ESTERILIZACION Y DESINFECCION Blgo. Victor Sanz Luna

ESTERILIZACION Es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida microbianas incluidas sus esporas, virus y viroides

ESTERILIZACION Métodos de esterilización Agentes físicos Agentes químicos

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR SECO Mecanismos de acción: Desnaturalización y coagulación de proteínas Oxidación de componentes vitales de la célula Efecto toxico por la alta concentración de electrolitos, como consecuencia de la deshidratación celular

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR SECO Métodos importantes: Flameado: es la exposición de un objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR SECO Métodos importantes: Incineración: destrucción de materiales contaminantes, especialmente material biológico Horno de alta temperatura: para esterilizar material de vidrio, metal, etc. Temperatura (°C) Tiempo de exposición mínimo (minutos) 160 120 170 60 180 30

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR HUMEDO Mecanismos de acción: Desnaturalización y coagulación de proteínas Daño en la membrana celular, afectando el paso de solutos al interior y salida de estas, principalmente aminoácidos y iones de K+ Daño en la respiración celular por daño en la membrana Daño en el inicio de síntesis de proteínas Autodegradación de ácidos nucleicos Es mucho mas eficaz que el calor seco debido a que las moléculas de agua desnaturalizan las proteínas de forma irreversible mediante rotura de las uniones de H entre los grupos peptídicos a T° relativamente bajas

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR HUMEDO Condiciones a tener en cuenta: Temperatura y tiempo Temperatura (°C) Tiempo de exposición mínimo (minutos 121 15 126 10 134 7

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR HUMEDO Condiciones a tener en cuenta: para el vapor de agua saturado, existe la siguiente equivalencia entre temperatura y presión: Presión (Kg/cm2) Temperatura (°C) 1.1 121 1.5 126 2.2 134

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR HUMEDO Métodos importantes: Autoclave: horno a presión. Se opera a 121°C y 15 lbs/pgda2 de presión durante 15 minutos. Se emplea para material resistente a esta temperatura y preparación de medios de cultivo.

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR HUMEDO Métodos importantes: Tindalización (esterilización intermitente): consiste en someter el producto a calentamientos intermitentes con vapor de agua producida mediante ebullición (100 °C) durante 20 minutos repitiendo el proceso por 3 o 4 ocasiones a intervalos de 24 horas. En los intervalos se mantiene al medio ambiente o a 37°C, las esporas germinan y las bacterias resultantes se hacen mas sensibles al calentamiento posterior. Se emplea en productos delicados que puedan alterarse a mayores temperaturas.

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS CALOR HUMEDO Métodos importantes: Ebullición: a temperatura de ebullición las formas vegetativas se destruyen en 10 minutos sin embrago las formas esporuladas requieren un tiempo de 30 minutos (esporas mesofilas) aunque hay algunas que resisten varias horas (esporas termofilas). La adición de carbonato de sodio al 2% aumenta el poder germicida de las esporas a solo 30 minutos.

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS RADIACIONES Tipos: Radiaciones de onda larga (no ionizantes) Radiaciones de onda corta (ionizantes)

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS RADIACIONES Radiaciones de onda larga Longitud de onda de 200 a 295nm Radiaciones ultravioletas: son absorbidas entre 240 a 280nm por los ácidos nucleicos causando: Formación de puentes covalentes entre pirimidinas Formación de dímeros de timidina (ciclobutano) Los dímeros cambian la forma del ADN, no hay apareamiento de bases se altera su replicación y síntesis. Se utiliza en la preparación de vacunas, cabinas de seguridad biológica, lugares de trabajo en laboratorios, etc.

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS RADIACIONES Radiaciones de onda corta: se dividen en 2 grupos: Radiaciones por partículas: rayos catódicos con electrones de alta energía Radiaciones electromagnéticas: rayos X, gamma y cósmicos Las más comunes son los rayos X (0.6 a 100nm) y los rayos gamma (0.1 a 14nm) Mecanismos de acción: Directo: lesionando ácidos nucleicos Indirecto: por la ionización del agua formando radicales OH- que es altamente reactivo con las macromoléculas y específicamente con el ADN Se les utiliza en procesos industriales, para esterilizar dispositivos quirúrgicos.

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS FILTRACION Mediante el uso de filtros (membranas y cartuchos de polímeros) y se emplea para esterilizar soluciones que no pueden ser esterilizadas por calor y para separar productos solubles de una bacteria como las toxinas

ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS FILTRACION Su eficiencia depende de muchos factores: El numero inicial de microorganismos Su tipo y composición El tamaño del poro del filtro: 0.22 m para bacterias, hongos y protozoos 0.1 y 0.025 m para partículas virales grandes (virus de la polio)

ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS Reaccionan con facilidad con grupos funcionales de los ácidos nucleicos y proteínas Oxido de etileno Formaldehido Glutaraldehido

ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS Oxido de etileno Gas inflamable y potencialmente explosivo Muy penetrante que inactiva a los microorganismos al sustituir los átomos de H lábiles por otros grupos (OH-, COOH, etc.) Técnica: el material se expone al 5-10% de oxido de etileno en CO2 a 50-60° en condiciones de humedad controlada durante 4 a 6 horas. después de su uso se debe someter a aireación debido a su carácter mutagenico. ejemplo: material termolábil (prótesis, catéteres, etc.)

ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS Formol o formaldehido: Gas soluble en agua que se utiliza al 40% (formalina) Usado en forma gaseosa y en cámara cerrada. Se emplea en esterilización hospitalaria y en industria farmacéutica

ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS Glutaraldehido: Se emplea sumergiendo el material limpio en una solución al 2% Esterilización de instrumentos ópticos y los utilizados en terapia respiratoria.

INDICADORES DE ESTERILIZACION Indicadores químicos Esterilización por calor seco, calor húmedo y por oxido de etileno Pueden ser: Internos: tiras impregnadas con una sustancia química reactiva Externos. Cintas control viraje autoadhesivas en forma de sellos impresos sobre bolsas

INDICADORES DE ESTERILIZACION Indicadores biológicos E. por calor húmedo: Bacillus stearotermophilus E. por calor seco: Bacillus subtilis (var. Niger) Oxido de etileno: Bacillus subtilis (var. Niger)

DESINFECCION Es el proceso que consiste en la destrucción, inhibición o eliminación de microorganismos que pueden causar enfermedad Asepsia: termino que se aplica a los procedimientos encaminados a prevenir o reducir la transmisión de microorganismos Desinfectantes: son agentes generalmente químicos que se utilizan normalmente con objetos inanimados. No esteriliza necesariamente un objeto porque pueden permanecer esporas y algunos microorganismos viables. Antisépticos: son agentes desinfectantes que se utilizan sobre superficies corporales con el fin de reducir la cantidad de flora normal y de contaminantes microbianos de carácter patógeno.

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS Su efectividad depende de muchos factores: La concentración del desinfectante El numero, tipo y ubicación del microorganismo La temperatura y el pH del tratamiento La presencia de material extraño como material orgánico u otras sustancia interferentes.

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS Compuestos inorgánicos Derivados de metales pesados (plata, mercurio, etc.). Su acción se debe a la formación de sales que se disocian con dificultad de los grupos sulfidrilos de las proteínas Nitrato de plata y derivados argenticos: buenos bactericidas. El nitrato de plata se ha utilizado en el tratamiento de quemaduras en solución al 0.5% y en profilaxis oftálmica contra N. gonorrhoeae. Derivados mercuriales: el mas usado es el mercuriocromo como desinfectante de la piel, no es toxico y sigue siendo activo en presencia de materia orgánica Agua oxigenada: agente oxidante de efecto fugaz (descompuesto por las catalasas de los tejidos). Se usa como antiséptico en concentración del 3% Permanganato de potasio: es poco utilizado. Agente oxidante que se inactiva en presencia de materia orgánica. Se emplea en dermatología por su propiedad antifungica. En solución acuosa al 1% y HCl al 1.1% destruye esporas del ántrax en 30 minutos

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS Compuestos inorgánicos Derivados clorados: agentes oxidantes muy usados en potabilización del agua en forma de Cloro gaseoso y como hipoclorito para descartar material biológico. Es de elección contra virus incluyendo hepatitis B. se inactiva en presencia de materia orgánica y corrosión de metales La cloramina es un antiséptico menos potente que el hipoclorito y mejor tolerada en la aplicación tópica. Derivados yodados: agentes oxidantes, se usan en forma de solución acuosa combinándolos con detergentes y materias orgánicas. El yodo es el antiséptico mas eficaz de piel, se usa en solución alcohólica del 2 al 5% para la aplicación tópica.

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS Compuestos orgánicos Alcoholes: desnaturaliza proteínas. Es de acción rápida pero se evapora con facilidad. El alcohol etílico se emplea como antiséptico al 70%. Su actividad es limitada contra micobacterias y no son esporicidas. Su efecto sobre virus es generalmente bueno. Fenoles: precipitan las proteínas. El hexaclorofeno y el fenol no se emplean por su toxicidad. Otros derivados fenolicos son los cresoles los que unidos a jabones originan compuestos estables. Clorohexidina: es un derivado fenolico que altera la permeabilidad de la membrana celular bacteriana. Tiene inactivación rápida y es bien tolerado por la piel. Se emplea en hospitales en forma de solución acuosa o alcohólica o asociada a detergentes no iónicos. Detergentes anionicos: como jabones y ácidos grasos, se disocian produciendo iones con carga negativa, causando alteraciones de la membrana celular. Acción buena contra bacterias gram positivas y casi nula contra bacterias gram negativas (por presencia del lipopolisacarido de la pared celular). Se puede mejorar combinándolos con desinfectantes u otras sustancias tensoactivas como laurilsulfato.

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS Compuestos orgánicos Detergentes cationicos: compuestos de amonio cuaternario. Tienen acción antiséptica, se inactivan en contacto con jabón, algodón y materia orgánica. Produce perdida de la permeabilidad de la membrana celular y permite la salida de compuestos nitrogenados y fosforilados y otras sustancias importantes. Glicoles: propilenglicol y etilenglicol. Se aplican por medio de unos aparatos llamados glicosatos o en forma de aerosoles para desinfección ambiental