Tema 14 del tomo II del libro PARÁSITOS Temas 21, 22 y 23 del temario Tema 14 del tomo II del libro (Granados Pérez, R. y Villaverde Peris, M.C. (2003).- Microbiología. Ed. Paraninfo) Ciclo Formativo de Grado Superior: Laboratorio de Diagnóstico Clínico Módulo: Fundamentos y Técnicas de Análisis Microbiológico Profesores del módulo en el turno vespertino: José Ángel Pina Alburquerque Antonio Sánchez Moreno

PARASITOLOGÍA Rama de la biología que estudia el fenómeno del parasitismo. Estudia: Los parásitos y la relación de ellos con sus hospedadores y el medio ambiente. Las parasitosis o enfermedades causadas en el hombre, animales y plantas por los organismos parásitos. Convencionalmente, se ocupa solo de los parásitos eucariotas: Protozoos Helmintos (trematodos, cestodos, nematodos) Artrópodos El resto de los organismos parásitos (virus, procariotas y hongos) tradicionalmente se consideran una materia propia de la microbiología.

Especialidades sanitarias Real Decreto 639/2014, de 25 de julio (BOE de 6/08/2014), por el que se regula la troncalidad, la reespecialización troncal y las áreas de capacitación específica ANEXO I I. Relación de especialidades médicas y pluridisciplinares incluidas en el anexo I del Real Decreto 183/2008, de 8 de febrero, que se adscriben al sistema formativo troncal clasificadas por troncos Tronco número 3: Tronco de Laboratorio y Diagnóstico Clínico (TCLDC) Análisis Clínicos y Bioquímica Clínica. Genética Clínica. Inmunología. Microbiología y Parasitología Especialidades multidisciplinares Se accede a través del BIR, FIR y MIR

Especialidades sanitarias BIR: Inmunología Análisis Clínicos y Bioquímica Clínica Microbiología y Parasitología Radiofarmacia Genética Clínica MIR: 47 especialidades, de las cuales, relacionadas con el laboratorio: Análisis Clínicos y Bioquímica Clínica Anatomía patológica Farmacología clínica Genética clínica Inmunología Medicina nuclear Microbiología y parasitología Radiodiagnóstico o radiología FIR Farmacia Hospitalaria Análisis Clínicos y Bioquímica Clínica Genética Clínica Inmunología Microbiología y Parasitología Radiofarmacia

PARASITOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA PROTOZOOS HELMINTOS ARTRÓPODOS

PARASITOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA: PROTOZOOS Trofozoitos: Forma vegetativa Quistes: Forma de resistencia e infectante Según su locomoción se clasifican: Amebas (Entamoeba histolytica) Ciliados (Balantidium coli) Flagelados Intestinales (Giardia lamblia) Vaginales (Trichomonas vaginalis) Hemoflagelados (Tripanosomas y Leishmanias) Esporozoos (Plasmodium, Toxoplasma, Pneumocistis, Crypstosporidium)

PROTOZOOS: AMEBAS Emiten pseudópodos (evaginaciones del citoplasma) Entamoeba histolytica Emiten pseudópodos (evaginaciones del citoplasma) Parásitos intestinales Quiste 4 núcleos Entamoeba histolytica Necrosis en el colon: Disentería amebiana Puede invadir tejidos Diagnóstico: Observación al microscopio en fresco o con tinciones vitales (eosina, ioduro) de los quistes o con fijación y tinciones permanentes. Cultivo. Otras: Acanthamoeba, Naegleria Trofozoito

PROTOZOOS: CILIADOS Se mueven por cilios Balantidium coli Parásito del colon: Disentería sanguinolenta Diagnóstico en heces

PROTOZOOS: FLAGELADOS Se mueven por flagelos Giardia lamblia Parásito del intestino delgado: Diarrea intermitente, malabsorción y desidratación Transmisión: quistes via fecal-oral Diagnóstico: Observación en heces. En fresco Tinción Método de concentración Métodos inmunológicos: ELISA

PROTOZOOS: FLAGELADOS Flagelados vaginales: Trichomonas vaginalis En vagina y uretra : Vaginitis y uretritis Transmisión sexual Diagnóstico: Observación en fresco a partir de frotis vaginales o sedimento urinario. Tinción Cultivo. Otros: T. hominis, T. tenax

PROTOZOOS: FLAGELADOS HEMOFLAGELADOS Tripanosomas: Se transmiten por vectores invertebrados. Complejo ciclo de vida, con variedad de diferentes formas en el invertebrado huésped, y en los huéspedes vertebrados (forma tripomastigota: con flagelo que recorre la célula y una membrana ondulante).

