Tema 8. Recombinación homóloga La recombinación entre moléculas duplexas de DNA implica intercambio recíproco de dos hebras simplexas, desplazamiento del punto de intersección y roturas A B Par de moléculas duplexas Modelo de Holliday a b Roturas en hebras homólogas Intercambio de hebras homólogas Desplazamiento del punto de intersección Roturas en las hebras intercambiadas Roturas en las hebras no intercambiadas Ligación Nuevo intercambio y ligación A B a b A b No recombinación pero aparecen regiones heteroduplexas Recombinación recíproca a B Tema 8. Recombinación homóloga

Tema 8. Recombinación homóloga La recombinación es iniciada por una doble rotura seguida de formación de extremos 3’ simplexos uno de los cuales migra a la molécula duplexa homóloga Modelo de doble rotura Doble rotura en molécula duplexa Producción de un hueco con extremos 3’ El extremo 3’ migra al otro duplex La síntesis desde 3’ desplaza una hebra La desplazada migra al otro duplex El hueco es reemplazado por la secuencia donadora Síntesis desde el otro extremo 3’ Migración recíproca. Se genera doble cruce Tema 8. Recombinación homóloga

Tema 8. Recombinación homóloga La nucleasa RecBCD se aproxima a una secuencia chi y degrada DNA conforme avanza. En el sitio chi realiza un corte, RecD se separa y queda sólo la actividad helicasa RecBCD se une a molécula duplexa rota Recombinación en E.coli RecBCD desenrolla y actua como exonucleasa RecBCD se detiene en chi y actua como endonucleasa RecD se disocia RecBC continua como helicasa Tema 8. Recombinación homóloga

Tema 8. Recombinación homóloga RecA promueve el intercambio entre una molécula parcialmente duplexa y otra duplexa intacta y produce una molécula intermediaria típica de recombinación Recombinación en E. coli La hebra simplexa inicia el intercambio La hebra desplazada aparea con su complementaria El intercambio se completa Tema 8. Recombinación homóloga

Tema 8. Recombinación homóloga Recombinación en E. coli RuvAB es un complejo asimétrico que promueve el desplazamiento del punto de intersección El tetrámero RuvA contacta con las cuatro hebras El hexámero RuvB se une como un anillo alrededor del DNA Desplazamiento Tema 8. Recombinación homóloga