1 Programa P.A.L.M. Microdisector Laser Tutorial 1/3 Tutorial 1/3 MENÚ GENERAL MENÚ GENERAL

2 Tutorial Programa P.A.L.M Microdisector Olympus 33.Parte 1:MENU GENERAL Inicio del Programa “PALM Microdisector”……….….pag.3 Comando FILE……………………………………….…pag.4 Comando EDIT………………………………………....pag.5 Comando VIEW………………………………………...pag.6 Comando MOVE…………………………....………….pag.7 Comando LASER…………………………………....…pag.8 Comando LASER MARKER………………………......pag.9 Comando LASER SETTINGS………………….....…..pag.10 Comando OTRAS FUNCIONES GENERALES…….pag.11 Comando OBJETIVO……………………………….....pag.12 Comando MODO DESPLAZAMIENTO……………...pag.13 Comando MODOS DE ACCION LASER………..…..pag.14

3 Inicio del programa “Microdisector P.A.L.M.” 2.Introducimos Username: Confocal Password: dapi 1.Doble click sobre el icono del programa ”Microdisector PALM” 1 2

4 File. Permite: -abrir,crear y guardar carpetas (1). -abrir,crear y guardar imágenes (2). -abrir los trabajos más recientes(3). -salir del programa (4) Comando “FILE”

5 Edit.Permite: -seleccionar imagenes y/o puntos de acción del láser para copiar o eliminar. Comando “EDIT”

6 View.Permite mostrar y ocultar las figuras de pantalla, listar sus propiedades y establecer marcos de referencia de la imagen en pantalla. Scroll Rentangle. Introduce un área rectangular de centrado de pantalla que se mantiene aunque se desplace la muestra. Screen Center. Introduce un punto central (cruz roja) como referencia del centro de la imagen. Show Elements. Permite mostrar/ocultar todas las figuras y puntos de la pantalla. Similar al icono “pincel” de la barra de herramientas. Element List. Abre una tabla descriptiva de todos los puntos y figuras dibujados en pantalla. Marcador de “Screen Center” Marcador de “Scroll Rectangle” Comando “VIEW”

7 Move. Permite definir “puntos de posición de referencia” a lo largo de toda la muestra que permitirá al microdisector volver a esa posición aún cuando se haya cambiado el campo de visión. Para crear o borrar “puntos de referencia” Para desplazarse entre la serie de “puntos de referencia”previamente introducidos a lo largo de la muestra Para desplazarse o definir el “check-point” Para definir la velocidad a la que se desplaza la muestra entre los “puntos de referencia” Comando “MOVE” FALTA

8 Permite subir o bajar la “potencia del láser” y el” foco del láser”(diámetro de acción). Estos cambios también se pueden realizar moviendo las barras o introduciendo un dígito numérico de los comandos “Laser Focus “ y “Laser Energy”situados en el lateral izquierdo(**) ** Inicia la acción del láser Permite seleccionar el tipo de acción del láser. Esta selección también puede realizarse desplegando la ventana situada en la parte inferior (*) * Permite realizar cambios en los parámetros por defecto del láser (settings): -INTENSIDAD ENERGIA -DIAMETRO DEL LASER Laser. Permite establecer variaciones en los parámetros del láser y seleccionar el tipo de mecanismo de acción del láser. Comando “LASER”

9 -New Laser Position. Permite situar en cualquier posición de pantalla el punto del láser de partida. Por defecto el punto láser está centrado, para cambiarlo de posición clickar sobre el icono del punto láser y desplazarlo. -Reset Laser position. Permite volver a centrar el punto de acción láser en el centro de pantalla. Vuelve al centro de pantalla. -Layout Laser position. Permite editar el color y tamaño del marcador láser. -View Laser Marker. Permite mostrar u ocultar EL ICONO que señala la posición del marcador láser sobre la muestra. Laser Marker. Permite introducir, borrar y ver la posición de partida del láser sobre la muestra. Icono “marcador posición láser” Comando “LASER MARKER”

10 Laser Settings. Permite modificar los parámetros de potencia y diámetro del láser. Estas variaciones también se pueden realizar con el comando “LASER” Laser Energy. Permite aumentar/disminuir la potencia del láser. ¿Cómo?: Moviendo la barra vertical o introduciendo un valor numérico. Laser Focus. Permite aumentar/disminuir el diámetro/foco del láser. ¿Cómo?: Moviendo la barra vertical o introduciendo un valor numérico. Permite seleccionar entre las 2 aplicaciones láser: CUT :solo corta la muestra en los puntos y/o imágenes introducidas en la muestra. LPC: Catapulta la muestra en la zona señalada y además la impulsa para su recuperación hacia un vial eppendorf. Comando “LASER SETTINGS”

11 Abrir carpeta. Permite abrir cualquiera de las carpetas guardadas en el sistema. Captura imagen. Permite capturar una imagen de la zona de la muestra mostrada en pantalla. Shutter(Obturador del láser) Permite obturar/cerrar la fuente de emisión del láser e introducir un tiempo determinado para su obturación. El láser también se puede obturar manualmente con el botón correspondiente del equipo. (ver guía MicrodisectorPALM) Descarga online de software para la edición de imágenes. Otras Funciones Generales

12 Selección Objetivo: x10 x20 x40 X100oil Objetivo. Permite indicar al programa que objetivo se está utilizando para ajustar y optimizar los parámetros de acción del láser. No está automatizado, el objetivo sólo se puede cambiar manualmente. Comando “OBJETIVO”

13 Modo y velocidad de desplazamiento. Permite seleccionar el modo en que se desplazará la muestra en la platina y su velocidad para redirigirse a puntos marcados en la misma. Velocidad de desplazamiento. Permite definir la velocidad de desplazamiento de la platina. ¿Cómo? Mediante movimiento de la barra vertical o introducción directamente el valor numérico. Stage.Doble click en pantalla y permite mover la muestra con el ratón Arrow.Doble click y permite desplazar la muestra con las flechas del teclado Position.Permite definir la velocidad en que se producirá el desplazamiento entre “puntos de referencia” (previamente establecidos) Scroll.??? Cut LPC Comando “MODO DE DESPLAZAMIENTO”

14 “Cut”. Produce un corte incompleto(abierto) en la zona dibujada. “Close&Cut”. Produce un corte completo(cerrado) de la figura dibujada. “LPC”. Activa la acción de catapultar en los puntos definidos. Es sólo aplicable a puntos (dot) previamente definidos “AutoLPC”.Activa la acción de catapultar de modo automático.Dispara un nº de veces dentro de la figura y catapulta fragmento a fragmento. Opción indicada para portas SIN membrana “Close&Cut+AutoLPC” Corta la figura por completo y la catapulta punto a punto “ RoboLPC ”. Corta y catapulta de manera automática los objetos dibujados. Indicado para portas con membrana. Comando “MODOS DE ACCION LASER (*) (*)Las imágenes muestran como se visualizaría en pantalla una zona circular IMAGINARIA definida para un corte láser en cada uno de los modos/tipos de acción del láser disponibles.

15 Unidad de Microscopía Centro de Investigación del Cáncer Campus Miguel de Unamuno Salamanca (Spain).