Trypanosoma brucei Enfermedad del sueño (tripanosomisis africana) Transmitido por la mosca tsé-tsé (Glosina palpalis) T. brucei gambiense en Africa central y occidental. Enfermedad de curso lento. T. brucei rhodesiense en Africa oriental

Trypanosoma brucei Mosca tsé-tsé (Glossina spp)

Trypanosoma brucei Formas en las que se presenta: Epimastigota. El cuerpo basal y cienetoblasto (ADN circular extracromosómico) se encuentra en posición anterior al núcleo, con un flagelo largo conectado a lo largo del cuerpo celular. Tripomastigota. El cuerpo basal y cienetoblasto son posteriores al núcleo, con un flagelo largo conectado a lo largo del cuerpo celular. Esta forma es la que infecta al hombre

Etapas de la enfermedad: Trypanosoma brucei Etapas de la enfermedad: 1º -  fase hemolinfática Los primeros sistemas invadidos son el cardiovascular, renal y endocrino. Se presentan accesos de fiebre muy elevada durante varios días, separados por periodos afebriles. Jaquecas, debilidad intensa, dolores de articulaciones, taquicardias, anemia, edema intenso, alteraciones circulatorias, pérdida de peso y picazón. 2º - fase neurológica El parásito atraviesa la barrera hematoencefálica e invade el sistema nervioso central. Cambia el comportamiento y el carácter del individuo se muestra indiferente, con menos concentración e irritable. El humor se vuelve impredecible, pasando bruscamente de la alegría a la tristeza. Durante el día aparecen periodos de somnolencia, cada vez más frecuente y prolongados Por la noche aparece el insomnio Cualquier mínimo esfuerzo se hace imposible. Es típico el signo de la llave, o signo de Kerandel, que supone que el enfermo no puede abrir una cerradura por el dolor que le supone doblar la muñeca. En la fase final el paciente entra en coma, y se produce la muerte.

Trypanosoma cruzi Parásito intracelular Transmitido por las heces de las chinches Enfermedad de Chagas (Tripanosomiasis americana) Síntomas: Periodo de latencia de una a dos semanas Fiebre hepatoesplenomegalia Síntomas gripales Erupción cutánea Párpado inflamado Si no se trata, más adelante puede causar miocarditis. T. cruzi amastigote in human fibroblasts

Forma amastigota en fibroblastos humanos Trypanosoma cruzi Forma amastigota en fibroblastos humanos Chinche (Triatoma spp)

Trypanosoma cruzi Amastigota: esférico u ovalado, es la forma reproductiva en el interior de las células de mamíferos (principalmente en células musculares y nerviosas). Epimastigota: alargado y con el cinetoplasto localizado anteriormente al núcleo, es la forma reproductiva en el tracto digestivo de los invertebrados y en medio de cultivos. Tripomastigota: también alargado, pero con el cinetoplasto localizado posteriormente al núcleo. Se encuentra en la sangre de los mamíferos y es la forma infectante de ellos. Esta forma no se divide.

Trypanosoma spp diagnostico por el laboratorio Visualización microscópica del parásito en una extensión de sangre periférica, microhematocrito, hemocultivo en medio especializado. Estas técnicas sólo son válidas en la fase aguda de la infección, cuando hay gran cantidad de tripomastigotes circulando en sangre, especialmente en las primeras 6-10 semanas de infección.  Detección indirecta del parásito con técnicas serológicas (ELISA, IFI, IHA): Se utiliza sobre todo en la fase crónica, en la que el título de anticuerpos IgG anti-T. cruzi es elevada. PCR

Leishmania spp Producen leishmaniosis. El principal vector de infección son los mosquitos de los géneros Phlebotomus (en Eurasia y África) y Lutzomyia (en América) Leishmaniosis cutáneas: Botón de Oriente (causada por L. major, L. tropica, y L. aethiopica). Leishmaniosis cutáneo-mucosas (causada por L. mexicana y L. braziliensis) Leishmaniosis viscerales: Kala azar (causada por L. donovani). Se halla en áreas tropicales y subtropicales. Produce inflamación de hígado y bazo.

