ACTIVIDAD DE LA FOSFATASA ALCALINA EN EL ZOOPLANCTON, FRENTE A VARIABLES DEL CAMBIO CLIMATICO Lic.: Laura Wolinski, Dra.: M. Sol Sousa, Dr.: Esteban Balseiro. Laboratorio de Limnología, INIBIOMA (CONICET- UNComahue), Bariloche, Argentina.

Radiación Ultravioleta (RUV) Temperatura. Calidad de alimento. Actividad de Fósfatasa Acalina (AP) en Daphnia commutata frente a:

Radiación UV en el agua Atenuación Nubes y aerosoles MOD MOP ROS Exposición cinética MOD MOP Nubes y aerosoles ROS Gonzalves et al., 2010

temperatura Aumento de la temperatura media del planeta. Aumento de la emisión de gases de efecto inveradero. Los procesos bioquímicos y biológicos se ven afectados por los cambios de temperatura (Hochachka y Somero, 1973). Actividad Ez.

El fósforo cómo nutriente limitante Daphnia commutata (C: Crustacea SO: Cladocera) tiene altos requerimientos de P. La proporción de P del alimento es un importante factor en la distribución de D. Commutata en los lagos andinos. (Balseiro et al. 2007). La relación C:P de los lagos q habita D. commutata varia entre 574–691 (Balseiro et al. 2007)

¿? Zona de estudio Altos índices de RUV. Aumento de 0.5 a 1.1 °C para 2020 (Escenarios cambio climático Arg. IPCC, 2014) Lagos ultra-oligotróficos. Alta penetración de la luz en el agua. Baja cantidad de nutrientes (P) ¿?

Fosfatasa alcalina (AP) EZ  desfosforilación de macromoléculas. La AP aumenta su actividad cuando hay estrés por P en Daphnia (Elser et al., 2010; McCarthy et al., 2010; Wojewodzic et al., 2010). AP varía también con la estructura etárea, cantidad de alimento y deficiencia de nitrógeno, en cladoceros.

Reparación de adn Las RUV tienen efecto directo sobre el ADN. MECANISMOS: Fotoreparación: activada por ciertas longitudes de onda (320-400 nm) de la luz solar. (Fotoliasa). Reparación por Escisión de Nucleótidos: intervien varias enzimas que reparan ADN, y se activa por uso ATP.

objetivos Ver el efecto de la interacción de las RUV, Temperatura y Calidad de alimento en la actividad de la PA en Daphnia. Ver la capacidad de D. commutata para recuperarse luego de ser expuesta a estas variables.

4 tratamientos Diseño experimental 10°C 20°C P+ P- P+ P- UV P+ UV P- Control P+ Control P- Luz UV (350-380 nm) 4 tratamientos

Materiales y métodos Las mediciones de AP se realizaron en espectrofluorómetro Perkin-Elmer. Cinética de AP  Wagner y Frost, 2012 (modificado). Se utilizó cómo sustrato Metilumberiferil Fosfato (MUP). PA MUP MU

Materiales y métodos Los individuos fueron separados para su posterior medición de APA en 3 etapas. T0  Antes de irradiar con UV. T1  Inmediatamente después de la irradiación con UV. T2  12 hs después de la irradiación con UV (con 6hs de luz PAR + negra y 6 hs de oscuridad)

Resultados La actividad basal de los individuos luego de 7 días de aclimatación no presenta diferencias dentro de cada temperatura, pero si entre ellas.

resultados La rápida respuesta frente a las RUV a 10°C podría indicar una mejor temperatura para reparar el daño de forma inmediata. A 20°C los individuos crecieron más y la baja calidad de alimento no les permitiría reparar rápidamente. además que las RUV producen más daño a mayor temperatura (MacFadyen et al., 2004).

resultados A 10°C la disminución en la APA frente a RUV puede darse por haber reparado los daños inmediatamente luego de irradiar. A 20°C se ve un aumento en los tratamientos UV, principalmente en los tratamientos con adición de P. Que podría vincularse a altos requerimientos de P.

P-  850 y 1500 C:P P+  230 y 340 C:P 20°C DISCUSIÓN (McCarthy et al., 2010) 20°C P-  850 y 1500 C:P P+  230 y 340 C:P

CONCLUSIONES La APA se ve afectada de forma distinta frente a las 3 variables que se midieron. A 10°C parece haber menos daño por RUV y una respuesta Ez más rápida, tanto en estados nutricionales bajos cómo altos. A 20°C los efectos de las RUV son mayores ya que los individuos que tuvieron un buena calidad de alimento respondieron activamente frente a los daños producidos. En su ambiente D. commutata vive en un rango de 5 y 15°C, por lo que todavía no se verían tan afectados por las RUV. Por otro lado, resulta sumamente interesante realizar los mismos experimentos con relaciones de C:P intermedias. Estudiar EZ relacionadas con las ROS y la reparación de ADN.

GRACIAS