Cromatografía Objetivos: Separar las especies de interés de otros componentes en la matriz de la muestra Características: Técnica sencilla y rápida de separación e identificación. Se pueden obtener registros de análisis (cromatogramas). Poco destructivas, aplicables a sustancias lábiles.
La cromatografía y sus variantes presentan dos fases, una móvil y otra estacionaria.
Según el dispositivo utilizado para conseguir el contacto entre la fase móvil y la estacionaria, se distinguen dos técnicas:
Cromatografía líquido-sólido (columna)
Otros tipos de cromatografías en columna:. De reparto Otros tipos de cromatografías en columna: * De reparto * Sobre geles porosos Principio de la cromatografía de filtración en gel:
Cromatografía Liquida-Sólida (Capa Fina) Cromatografía Liquida-Sólida (Capa Fina) * Esta técnica es una de las más comunes usadas en el laboratorio. * Permite: Determinar el grado de un compuesto. Comparar muestras. Realizar el seguimiento de una reacción. Controlar el contenido de las fracciones obtenidas en el cromatograma de columna.
Para realizar una cromatografía en papel o placa se procede de la siguiente manera:
1) Preparar o cortar, en su caso, una placa de tamaño adecuado.
2) Disolver una pequeña cantidad de la muestra y, mediante un capilar de vidrio, pinchar en la parte inferior de la placa a cierta distancia del borde.
3) Introducir la placa en un recipiente con el disolvente adecuado 3) Introducir la placa en un recipiente con el disolvente adecuado. Dicho recipiente debe presentar una atmósfera saturada en el vapor del disolvente por lo que se pone trozo de papel de filtro en la parte posterior y disponer de un sistema de cierre.
4. Cerrar el recipiente y dejar que el líquido ascienda por capilaridad.
5) Revelar la placa para poner de manifiesto donde se encuentran los puntos .
6) Determinar las posiciones relativas de los puntos mediante el cálculo del Rf