Leishmania spp Son parásitos intracelulares obligados de los macrógfagos. Diagnóstico por el laboratorio: Observación con tinción de giemsa Cultivo en medio NNN (Novy-MacNeal-Nicolle) Técnicas inmunológicas Técnicas de Biología Molecular (PCR)

ESPOROZOOS Conjunto heterogéneo, polifilético, de microorganismos. Actualmente se adscriben a cuatro grupos muy separados evolutivamente, pero a los que la adaptación al parasitismo extremo (obligados) ha dotado de rasgos y ciclos vitales semejantes. El grupo ha perdido su lugar tradicional en la clasificación y el nombre sólo se usa ya para designar su modo de vida: - Parásitos obligados - Presentan generalmente alternancia entre fases de reproducción sexual y otras de multiplicación asexual. - Produce un gran número de esporas Gametozoito Trofozoito Imagen: P. falciparum (tomado de http://www.cdc.gov/dpdx/malaria/gallery.html#pfaloldtrophs )

ESPOROZOOS Plasmodium spp Provocan la MALARIA o PALUDISMO Plasmodium (P. vivax, P. malarie, P. falciparum, P. ovale) Pneumocystis carinii Cryptosporidium muris Toxoplasma gondii Plasmodium spp Provocan la MALARIA o PALUDISMO P. Falciparum : La mas virulenta Vector: Mosquito Anopheles, donde se reproduce sexualmente, inoculando el esporozoito a vertebrados, donde se produce la reproducción asexual. Ciclo: En vertebrados, tras la inoculación, el esporozoito va a las células hepaticas, donde se transforma en trofozoitos, y merozoitos, pasando a los hematíes donde se multiplican, infectan a más hematíes y producen gametocitos que son ingeridos por el mosquito.

MALARIA Entre 700 000 y 2,7 millones de personas mueren al año por causa de la malaria, de los cuales más del 75 % son niños en zonas endémicas de África. Unos 400–900 millones de casos de fiebre aguda al año en la población infantil (menores de cinco años) en dichas zonas. El 25 de abril es el Día Mundial del Paludismo (Desde 2007). Además de la transmisión por el mosquito Anopheles, existe la posibilidad de contagio directo vía materno fetal o a través de transfusiones.

MALARIA: síntomas Muy variados, empezando con fiebre y escalofríos, que son síntomas cíclicos, repitiéndose cada dos o tres días. También sudoración y dolor de cabeza, náuseas, vómitos, tos, heces con sangre, dolores musculares, ictericia, defectos de la coagulación sanguínea, shock, insuficiencia renal o hepática, trastornos del sistema nervioso central y coma.

MALARIA: síntomas

MALARIA: Tratamiento: antipalúdicos Quinina: presenta actividad esquizonticida hemática, forma complejos con hemo que resultan tóxicos para el parásito. Se usa en áreas palúdicas con resistencia de P. falciparum. Se le debe asociar un segundo fármaco como clindamicina o doxiciclina. Si hay resistencias suele utilizarse atavacuona- proguanil En la malaria grave producida por P. falciparum, se emplea quinina + doxiciclina Otros: Primaquina, Cloroquina, Atavacuona, Derivados de artemisinina, Lumefantrine

MALARIA: Diagnóstico 1. Microscopía (a partir de sangre venosa anticoagulada con EDTA) GOTA GRUESA: Técnica de referencia que requiere microscopistas expertos. Es la más difundida. Permite el examen de una mayor cantidad de sangre en menos tiempo. Se pone una gota en el centro del portaobjetos y se hacen movimientos envolventes para romper los hematíes y que permita observar los parásitos. EXTENSIÓN EN SANGRE PERIFÉRICA TEÑIDAS CON GIEMSA: más lento que la gota gruesa, no se rompen los hematíes, por lo que los parásitos no cambian la morfología y es más fácil identificarlos. 2. Serología: IFI y ELISA Se emplean sobre todo en estudios epidemiológicos. 3. Diagnóstico molecular

MALARIA: Diagnóstico http://www.cdc.gov/dpdx/malaria/dx.html

MALARIA: Diagnóstico

ESPOROZOOS Pneumocystis carinii Plasmodium (P. vivax, P. malarie, P. falciparum, P. ovale) Pneumocystis carinii Cryptosporidium muris Toxoplasma gondii Quiste de Pneumocystis jiroveci en un lavado broncoalveolar con tinción de Giemsa. Pneumocystis carinii Actualmente: Pneumocystis jirovecii  y clasificado dentro del reino Fungi, filo Ascomycota (según su ADN) Es un patógeno, oportunista, extracelular, que parasita el árbol respiratorio del ser humano, produciendo una infestación que se manifiesta en muchos pacientes que han sufrido de inmunosupresión. Común en los pacientes con SIDA. Esta enfermedad es conocida como neumocistosis.

