ANÁLISIS DE LOS ESTEROIDES SEXUALES Asun Doménech

INTRODUCCIÓN La producción de esteroides se realiza en ovario, testículo y glándula suprarrenal Son responsables de las características sexuales 1ias y 2ias Su síntesis se inicia a partir de la molécula de colesterol

ANDRÓGENOS ♂ Eje hipotálamo-hipofisario-gonadal Producción de andrógenos en las cels de Leydig (tubos seminíferos) Características sexuales masculinas, masa muscular y ósea, libido y función sexual TESTOSTERONA: pubertad desa. sexual 2º En tejidos se transforma en DHT (α-reductasa), > potencia Gl. Suprarrenales: DHEA, DHEA-S, androstendiona y androstendiol Testosterona y DHT en tejidos diana

Fuente de estrógenos postmenopáusia ANDRÓGENOS ♀ - 5-10% de la cantidad de testosterona que presentan los ♂ - El 50% de la testosterona se produce en los ovarios y la gl. Suprarrenal y el otro 50% se produce a partir de precursores circulantes - La DHT se produce en ♀ en tejidos diana periféricos concentración en suero Fuente de estrógenos postmenopáusia aromatasa Testosterona Estradiol

TRANSPORTE Y METABOLISMO DE ANDRÓGENOS Circulan libres (<3%) o unidas a proteínas en plasma Afinidad 60-70% testosterona (no activa) SHBG Capacidad Capacidad Biodisponible (35% testosterona) Albúmina Afinidad

DETERMINACIÓN TESTOSTERONA TOTAL Testosterona libre + unida a albúmina y SHBG Método referencia: CG-SM y CL-SM (evaluar métodos de rutina) Método rutinario: Inmunoensayo quimioluminiscente ♂ adultos buena correlación con métodos ref. ♀ y niños NO buena correlación con métodos ref. Reactividad cruzada con DHT Resultados falsamente en recién nacidos (gl. Suprarrenal fetal) Variación diurna en ♂ jóvenes (pico 4-8h) extrac. Matinal Variabilidad intraindividual en ♂ y ♀ + de una determinación Estable 1 semana (♂) y 3 días (♀) a 4ºC y 1 mes a -20ºC

DETERMINACIÓN TESTOSTERONA LIBRE Y BIODISPONIBLE Determinación directa dificultosa (diálisis de equilibrio o ultrafiltración, precipitación selectiva,…). Necesita métodos analíticos de alta sensibilidad y que se mantenga el equilibrio frac unida/libre durante el análisis Métodos indirectos: sencillos y aceptable como marcador de hiperandrogenismo ♀ Testosterona (nmol/L) x 100 ITL= SHBG (nmol/L)

DETERMINACIÓN DHEA Y DHEA-S Importante para el estudio de la producción de andrógenos en la hiperplasia suprarrenal, tumores suprarrenales, adrenarquia, pubertad retrasada o hirsutismo La [DHEA] presenta ritmo circadiano y varía con el ciclo menstrual La [DHEA-S] NO presenta ritmo circadiano (>T1/2 plasmática) Inmunoensayo método de elección DHEA: circula en [ ] de ng/ml DHEA-S: reactividad cruzada con DHEA, androstendiona y androsterona pero las menores [ ] de éstos hacen que el efecto sea mínimo

DETERMINACIÓN ANDROSTENDIONA Producción suprarrenal y gonadal ♀: En f. luteínica se recomienda realizar extracción en fase folicular temprana hiperandrogenismo y sind. Ovario poliquístico tumor suprarrenal u ovárico, hiperplasia suprarrenal congénita ♂: Asintomático Manifestaciones de hiperestrogenismo (conversión perif. a estrógenos) Inmunoensayo: método más utilizado

DETERMINACIÓN DHT Andrógeno de mayor actividad No es buen marcador de hiper/hipoandrogenismo (rápida metab. y afinidad SHBG) Determinación por inmunoensayo [DHT] en el déficit de 5-α-reductasa y tratamiento con inhibidores de la 5-α-reductasa (finasteride)

INTERÉS CLÍNICO ANDRÓGENOS ♂: Estudio del hipogonadismo masculino (Testosterona, LH, FSH y PRL) Primario: Testosterona y LH Secundario: Testosterona y LH ♀: estudio del hiperandrogenismo (hirsutismo, acné, alopecia, alteraciones menstruales) Testosterona, DHEA, DHEA-S, LH y FSH 17-OH-Progesterona, PRL y cortisol

