Diagnóstico Genético de Preimplantación Aguirre, Felicitas Bernigaud, Clara Carratalá, Guadalupe Martinez Tanoira, Josefina Segovia, Daiana Sobrado, Eugenia

Diagnóstico genético preimplantacional no invasivo Existencia de ADN en el fluido de blastocele Blastocentesis Contenidos genómicos y de ADN mitocondrial en el medio de cultivo Detección por PCR del ADN genómico secretado en el medio de cultivo células apoptóticas del embrión en crecimiento

Ensayo NICS en el primer paciente con translocación balanceada Paciente con translocación t(14;15) (q22;q24) 3 blastocitos: NICS en D3 D5 2 con anormalidades cromosómicas 1 con CARIOTIPO NORMAL Transferencia Implantación Embarazo exitoso

Limitaciones del NICS Eliminación minuciosa de todas las células de la corona radiada. Garantizar la eliminación de cualquier esperma supernumerario adherido a la zona pelúcida. Por esto se realiza en conjunto con ICSI. Actualmente, NICS es un ensayo para determinar el nivel cromosómico de anormalidades en lugar de ser un ensayo de diagnóstico para aneuploidías segmentarias.

Discusión El uso extensivo de PGS en todos los ciclos de FIV/ICSI pueden generar daño potencial en el embrión debido a su manipulación. Posibles efectos adversos a largo plazo en descendientes. Se requiere considerables entrenamiento y experiencia para la manipulación de embriones, aumentando los costos de realizar PGS.

Preparación de los embriones Si estaban congelados debían ser calentados primero, con una solución de descongelación. Si no estaban congelados, se almacenan en Nitrógeno Líquido Embrión D3

Descongelación

Proceso de Descongelación 1) Solución de descongelación durante un minuto a 37°C 2) Solución de dilución durante 3 minutos 3) Incubación en dos gotas de lavado de 80 µL durante 3 minutos a temperatura ambiente. Tira de Cryotop

Cultivo del Blastocito Se colocaron en gotas de SAGE (Quinns Advantage Protein Plus) que permite que el blastocito crezca en condiciones favorables. Se incubaron en incubadoras Labotec C16, que proveen: 5% O2 Y N2 y 5,5% CO2. A los dos días se sacaron, y se evaluó la calidad del blastocito para su transferencia.

Recolección de la Muestra Pipetas de Pasteur Recolección de 5 a 20 µL del medio del blastocito. Tubos PCR ADNasa y ARNasa libres, pero con Yikon Genomics. Controles

Selección de Embriones por Nics en un paciente con translocación equilibrada Pareja 3 años de Infertilidad, porque él tenía una traslocación cromosómica ENTONCES… 5 huevos en ciclo IVF 4 ovocitos fecundados 3 llegaron a blastocitos se congelaron NICS cariotipo normal implantación confirmar embarazo

Conclusiones Ensayo NICS: para el diagnóstico de preimplantación no invasivo Permite conocer el cariotipo del embrión sin que se perjudique el desarrollo del mismo La eficacia de este procedimiento se basa en su alta especificidad y sensibilidad que son de 84% y 88,2% En cuanto a cuestiones éticas y morales el ensayo trata con embriones humanos y su desarrollo. los embriones no utilizados son descartados o utilizados para investigación Esta técnica es realizada en China, implica un alto costo de materiales y demanda un personal altamente capacitado

¡¡Muchas Gracias!!