Generalidades Histología

Células eucarióticas

Microscopía y Técnica histológica

Instrumentos de la Biología Celular Métodos de laboratorio: Cultivos, separación subcelular, etc. Microscopia: Microscopios Ópticos Microscopios Electrónicos

Estructura visualizada Unidad de medida Valos de la unidad Método de estudio Estructura visualizada Milímetros (mm) 10-3 m Ojo Órganos, Tejidos, Lupa Células grandes Micrómetro (µm) 10-6 m Microscopías ópticas Tejidos, Células Organoides grandes Nanómetro (nm) 10-9 m Microscopía Electrónica Componentes subcelulares Microscopía de Polarización Virus Macromoléculas Amstrong (Å) 10-10 m Estructura Moléculas 1mm = 1.000 µm = 1.000.000 nm = 10.000.000 Å

Microscopio COMPUESTOS SIMPLES Sistemas ópticos centrados “Es un instrumento que sirve para visualizar diversas estructuras que escapan al límite de resolución del ojo humano a través del aumento de los objetos observados” COMPUESTOS SIMPLES Sistemas ópticos centrados Una sola lente FOTÓNICOS ELECTRÓNICOS Lupa Microscopio Óptico Microscopio de Campo Oscuro Microscopio de Fluorescencia Microscopio de Polarización Microscopio de Contraste de Fases Microscopio de Interferencia Microscopio de Luz UV M.E.T. M.E.B.

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Técnica histológica Se basa en un conjunto de procedimientos que nos permiten estudiar y ver los tejidos y las células con mayor claridad cuando estamos frente el microscopio óptico. Este conjunto de procedimientos se puede realizar mediante la manipulación de tejidos vivos o de tejidos muertos.

Cultivo celular Es una importante herramienta para el estudio de poblaciones celulares vivas fuera del organismo. Se denomina cultivo in vitro (ya que se realiza en frascos de vidrio), y se puede clasificar en tres categorías, una es el cultivo de células, otra es el cultivo de tejidos y la otra es el cultivo de órganos.

Preparación de tejidos muertos Obtención de la muestra (biopsia o necropsia) Fijación: El objetivo de la fijación es detener los procesos celulares dinámicos con la mayor rapidez posible y mantener la estructura con las mínimas modificaciones posibles. Químicos: Formol – glutaraldehido – tetróxido de osmio. Físicos: Desecación – calor seco – frío.

Inclusión: - Deshidratación (con alcohol). - Aclaración (con xilol). - Inclusión propiamente dicha (parafina). Corte: De 5 a 15 micrones con micrótomo. Coloración: Se coloca el preparado en portaobjetos. - Se hidrata con pasos contrarios a inclusión. - Se colorea con hematoxilina y eosina. Montaje final: Se coloca cubreobjetos con pegamento.

Métodos Histoquímicos Mediante la histoquímica podremos obtener la localización de estructuras a nivel celular y se basa en utilizar distintas sustancias que tendrán una afinidad específica para la estructura que queramos localizar. Hematoxilina y Eosina: Componentes basófilos: ADN (cromatina o cromosoma), ARN (nucléolo y REG) y cartílago (por GAGs). Componentes acidófilos: el citoplasma celular (por las proteínas) y las mitocondrias (proteínas en la MMI).

Reacción de P. A. S: La sigla P. A. S Reacción de P.A.S: La sigla P.A.S. representa la reacción del ácido peryódico de Schiff. Mediante esta técnica podremos poner al descubierto hidratos de carbono (glucógeno), glucoproteínas, fibras reticulares, membranas basales y GAGs.

Coloración de grasas: Se usan sustancias coloreadas y solubles en grasa que se disuelven en lípidos. - Los colorantes más utilizados se denominan sudanes y hay varios tipos, el sudán rojo tiñe a los triacilgliceroles de los adipocitos, el sudán negro se usa para teñir las vainas de mielina de las fibras nerviosas, otros Sudanes son el Black y el amarillo, también se utiliza el aceite rojo O (no es un sudán). - Es importante aclarar que cuando queramos ver lípidos fijemos las muestras en formol y luego se realicen cortes por congelación.

Tejido epitelial

Generalidades El epitelio es un tejido avascular con poca sustancia intercelular compuesto por células que recubren las superficies externas del cuerpo, tapizan las cavidades internas cerradas y los tubos que comunican con el exterior (aparato digestivo, respiratorio y genito-urinario). El epitelio también forma la porción secretora (parénquima) de las glándulas y sus conductos excretores, y los receptores de algunos órganos sensoriales.

Características Están muy cerca unas de otras y se adhieren mediante uniones especiales. Presentan diferenciaciones de membrana (son diferentes) en sus superficies apical, lateral y basal. La superficie basal (la inferior) está fijada a una membrana basal. Está ricamente inervado pero no presenta vasos sanguíneos (es avascular). Está polarizado (siempre hay un polo basal que contacta con la membrana basal y un polo apical que está en contacto con la luz).

