Streptococcus y Enterococcus Integrantes: Llira Bonilla Carmen Cabalceta Stephannie Montoya Lucía Obando Andrea Quesada Adriana Ruiz Teresita Solís

Clasificación Propiedades serológicas Grupos de Lancefield A-V Patrones de hemólisis Incompleta (α) Completa (β) Nula (γ) Propiedades bioquímicas

Clasificación de patógenos Clasificación serológica Microorganismo Patrones de hemólisis A S. pyogenes β B S. agalactiae C S. anginosus, S. equisimilis β o no hemólisis D S. bovis, Enterococcus spp. α,γ, β F, G S. anginosus -- S. pneumoniae α

Streptococcus Cocos Gram positivos Aerobios facultativos, algunos capnofílicos Catalasa negativos No móviles No tienen esporas

Streptococcus Agrupamiento en cadena en medios líquidos Crecimiento y la hemólisis se favorecen con 10% de CO2 a 35ºC Los cultivos “viejos” pueden ser Gram (-)

Manifestaciones Clínicas Streptococcus pyogenes: faringitis, amigdalitis, escarlatina, impétigo, secuelas no supurativas: fiebre reumática y glomerulonefritis Streptococcus agalactiae: meningitis en neonatos Streptococcus pneumoniae: principal causa de neumonía, sinusitis, meningitis y otitis media.

Enterococcus Cocos Gram positivos Catalasa negativos Aerobios facultativos Crecen en CTS NaCl 6,5% Algunos móviles

Enterococcus Agrupamiento en pares o cadenas Hidrolizan esculina en presencia de sales biliares Capaces de crecer a pH 9,6 Temperatura oscila 10°C - 45ºC

Enterococcus Enterococcus faecalis: 80 a 90% de aislamientos Enterococccus faecium: mayor incidencia como agente nosocomial y se han detectado cepas multirresistentes a antimicrobianos de uso común contra G+

Manifestaciones clínicas Endocarditis Infección de tracto urinario Mediastinitis: infección de herida postoperatoria a nivel del mediastino

Muestras clínicas Hisopados faríngeos Aspirado pleural Sangre LCR Exudado bronquial Muestra de oído medio Lesiones de piel

Pruebas de identificación Muestra Aislamiento y tinción de Gram Catalasa Hemólisis Resistencia a bacitracina Resistencia al optoquín Resistencia a SXT Factor CAMP Bilis esculina Crecimiento en CTS 6.5% NaCl

Tinción de Gram Streptococcus Enterococcus

Hemólisis En medios nutritivos enriquecidos con sangre o suero. Patrón de hemólisis Alfa hemólisis (parcial) H2O2 Beta hemólisis (completa) Estreptolisinas O y S Gamma hemólisis

Catalasa Para diferenciar Streptococcus y Enterococcus de Staphylococcus y Micrococcus

Resistencia a antibióticos Se realiza en agar sangre Bacitracina: cualquier halo permite considerar a la bacteria como Streptococcus pyogenes Optoquín: halo de inhibición de 14mm o más es presuntivo de Streptococcus pneumoniae. Trimetropín sulfa: Sensibles grupo C, F y G.

Prueba de CAMP Streptoccocus β-hemolíticos S. agalactiae (grupo B) Positiva

Prueba de Hidrólisis de Esculina Agar Bilis-Esculina Identificación presuntiva de grupo D y Enterococcus Hidrólisis de esculina: libera glucosa y esculetina Esculetina en presencia de Fe3+ forma complejo coloración negra cuando la prueba es positiva

Crecimiento en 6.5% NaCl Diferenciación de Streptococcus grupo D con respecto a Enterococcus: Enterococcus (+) Streptococcus grupo D (-)