ESPOROZOOS Cryptosporidium muris Plasmodium (P. vivax, P. malarie, P. falciparum, P. ovale) Pneumocystis carinii Cryptosporidium muris Toxoplasma gondii Cryptosporidium muris Criptosporidiasis diarréica: Parasitosis intestinal aguda de corta duración Grave en inmunodeprimidos (SIDA) Exámen microscópico de heces

ESPOROZOOS Toxoplasma gondii Plasmodium (P. vivax, P. malarie, P. falciparum, P. ovale) Pneumocystis carinii Cryptosporidium muris Toxoplasma gondii Toxoplasma gondii Huésped definitivo: El gato (gametogonia en las células de la mucosa de su intestino) Contagio a aves y otros mamíferos (incluído el Hombre) a través de ooquistes en las heces del gato y de estos a través de carne poco cocinada. En estos solo ciclo asexual. Infección asintomática, excepto en inmunodeprimidos (SIDA). Atraviesa palcenta: Provoca malformaciones en el feto y aborto.

ESPOROZOOS: Toxoplasma gondii

PARASITOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA: HELMINTOS NEMATELMINTOS: Gusanos redondos Nematodos PLATELMINTOS: Gusanos planos Trematodos Cestodos

Nematelmintos: - Oxiuros Enterobius vermicularis El más frecuente en intestino humano También en tracto genitourinario Hembra: 10 mm x 0,5 mm. Macho: 2 – 5 mm x 0,01 – 0,02 mm Diagnóstico: Prueba de Graham: celofán Síntomas: irritabilidad, insomnio, prurito anal

Nematelmintos: - Ascáridos Ascaris lumbricoides El más abundante después de los oxiuros En niños de regiones tropicales y subtropicales. Macho: 15 – 30 cm, extremo posterior enrollado. Hembra: 20 – 30 cm Contagio por ingestión de huevos. Las larvas van al pulmón vía sanguínea de allí a la faringe, donde son deglutidas y en el intestino desarrollan la forma adulta. Ciclo: 8 – 12 semanas. Bronconeumonía y obstrucción intestinal Diagnóstico: visualización de huevos por técnicas de sedimentación.

Nematelmintos: - Ascáridos Anisakis Anisakiasis En pescado crudo Granulomas eosinófilos en el tracto intestinal

Nematelmintos: Ascáridos

Nematelmintos: - Ancylostomidos Ancylostoma duodenale Penetran por la piel, van al pulmón, faringe, intestino. Patología según localización: Sarna de la mina Neumonitis Diarreas y dolor abdominal Anemia hipocrómica y microcítica (crónica) Ancylostoma brasiliense, Ancylostoma caninum, Necator americanus Patología: Larva migrans cutánea. Penetran por la piel. Excavan túneles. Estrongyloides stercolaris: Dermatitis, neumonías y trastornos intestinales

Nematelmintos: - Triquinélidos Trichinella espiralis Triquinosis: Se adquiere al comer carne de cerdo con quistes. Las formas adultas aparecen en el intestino transitoriamente. Las larvas en los tejidos (músculo esquelético, miocardio, SNC) dando lugar a quistes. Hembras: 3,5 mm Macho: 1,5 mm Larva: 80 – 120 micras Diagnóstico de laboratorio: Técnicas serológicas e histológicas.

Nematelmintos: - Filarias Wuchereria bancrofti Loa loa Mansonella spp En África y América Central y del Sur La hembra adulta produce microfilarias (embriones móviles), van a sangre. Transmisión: Picadura de mosquito (microfilarias pasan a larvas infecciosas) Se transforman a formas adultas y aparecen en piel (elefantiasis), sangre u otros líquidos

Nematelmintos: - Filarias Método de Filtración: Para observar microfilarias. La muestra extraída en EDTA (1 ml). Se lisan los hematíes con 9 ml de formol al 2 %. Este lisado se pasa por un microfiltro de 5 µm de poro se pone en un porta y se tiñe con una gota de azul de metileno al 1 %. Se pone un cubre y se observa al microscopio a 10 X y 40 X

Filo: Platelmintos Clase: Trematoda Los trematodos son conocidos comúnmente como duelas En estado adulto son endoparásitos de vertebrados, incluido el ser humano y en estado larvario lo son de moluscos y, a veces, de un tercer hospedador. Cuerpo aplanado, no segmentado, con frecuencia en forma de hoja . Ventosa cefálica y ventral.

