BIOECONOMIA DE LA PRODUCCION DE EMBRIONES Prof. Hugo Hernández Fonseca, M.V., Ph.D Unidad de Investigación en Biotecnología Animal UNIBIO

BIOECONOMIA Economía basada en la biología. Análisis biológico de relaciones económicas.

FECUNDACION in vitro

PROCESO DE PIVE

Producción In Vitro (PIV) PROCESO DE PIVE Donadora Donadora Producción In Vitro (PIV) Receptora Cría SELECCION Y CUIDADO Desempeño Dietas ricas en PUFAs Chips Genómicos OBSERVACION DEL PROCESO Expresión de genes en Cumulus Tiempo de desarrollo Efecto del Semen Antioxidantes Acumulo de lípidos SELECCIÓN DE RECEPTORAS Embrión-Receptora TETF Mestizaje Seguimiento de la cría

PROCESO ECONOMICO 1.000 $ 400-600 $ 200-400 $ 21@ de Buey Dueño de la genética Aspirador Buscador Técnicos de laboratorio Medico Veterinario Transferidor

ACTORES DEL PROCESO DONADORAS CRIAS OVOCITOS EMBRIONES

EL ÉXITO DE LOS EMBRIONES EMPIEZA CON LA DONADORA

DONADORAS Alto valor genético y productivo. Buena condición corporal (cc). Bienestar animal. Con mas de 120 días de paridas (balance energético). Evaluación previa por desempeño. B A

DONADORAS No menos de 15 COCs viables por sesión OPU. Clasificar donadoras luego de 2 OPUs con intervalos de 21 días. Buena población folicular en 2 ecografías con intervalos de 15 días. Hormona Anti-Muelleriana.

DONADORAS No menos de 15 COCs viables por sesión OPU……………….. SE BASA EN DOS CRITERIOS: Uso mas eficiente de los medios de cultivo. 3.5 a 7.0 $/ mL 2 a 3 mL/ donadora 24 a 30 $/ preñez Cultivo en grupos numerosos es favorable. Factores de crecimiento Células del cumulus

DONADORAS PROM. GRAL : 16.7 COCs/ SESION OPU DONADORAS GIR LECHERO OPU A B C D E F G H I 1 5 12 21 --- 6 X 2 53 40 22 44 3 25 19 7 4 42 PROM. 5.3 30 26.3 6.0 20.5 43 PROM. GRAL : 16.7 COCs/ SESION OPU RANGO: 2.5 A 43 COCs/ SESION OPU Datos no publicados EmbrioTec, 2014

DONADORAS Ahorro de unos 22$ en costos de medios de cultivo. COC VIABLES EMBRIONES TRANSF. % PREÑEZ No. PREÑECES No. GOTAS No. GOTAS CON POOL A 5 1 0 % --- B 28 4.3 31 % 4 C 23.3 9.3 22 % 6 D 3 E POOL 12.3 ? Ahorro de unos 22$ en costos de medios de cultivo. Probable incremento de eficiencia por cultivo en pool.

FOLICULOS Tamaño ideal ≥ 3 mm (Dhali et al., 2009). Tamaño folicular muestra relación con tasa de blastocistos (Lonergan et al., 1994, Sarapiao et al., 2014) e implantación (humanos: Miller et al., 1996). Estrés calórico y metabolitos pueden afectar el microambiente folicular y por ende la calidad del oocito.

FOLICULOS

COMPETENCIA OOCITARIA Es la habilidad del oocito de completar la maduración, experimentar una fecundación exitosa y alcanzar el estadio de desarrollo en 7 días de cultivo. CALIDAD EMBRIONARIA Capacidad de desarrollo de un embrión saludable capaz de lidiar con estrés y establecer una preñez (Plourde et al., 2012) .

OVOCITOS

OVOCITOS Tamaño: 120 µm de diámetro (Hytell et al., 1997). Clasificación practica y sencilla: Aptos (Buenos: mas de 3 capas de cumulus, citoplasma homogéneo AUNQUE estén denudados; Goncalves de souza et al., 2013). No Aptos (Malos: degenerados, cumulus expandido, citoplasma heterogéneo).

OVOCITOS Poros de la Zona Pelucida (Santos et al., 2008) CALIDAD DEL OOCITO TAMAÑO DEL PORO (µm) CLIVAGE (%) ECLOSION (%) CALIDAD 1 0.50 ± 0.07 79.5 15.2 CALIDAD 2 0.83 ±0.10 69.3 12.5 CALIDAD 3 1.02 ± 0.22 68.4 0.0 CALIDAD 4 1.38 ± 0.59 43.8

TODOS POSIBLES PREDICTORES DE DESARROLLO EMBRIONARIO. OVOCITOS Bases de expresión genética Mayor expresion de Receptores de Progesterona en COC grado 1 (Pioltine et al., 2013). Mayor expresion de GREM1 en cumulus de oocitos con mayor competencia de desarrollo. PTGS2 Y PGE2 afectan maduracion y competencia de desarrollo. TODOS POSIBLES PREDICTORES DE DESARROLLO EMBRIONARIO.

TOROS Y SEMEN Existen diferencias entre toros, no siempre detectables.

TOROS Y SEMEN El toro influencia la cinética del desarrollo embrionario y una tendencia del sexo de la cría (Alomar et al., 2008;Alomar et al., 2008; Dhali et al., 2009 ). Difieren en su capacidad de penetración y en la producción de ROS (Guimaraes et al., 2013). Tabla 4 y Figura 4 de Alomar…..escanear.

TOROS Y SEMEN Preincubacion spz (cerdos; Brogni et al., 2013. Percoll: 9.000 g vs 2.200 g (Goncalves et.al., 2013).

EMBRIONES Embriones rápidos están asociados a: mayor tasa de blastocistos (dos Santos et al., 2013 ). menor tasa de daño mitocondrial (Urribarri et al., 2010). mayor cantidad de lípidos que los lentos (Annes et al., 2013). Tabla 4 y Figura 4 de Alomar…..escanear. Urribarri y cols, 2012

SISTEMA DE CULTIVO DENSIDAD DE EMBRIONES Y TENSION DE OXIGENO: Menos embriones menos oxigeno (Giotto et al., 2013) INCUBADORAS: Al menos dos. Control de gases: Fyrite Chaquetas de agua: Mantenimiento de temperatura. GASES: Dióxido de Carbono Nitrógeno Mezclas

ACCESORIOS DE INTERES Carbon Activado Permanganato de K Compuestos Orgánicos Volátiles Agregar Incubadoras Filtro HEPA

MEDIOS

LABORATORIO

LABORATORIO

MEDIOS DE CULTIVO Proporciones Embrionarias al día 7 OPU-SOF SOF B2-BRL 8 Estadios Embrionarios 5 6 7

FOLICULOS Desarrollo activo del folículo y del oocito están ligados por al menos 12 semanas a través de las células de la granulosa y la teca. Calidad oocitaria relacionada a la salud del folículo.

LABORATORIO

SISTEMA DE CULTIVO

DONADORAS Grafica de Pontes…..con coc por sesion opu y de juan carlos y nuestras.