VIRUS y VIROIDES FITOPATOGENOS Balthasar van der Ast, 1620 Flowers & Fruit VIRUS y VIROIDES FITOPATOGENOS Ing. Agr. Elena Pérez MSc Unidad de Fitopatología Curso- 2003

Desarrollo del tema: Características generales de los virus Importancia Taxonomía y clasificación Diagnóstico Desarrollo de la enfermedad Influencia del ambiente Criterios de manejo

Características generales de los virus 1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES 2. CARACTERÍSTICAS FISICAS 3. ASPECTOS GENERALES

1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES 1. GENOMA. ssDNA, dsDNA, ssRNA, sdRNA 85% de los virus fitopatógenos ssRNA Función: Información genética para codificar las proteínas de la cápsula.

1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES 2. CAPSULA. SUBUNIDADES PROTEICAS (capsómeros). GENERALMENTE UN SOLO TIPO DE PROTEINA, PERO ALGUNOS VIRUS GRANDES PUEDEN PRESENTAR MAS DE UNA. Función: proteger AN

1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES MONOPARTITAS O MULTIPARTITAS Vírus del mosaico de la alfalfa: 5 subunidades de diferente tamaño. Fuente: Agrios, G. Fitopatologia, 1986 ¿por qué?

2. CARACTERÍSTICAS FÍSICAS. 1. Tamaño de los virus. UNIDADES SUBMICROSCOPICAS Microscopio óptico: 0,2 µm (0,0002 mm) Microscopio electrónico: (nm o Å). 2000 nm = 0,02mm 2. Forma de los virus

Forma de los virus varilla: flexible rígida 10-13 nm x 480-2000nm Adaptado de

Forma de los virus Esféricos/poliédricos: Adaptado de 17-60 nm

Forma de los virus Baciliformes: 75 nm x 380 nm Adaptado de

Parásitos obligados de células Pueden: producir infecciones 3. ASPECTOS GENERALES Parásitos obligados de células Pueden: producir infecciones multiplicarse Más de un 30% patógenos en plantas Dificil identificación y control

3. ASPECTOS GENERALES No pueden: dividirse aumentar en tamaño reproducirse sexual o asexualmente

Jan Davidsz de Heem, 1645. Vaso de flores ¿qué son los vírus? “Los virus…….son los virus” André Lwoff, Premio Nobel Medicina, 1965. Jan Davidsz de Heem, 1645. Vaso de flores

Viroides 1. Bajo peso molecular 2. No tienen cápsula proteica Características: 1. Bajo peso molecular 2. No tienen cápsula proteica 3. Se multiplican en forma autónoma 4. Parásitos obligados 5. Infecciosos

Viroides Composición: ssRNA - circular genome monopartita

Viroides Tamaño: 75,000 - 125,000 d = 246-399 nucleotides

Viroides Descubiertos en 1967 Potato spindle-tuber Unicamente en plantas

Viroides Multiplicación: no se conoce bien durante la transcripción del DNA del hospedero occurre en el nucleo

Importancia de los virus Aspectos patogénicos Difícil detección, caracterización, diagnóstico y control de las enfermedades que producen. Aspectos biológicos Modelo para estudios de genoma (regulación de genes, mRNA)

(Tomato spotted wilt virus) Taxonomía de virus NO SE UTILIZAN TERMINOS BINOMIALES EN LATIN Orden (virales) Familia (viridae) Género (virus) Especie (Tomato spotted wilt virus)

Taxonomía de virus Tobacco mosaic virus - TMV Potato Y potyvirus (PYV) Lettuce mosaic potyvirus (LMV) Potato leafroll virus (PLRV)

Taxonomía de virus PRIMER HUESPED + SÍNTOMA + VIRUS Familia: Bromoviridae Género Bromovirus Especie: brome mosaic virus. Familia: Bunyaviridae Género: Tospovirus Especie: Tomato spotted wilt virus

Algunas caracteristicas taxonómica Acido nucleico Tamaño Forma

Taxonomía de virus Potato Y potyvirus (PVY) Lettuce mosaic potyvirus (LMV) Moteado

Taxonomía de virus Barley yellow dwarf luteovirus (BYDV) Potato leafroll luteovirus (PLRV)

DIAGNOSTICO 1. Observación de síntomas 2. Plantas indicadoras 3. Observación directa (microscopio electrònico) 4. Serología 5. Técnicas moleculares

2. Plantas indicadoras Tabaco, pepino, Chenopodium quinoa, etc. Sin síntomas Lesiones locales Síntomas sistémicos

Transmisión Transmisión mecánica o por jugos Macerado de planta enferma Abrasivo (carborundum) Planta sana

3. Observación directa Virus partícula Pequeña sección de un planta infectada Adaptado de

3. Observación indirecta TMV CMV PVY Cuerpos de inclusion Adaptado de

3. Observación directa Microscopía electrónica Adaptado de

reacción antígeno-anticuerpo 4. Serologia reacción antígeno-anticuerpo Inmunodifusión en gel ELISA Kit comerciales

4. Serologia Test de doble difusión: Ag3 Ag2 Ag1 Ab Ag4 Adaptado de

4. Serología ELISA = Enzyme-Linked Immunosorbent Assay substrate An Ab substrate Adaptado de

CONSISTE EN AMPLIFICAR FRAGMENTOS DE DNA HASTA NIVELES DETECTABLES. 5. Técnicas moleculares PCR = Polimerase chain reaction (reacción en cadena de la polimerasa) CONSISTE EN AMPLIFICAR FRAGMENTOS DE DNA HASTA NIVELES DETECTABLES.

Processes in Cell Biology transcription translation mRNA DNA protein replication DNA RNA reverse transcription

Virus RNA Primer 3´ Enzima transcriptasa inversa Nucleotidos Tampón DNA Primer 5´ Enzima taq polimerasa Nucleotidos Tampón