Filo: Platelmintos Clase: Trematoda Fasciola hepatica Forma lanceolada, con dos ventosas, una bucal y otra ventral, y un ciclo biológico con dos generaciones en dos hospedadores, un molusco gasterópodo anfibio y un mamífero (fundamentalmente hervívoros). El hombre se puede infectar por ingestión de berros mal lavados. Síntomas: fiebre, eosinofilia y obstrucción biliar. Diagnóstico: Métodos serológicos y observación de huevos en heces (método de flotación).

Filo: Platelmintos Clase: Trematoda Schistosoma spp Adultos: 10-12 mm (macho) y 12-16 mm (hembra) Esquistosomiasis: Frecuente en África. CICLO: Los huevos son excretados por los humanos en las heces y orina, llegan al agua y se liberan las larvas. Estas penetran la piel del molusco dentro del cual se transforman en esporoquistes que originan docenas de miles de cercarias que son liberadas del molusco Penetran la piel del humano (hospedador definitivo) gracias a sus movimientos y secreciones líticas, migrando a diferentes órganos. Paragonimus westermani (parasita epitelios y mucosas. En Asia) Clonorchis sinensis (duela hepática china)

Filo: Platelmintos Clase: Trematoda Schistosoma spp Los huevos carecen de opérculo y poseen un espolón característico. Diagnóstico por observación de huevos en heces y orina

Filo: Platelmintos Clase: Cestoda Tenias Parasitos del tracto gastrointestinal humano en su forma adulta. Larvas en los tejidos del huésped intermediario. Identificación por el estudio de su morfología y los huevos eliminados en heces. En su ciclo pasan por varias fases intermedias (Cisticerco, Cisticercoide, Cenuro, Hidátide, Estrobilocerco, Procercoide Pleurocercoide)

Filo: Platelmintos Clase: Cestoda Morfología: Escolex: o extremidad cefálica con órganos de fijación, como ventosas y ganchos. El estróbilo o cuerpo, formado por segmentos de proglotides. Que van madurando conforme se alejan del cuello. Los más alejados son los grávidos (cargados de hevos). Carecen de tubo digestivo. Absorben los nutrientes a través de la superficie. Son hermafroditas. a) T. solium b) T. saginata

Filo: Platelmintos Clase: Cestoda Taenia solium Mide 2 a 3 m Escolex con cuatro ventosas y un rostellum (protuberancia) con dos coronas de ganchos Las proglotides se eliminan e heces Los huevos si son ingeridos por el cerdo se transforman en oncosferas que por la sangre llegan a distintos órganos y músculo donde se transforman en larvas cisticerco Al ingerir carne de cerdo con cisticercos, se liberan en el intestino humano, dando lugar a la forma adulta. Síntomas: Malestar general, pérdida de apetito y nerviosismo (en niños).

Filo: Platelmintos Clase: Cestoda Taenia saginata Mide hasta 5 m Escolex con cuatro ventosas sin rostellum ni ganchos Huésped intermediario: La vaca

Filo: Platelmintos. Clase: Cestoda

Filo: Platelmintos. Clase: Cestoda Echinococcus granulosus Tenia muy pequeña (4 – 5 mm) Tenia del perro (en su forma adulta) Fase larvaria en ganado ovino o caprino (y ocasionalmente otros herbívoros), aunque de forma secundaria o accidental ésta también puede ser parásito de otros animales, incluyendo al hombre Produciendo la hidatidosis o "quiste hidatídico“ Quiste hidatídico tiene varias capas, la mas externa es tejido conectivo del huésped. La gravedad de la enfermedad depende de la localización. Si un quiste se rompe puede formar nuevos quistes. Diagnóstico: Pruebas serológicas: ELISA PCR.

Filo: Platelmintos. Clase: Cestoda Hymelnolepsis nana Tenia enana: 1 – 2,5 cm No requiere huésped intermediario Más frecuente en niños Produce: fuerte diarrea, pérdida de peso, desnutrición, deshidratación y fuerte dolor abdominal. Diagnóstico por detección de huevos en heces. H. Diminuta (algo mayor y huesped intermediario: artrópodo) Dyplidium caninum (de perros y gatos) Diphyllobothrium latum: grande (10 – 12 m)

FIN