REPRODUCCION IN VITRO DE PLANTAS RELACIONADAS A LA ZOOCRIA DE MARIPOSAS Max Paniagua Sánchez Javier Viquez Ruiz Marleny Bogarin Fonseca Martha Oliva Umaña Núcleo Agropecuario

Objetivo Desarrollar y aplicar un protocolo de propagación in vitro cuatro especies pertenecientes a la familia Passifloraceae en base a sus condiciones biológicas y a su importancia en la zoocría de mariposas.

Objetivos específicos Producir in vitro las siguientes especies: Passiflora platyloba, P. ambigua, P. oerstedii, P. pittieri, P. biflora, P. vitifolia y P. talamacensis.   Contribuir al desarrollo y la aplicación de biotécnicas para la propagación masiva de especies vegetales de importancia para la zoocria de mariposas y la conservación de la biodiversidad. Desarrollar protocolos para la propagación de vitropassifloras incluidas en alguna categoría de amenaza biológica y que son de interés para la producción de lepidópteros comerciales. Determinar un medio de cultivo y tipo de explante adecuado para la propagación de pasifloras de importancia para la zoocría de lepidópteros.

Metodología LCV de la GM 2010. Selección, obtención y preparación de la planta madre o pie de cría. Elección y desinfección de los explantes. (MLF) Introducción del material seleccionado in vitro (siembra ½ de cultivo). 6 Tratamientos. Multiplicación de brotes o incubación Enraizamiento Aclimatación

Resultados

Resultados Objetivo General: Elaborar el protocolo de propagación in vitro de al menos cuatro especies de la familia Passifloraceae durante el 2010, debido a su importancia en la zoocría de mariposas. Metas Estado de avance (%) Resultados obtenidos Observaciones Determinar el medio de cultivo más apropiado para la propagación de pasifloras con mayor utilidad en la producción comercial de mariposas. 100 El medio de cultivo MS donde se utilizó BA, se obtuvo que la regeneración de microestacas y láminas foliares se realizó de mejor manera en la concentración 1,2 en comparación con la 0,9. Se propone un medio de cultivo MS en agar o phytagel con ANA(1 y 2) para estimular el desarrollo radicular. Producir in vitro las siguientes especies: Passiflora platyloba, P. ambigua, P. oerstedii, P. pittieri, P. biflora, P. vitifolia y P. talamacensis Se han sembrado y establecido con éxito las siguientes especies: P. oerstedii, P. pittieri, P. biflora, P. platyloba. Para el caso de la Passiflora talamacensis y Passiflora ambigua no hubo porcentaje de regeneración, lo cual se asume a la presencia de un hongo endógeno A pesar de que se cultivaron las especies Passiflora ambigua y P. talamacensis, con muestras de varias zonas del país y en repetidas ocasiones no hubo regeneración, lo cual se asume a la presencia de hongos endógenos. Sin embargo se requiere una investigación más exhaustiva y específica para dichas especies, ya que son de gran importancia en la zoocría de algunas especies de Heliconius. Desarrollar los protocolos para la propagación de vitropassifloras de interés para la producción de mariposas y que se encuentren en alguna categoría de amenaza biológica. Se estableció el protocolo para la micropropagación de las siguientes especies: Passiflora platyloba, P. oerstedii, P. pittieri, P. quadrangularis y P. apetala. En cuanto a la fase de aclimatación de dichas especies, todavía no se ha implementado, sólo está a nivel de propuesta en el protocolo. Determinar qué tipo de explante presenta mayor sobrevivencia y menor tiempo de desarrollo por especie de planta estudiada de acuerdo al medio de cultivo. Se probaron dos tipos de explantes: láminas foliares y microestacas; ambas presentaron buen nivel de regeneración; sin embargo es notable la mejor eficiencia de las láminas foliares cultivadas en el MS con BA al 1,2. En cuanto al medio de cultivo al cual se le agregó ANA, los mejores resultados en cuanto al crecimiento radicular, se han obtenido en la concentración 2.

Conclusiones Se cultivaron especies en ½ s de phytagel y agar, para identificar en cuál se tenía un mejor resultado en cuanto a vitrificación; siendo el más positivo en agar. Especies como la Passiflora talamacensis, P. auriculata y P. ambigua, las cuales ha pesar de que se sembraron en al menos cinco veces no sobrevivieron debido al ataque de hongos endógenos. Passiflora lobata y Passiflora dispar; sobrevivieron hasta el inicio de abril debido a condiciones propias de las plantas (nivel alto de latencia); lo anterior por razones de adecuar los niveles de nutrimentos en el medio de cultivo y a las condiciones ambientales (luz y temperatura).

Conclusiones Se determinó que el nivel óptimo de PH corresponde a un valor de 5,6, con lo cual se asegura que sea un medio donde las microestacas o láminas foliares empiecen con la organogénesis de callos o con el crecimiento diferenciado. La temperatura óptima para el crecimiento y desarrollo de las microestacas y láminas foliares se tiene un rango de 22-26 ºC, ya que se determinó que cuando por factores externos la temperatura incrementó hasta 28 ºC se identificaron ½ s que se volvían líquidos luego de cultivados, lo cual contribuyó con la mortalidad de las especies.   Se tiene la utilización de ANA como estimulante de la radificación, lo cual se ha evidenciado sobre todo en las especies Passiflora pittieri y Passiflora platyloba.

Recomendaciones Realizar una investigación sobre las pasifloras que mostraron una regeneración nula y alta mortalidad, ello para verificar si se debe a condiciones endógenas o a requerimientos nutricionales, de desinfección o ambientales específicas. Se sugiere que los nutrientes tanto micronutrientes como macronutrientes adicionados al medio de cultivo, sean de elaboración reciente, para lograr que los medios de cultivo se solidifiquen de forma correcta. Es necesario un control de dos veces por día de la temperatura donde se incuban los medios de cultivo ya sembrados, ello con el fin de asegurar que no haya un aumento o descenso que ocasione trastornos en el proceso de regeneración.

Recomendaciones Establecer nexos con productores de mariposas para identificar la preferencia en cuanto a la alimentación de larvas y calidad de las pupas en relación a las plantas generadas por medio del cultivo in vitro. Promover a los productores el uso racional de los recursos del bosque para obtención de plantas madre para la alimentación de mariposas en un zoocriadero; para contribuir con la restauración de los ecosistemas, disminuyendo la presión hacia las poblaciones de pasifloras.