El epitelio recubre también las grandes cavidades internas del organismo (cavidad pleural, pericárdica y peritoneal), donde se denomina mesotelio. Además recubre la superficie interna libre de los vasos sanguíneos y linfáticos, donde se denomina endotelio. Se nutre por difusión simple desde tejido conectivo. Se renueva a partir de células basales (en contacto con MB) que sufren mitosis.

Clasificación de epitelios Epitelios de revestimiento Epitelios glandulares

Epitelio de revestimiento Los epitelios se clasifican en distintos tipos según la cantidad de capas celulares y la forma de las células de la capa más superficial, según la cantidad de capas celulares tendremos epitelios simples (una sola capa de células) o epitelios estratificados (dos o más capas). Según la forma podremos encontrar células planas, células cúbicas y células cilíndricas.

Epitelio simple Epitelio plano simple: está compuesto por una única capa de células planas, achatadas. Ejemplo: endotelio, mesotelio, parietal de Bowman y alvéolo pulmonar. Epitelio cúbico simple: vistas en un corte transversal las células son casi cuadradas, el núcleo es esférico. Ejemplo: epitelio cortical de ovario y túbulo renal. Epitelio cilíndrico simple: aquí las células son columnares, dado que son más altas que anchas, el núcleo es ovalado. Ejemplo: vesícula e intestino. Epitelio cilíndrico seudoestratificado: en este tipo de epitelio todas las células descansan sobre la membrana basal, pero no todas llegan hasta la superficie libre.

Epitelio estratificado Epitelio plano estratificado: el número de estratos varía, pero por lo general es muy grueso. Ejemplo: esófago, córnea, vagina y lengua. Epitelio cúbico estratificado: conformado por dos capas de células, presentando la capa superficial células cúbicas. Ejemplo: excretor de sudorípara. Epitelio cilíndrico estratificado: no tiene más de dos capas de espesor. Ejemplo: conductos en mama. Epitelio de transición: también llamado uroepitelio o polimorfo. Ejemplo: aparato urinario.

Membrana basal El epitelio se une al tejido conectivo subyacente por medio de la membrana basal, esta es una capa de espesor variable sobre la cual se encuentra la superficie basal de los epitelios. Es tan delgada que solo muy pocas veces puede verse en los preparados de rutina teñidos con Hematoxilina y Eosina (en preparados de tráquea y a veces vejiga).

Componentes de la MB La membrana basal se encuentra conformada por tres capas que se pueden identificar únicamente mediante la microscopía electrónica, a la capa que está en contacto con la región basal de la célula epitelial se la denomina lámina lúcida, luego encontraremos a la lámina densa y luego en contacto con el tejido conectivo subyacente encontraremos a la lámina reticular (con fibras reticulares). Al conjunto de la lámina lúcida más lámina densa se la denomina lámina basal.

Funciones de la MB Actúa como una estructura de fijación. Actúa como filtro molecular pasivo. Participa en las especializaciones de membrana (la región basal siempre descansa sobre lámina basal). En la cicatrización de heridas, la lámina basal actúa como capa se sostén para la migración de células. Influencian el metabolismo celular. Determina polaridad. Fija célula al tejido conectivo.

Tejido epitelial glandular A las glándulas las podemos definir como células epiteliales especializadas para sintetizar y secretar un producto específico. El tejido glandular se puede clasificar en endocrino o exocrino según si libera el producto secretado hacia el interior o hacia el exterior del organismo.

Forma de producir la secreción La secreción merocrina (mero = parte) es la que se lleva a cabo mediante la exocitosis, donde se libera el producto de secreción sin pérdida de membrana celular. La secreción apocrina se caracteriza por que una parte del citoplasma apical se libera junto con el producto de secreción, este tipo de secreción sólo ocurre en las glándulas sudoríparas apocrinas y en la glándula mamaria (donde la porción lipídica de la leche se libera por este tipo de secreción). En la secreción holocrina (holos = entero) se pierden células enteras que se destruyen en su totalidad, este mecanismos sólo se observa en las glándulas sebáceas cutáneas, donde las células se rompen y liberan el contenido de lípidos acumulados.

Clasificación morfológica de los adenómeros Tubular Acinosa Alveolar Túbulo glomerular

De acuerdo a la forma de los conductos Ramificadas: cuando el conducto excretor se encuentra ramificado, un ejemplo son las glándulas sebáceas de la piel. No ramificadas: cuando el conducto excretor es único y no es ramificado, ejemplos son las glándulas ubicadas en las criptas de Lieberkün en el tubo digestivo.

De acuerdo a la relación entre adenómeros y conductos Simples: cuando hay un solo adenómero para cada conducto excretor. Compuestas: más de un adenómero para cada conducto excretor.

De acuerdo a la relación entre adenómeros y conductos

Clasificación según el número de células Unicelulares: Caliciforme y mucíparas del estómago. Multicelulares: adenómeros o endocrinas.

Glándulas mixtas En este caso parte de la secreción se vierte al exterior del organismo, mientras la otra parte se vierte al interior (hormonas), son ejemplos de este tipo de glándulas el páncreas, los testículos y el hígado.