CONCENTRACIÓN AUMENTADA CONCENTRACIÓN DISMINUIDA PATOLOGÍAS EN EL HOMBRE CONCENTRACIÓN AUMENTADA CONCENTRACIÓN DISMINUIDA TESTOSTERONA Administración de testosterona Tumores testiculares o adrenales Hipogonadismo 1io o 2io Enf. Genéticas (Klinefelter) Alcoholismo, parotiditis Tto con Fcos antiandrogenicos DHEA-S Tumor adrenal HSC (Hiperplasia suprarrenal congénita) Enf. De Cushing Insuf. Suprarrenal crónica Enf. De Addison Hipopituitarismo ANDROSTENDIONA Tumor productor de andrógenos DHT Tratamiento con Fcos antiandrogénicos

CONCENTRACIÓN AUMENTADA CONCENTRACIÓN DISMINUIDA PATOLOGÍAS EN LA MUJER CONCENTRACIÓN AUMENTADA CONCENTRACIÓN DISMINUIDA TESTOSTERONA Sínd. ovario poliquístico (SOP) Tumor ovárico o adrenal HSC (Hiperplasia Suprarrenal Congénita) DHEA-S Idiopética Tumor adrenal HSC Enf. Cushing Insuf. Suprarrenal crónica Enf. De Addison Hipopituitarismo ANDROSTENDIONA SOP DHT Administración de andrógenos Tumores productores de andrógenos Déficit de 5α-reductasa

ESTRÓGENOS ♀ Secreción realizada por los folículos ováricos o por el útero durante el embarazo FSH estimula el crecimiento folicular LH estimula la ovulación y la secreción de progesterona por el cuerpo lúteo Participan en la regulación del ciclo menstrual, crecimiento mamario y uterino y en el mantenimiento del embarazo Homeostasis del calcio y disminuyen la resorción ósea

ESTRÓGENOS ♂ Se sintetizan en tejidos diana periféricos (Tejido adiposo, tracto reproductivo y hueso) Actúan localmente, limitadas acciones sistémicas aromatasa Testosterona Estradiol

TRANSPORTE Y METABOLISMO DE ESTRÓGENOS Circulan libres (<3%) o unidas a proteínas en plasma Controvertida utilidad de la determinación de la fracción libre Afinidad SHBG Capacidad Capacidad Albúmina Afinidad

DETERMINACIÓN ESTRADIOL Método gold standard CG-EM o CL-EM Determinación habitual por inmunoensayo quimioluminiscente Limitaciones a [ ] bajas (niños, ♂, postmenopausia y en ♀ en tratamiento con inhibidores de la aromatasa)

DETERMINACIÓN PROGESTERONA Método gold standard CG-EM o CL-EM Determinación habitual por inmunoensayo quimioluminiscente Utilidad en el estudio de la presencia de ovulación, determinar en fase luteal

INTERÉS CLÍNICO ESTRÓGENOS PATOLOGÍAS EN LA MUJER CONCENTRACIÓN AUMENTADA CONCENTRACIÓN DISMINUIDA ESTRADIOL Extrac. De sangre fuera de Fase folicular Tumor ovárico o adrenal Hipertiroidismo Cirrosis Hipogonadismo Sínd. De Turner Hipopituitarismo PROGESTERONA Embarazo HSC Disminución de la función ovárica (medir en fase luteal) PATOLOGÍAS EN EL HOMBRE CONCENTRACIÓN AUMENTADA CONCENTRACIÓN DISMINUIDA ESTRADIOL Tumor testicular o adrenal Hipertiroidismo Cirrosis

INTERÉS CLÍNICO ESTRÓGENOS Creciente interés en cáncer de mama Asociación positiva entre [estradiol] en ♀ postmenopáusicas y riesgo de cáncer de mama [estradiol] monitorización de los inhibidores de la aromatasa INCONVENIENTES: Límite de detección de los métodos inmunoensayo actuales Reacciones cruzadas de Exemastane (estructura similar al estradiol) con los métodos de inmunoensayo

77 ♀ postmenopáusicas con CM tratadas con IA Mediciones con 6 kits comerciales comparadas con CL-EM Conclusión: Enzimoinmunoensayo no es útil para la determinación de E2 en este tipo de pacientes Este tipo de muestras se deben analizar por CL-EM