Hb S Cuantificación de Hemoglobinas: Cuantificación de Hb A2: 4-6% Cuantificación de Hb F: aumentada en forma variable Cuantificación de Hb S: variable (>50%) Si la mutación es b+ existirá Hb A del 5-45%

SÍNDROMES CON Hb S Estudio familiar Anemia microcítica hipocrómica: Alto recuento de eritrocitos VCM disminuído(<78 fl) HCM disminuído(<27pg) ADE normal Dianocitos y punteado basófilo Ẽ a pH alcalino: Bandas: A/A2 Hb A2: >3.5% Metabolismo del hierro normal

SÍNDROMES CON Hb S b talasemia Hb S Hb S/ b talasemia

Doble heterocigota S / C (Hb C  6glu  lys ) SÍNDROMES CON Hb S Doble heterocigota S / C (Hb C  6glu  lys ) Anemia microcítica: VCM disminuído CHCM aumentada Dianocitos Células densas Drepanocitos Policromatofilia

SÍNDROMES CON Hb S Laboratorio general: anemia hemolítica menor que en S/S Reticulocitos aumentados LDH aumentada Haptoglobina disminuída Bilirrubina total aumentada a expensas de indirecta Ferritina: normal o aumentada

LABORATORIO Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4:

SÍNDROMES CON Hb S Cuantificación de Hemoglobinas: Cuantificación de Hb A2 + HbC: 40-50% Cuantificación de Hb F: aumentada en forma variable Cuantificación de Hb S: 40-50%

Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4: LABORATORIO ESTUDIO FAMILIAR Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4:

SÍNDROMES CON Hb S ESTUDIO FAMILIAR HbC Hb S Hb S/C

LABORATORIO Electroforesis de Hb en acetato de celulosa a pH 8,4:

HEMOGLOBINA LEPORE Alto recuento de eritrocitos VCM disminuído HCM disminuído ADE normal Dianocitos Bandas: A/X/A2 Hb A2: normal o disminuída Banda X: hasta 15% Test de falciformación: Neg Metabolismo del hierro normal

SÍNDROMES CON Hb S BIOLOGÍA MOLECULAR

Variantes de Hbs con movilidad electroforética  HbS Electroforesis a pH alcalino pH ácido Sickling/ Isopropanol Hb D–Los Angeles  121 glu  gln S A Neg/ Neg Hb G-Philadelphia  68 asn  lys Hb Hasharon a 47 asp  lys Neg/ Pos Hb Lepore db fusión Ligeramente anódica a S