Esquema de clasificación Cocos G+ + Staphylococcus - Streptococcus Enterococcus Catalasa Hemólisis β α γ Bacitracina Optoquín Bilis esculina S Grupo A (S. pyogenes) R CAMP S S.pneumoniae R Bilis esculina + 6.5%NaCl - Streptococcus No hemolíticos + Grupo B (S. agalactiae) - Bilis esculina + 6.5%NaCl - Grupo Viridans + Enterococcus spp. - Grupo D + 6.5%NaCl - Streptococcus β No A, B o D + Enterococcus spp. - Grupo D + Enterococcus spp. - Grupo D

Caso Clínico

Paciente femenino 72 años Mieloma múltiple 14 años Varias neumonías 24/04/09 Bolo de Dexametasona

04/05/09 Ingresa Síntomas y signos Tos Sensación febril Expectoración Adinamia 38°C Murmullo vesicular asimétrico Crepitaciones : mayor en pulmón derecho Sibilancias

Cefotaxima y Levofloxacina Infiltrado Paracardíaco derecho NEUMONÍA Cefotaxima y Levofloxacina

Hemograma Parámetro Resultado Valores normales Leucocitos 1500 cel/mm3 4.000 / 10.000 Neutrófilos 40% 40 – 70 Linfocitos 20% 20 – 40 Monocitos 4% 2 – 10 Plaquetas 69 000 cel/mm3 150.000 – 400.000 Hemoglobina 8.7 g/dL 14 – 18 Hematocrito 27% 41 – 51 Bandas 24% 5 – 15

Química Parámetro Resultado Valores normales Creatinina 2,4 mg/dL 0,7 – 1,5 Nitrógeno ureico 53 mg/dL 20 – 40 Na 127 mEq/L 135 – 145 K 4.5 mEq/L 3,5 – 5,0 Cl 104 mEq/L 100 – 106 Ca 7.9 mg/dL 8,5 – 10,5

Gases Parámetro Resultado Valores normales pH 7.43 7.35 - 7.45 PO2 49 mmHg 75 - 100 PCO2 33 mmHg 35 - 45 Saturación O2 79% 94 - 100 Bicarbonato 21 mEq/litro 21 - 26

Identificación Equipo Botella: Bact-Alert 3D Crecimiento Muestra = Sangre Botella: Bact-Alert 3D CTS +Carbón Equipo -Sistema agitación -Sensor de CO2 -Lecturas c/10 min Crecimiento [CO2] ANÁLISIS RESULTADO Antibioterapia Sí recibe Muestra clínica Sangre Tipo examen Hemocultivo Fecha recepción 04/05/09 Fecha finalización 06/05/09 28

Identificación 31 GRAM Cocos gram (+) Manitol Chocolate Agar Sangre Hemólisis Catalasa Optoquín 31

Identificación Aislamiento: Streptococcus pneumoniae VITEK 2 Y PSA Antibiótico Resultado Bencilpenicilina S Cefotaxima (Meningitis) Cefotaxima (No Meningitis) Ceftriaxona (Meningitis) Ceftriaxona (No Meningitis) Cloranfenicol Eritromicina R Levofloxacino Linezoid Moxifloxacino Ofloxacino Tetraciclina Trimetoprima/Sulfametoxazol Vancomicina

¿Qué hacemos si tenemos otro tipo de muestra?!! 33

Esputo o aspirado bronquial Gram G+ Sangre Chocolate Manitol* G- Mac Conkey 34

Al obtener crecimiento colonial realizar pruebas como: Catalasa Pruebas especiales como: Sensibilidad al Optoquín Sensibilidad a la Bacitracina 35

Si no hacemos previamente un gram, debemos montar en los siguientes medios: Agar Sangre Agar Chocolate Mac Conkey Agar Manitol Sal*** ***Importante correlacionar con la clínica e historia del paciente. (Staphylococcus aureus y algunos del grupo viridans) 36

Procedemos a montar la respectiva tarjeta para el VITEK 37

¿Cómo montar un LCR? Descripción de la muestra. Celularidad >10 Leucos Diferencial. Gram Cultivo BacT-Alert 3D

GRACIAS!!