Diagnostico Bacteriológico de la Tuberculosis:

Presentación del tema: "Diagnostico Bacteriológico de la Tuberculosis:"— Transcripción de la presentación:

1 Diagnostico Bacteriológico de la Tuberculosis:
CULTIVO Salta, Noviembre 2015

2 CULTIVO Método de referencia por su precisión y especificidad para confirmar el diagnostico. Complementa a la baciloscopía

3  15 – 20% todos los casos de TB
APORTE  20 – 30% casos de TB pulmonar  variable para TB extrapulmonar

4 VENTAJAS Permite dar seguridad al resultados de BK +: hisopados, BAL.
Permite identificar especie por métodos bioquímicos. Importante en pacientes inmunodeprimidos : DESCARTAR MICOBACTERIOSIS Alta sensibilidad: 100% en muestras pulmonares (10 – 100 BAAR/muestra). Detecta BAAR viables  mejor método para demostrar curación del paciente al finalizar tratamiento. Permite realizar Prueba de Sensibilidad a drogas Es el Método de Referencia para evaluar todo nuevo método diagnostico

5 BAAR se multiplican cada 24 – 48 hs Gérmenes comunes cada 15 – 60 min
DESVENTAJAS Sensibilidad variable en TB EP. Tiempo: 20 – 60 días (en medios sólidos). BAAR se multiplican cada 24 – 48 hs Gérmenes comunes cada 15 – 60 min

6 Persistencia del bacilo en las muestras:
El tiempo es crítico en muestras con escasos BAAR y con PH acido (orinas, LG). Esputos: hay reproducción de flora contaminante que puede desnaturalizar la muestra. Sin embargo , en muestras con alto contenido de BAAR se han obtenido Cultivos (+ ) en muestras de 15 días de recogida (HELADERA) LUZ SOLAR CALOR (> 40ªC) DESECACION RESISTE A BAJAS TEMPERATURAS

7 USO SELECTIVO DEL CULTIVO
???

8 PARA DIAGNOSTICO

9 BK negativa de 3 muestras respiratorias
BK negativa de 3 muestras respiratorias Extrapulmonares (orina, líquidos de punción, sangre,biopsias, pus de cavidades abiertas) Muestras de niños Inmunosuprimidos, particularmente HIV y diabéticos. BK + en lavado gástrico, BAL, hisopados

10 Pacientes con antecedentes de tratamiento antituberculosos previo, especialmente si se registro abandono o fracaso. Contactos de casos con tuberculosis resistente Internados o trabajadores de instituciones de salud o comunidades cerradas donde se registran casos con TB – MR.

11 PARA CONTROL DE TRATAMIENTO

12 Pacientes con BK + en el control del 2º mes de tratamiento o en un control posterior (4º y 6º).
Casos diagnosticados con BK + y que convierten a BK + durante el tratamiento

13 METODOS…. MGIT 960 Método de Petroff.
Nuestro objetivo… Contamos con… MGIT 960 Se pueden sembrar todas las muestras, excepto sangre. Resultados tardan entre 4 y 13 días. Prueba sensibilidad a SIRE Método de Petroff. Método de Kudoh.

14 MÉTODO KUDOH OGAWA 1. Adherir a un hisopo estéril las partículas útiles del esputo.

15 NaOH 4 %  DECONTAMINACIÓN
MÉTODO KUDOH OGAWA 2. Sumergir en un tubo con 3 ml de NaOH 4% durante 2 minutos 2 min NaOH 4 %  DECONTAMINACIÓN

16 Máximo: 5 muestras MÉTODO KUDOH OGAWA
3. Frotar el hisopo sobre la superficie de 2 tubos por muestra Máximo: 5 muestras MUESTRAS BAAR POSITIVO PROCESAR ULTIMO (CONTAMINACION CRUZADA)

17 Tapar con algodón. Quemar tapón. Colocar tapa de goma. INCUBAR 37º C
MÉTODO KUDOH OGAWA Tapar con algodón. Quemar tapón. Colocar tapa de goma. INCUBAR 37º C 4. PROCESAR LAS MUESTRAS SIN DEMORA, EN EL MISMO DIA. CASO CONTRARIO REFRIGERAR

18 MÉTODO KUDOH OGAWA 5. LECTURA: 20, 30 y 60 dias

19 REGISTRO DE RESULTADOS
SI SE OBSERVA CONTAMINADO Todos los tubos contaminados NEGATIVO Sin desarrollo luego de la lectura a las 8 semanas de incubación Nº EXACTO DE COLONIAS Entre 1 y 19 colonias en el total de medios sembrados POSITIVO + 20 a 100 colonias POSITIVO ++ Mas de 100 colonias (separadas) POSITIVO +++ Mas de 100 colonias (confluentes)

20 MÉTODO KUDOH OGAWA Ventajas
Económico: no requiere Asparagina (Glutamato) Procedimiento de decontaminación y sembrado simple: NO REQUIERE CENTRIFUGACION No requiere equipamiento ni personal especializado Adecuado para laboratorios con poca infraestructura La muestra sembrada puede ser enviada a grandes distancias (refrigerada) Mayor cobertura al diagnostico

21 MÉTODO KUDOH OGAWA Desventajas
Sensibilidad: 96 % Porcentaje de contaminación: 10% No se aplica a muestras EP

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23 CULTIVO EN LA RED DE LABORATORIOS
Mayor dedicación del personal por cada muestra Entrenamiento en prácticas de mayor riesgo Equipos de mediano y alto costo Laboratorio espacioso, con direccionamiento y purificación de aire

24 RIESGO EN EL LABORATORIO DE TUBERCULOSIS
BAJO RIESGO Tareas administrativas Preparación y almacenamiento de materiales, reactivos MEDIO Ingreso de muestras Microscopia ALTO Procesamiento de muestras: BK, cultivo y PS Esterilización de material potencialmente infeccioso

25 Niveles de riesgo asociados con las actividades realizadas en el laboratorio
Cultivo en Kudoh (Petroff)

26 BACILOSCOPIA CULTIVO: KUDOH CULTIVO: PETROFF
Material viscoso, poca producción de aerosoles. Carga bacilar: baja 103 – 106 BAAR/ml Riesgo relativo de contraer TBC:1.4 (Población general:1.0) Alta generación de aerosoles Carga bacilar: alta Mas de108 BAAR/ml Riesgo relativo de contraer TB:7.8 Prueba de sensibilidad: 22

27 LABORATORIOS DE ALTO RIESGO
NIVEL III Manipulación de cultivos para: identificación pruebas de sensibilidad Alta carga bacilar (mas de 5 cultivos + al mes) El riesgo es máximo cuando se abren tubos donde ha desarrollado M. tuberculosis debido a la cantidad de gérmenes que contienen NUESTRO PROMEDIO: 20

28 DEBEN SER REALIZADAS EN LA CSB
1. Barrera de protección primaria Cabinas de seguridad biológica (CSB) PROTECCION: operador, producto y medio ambiente. Buenas prácticas de laboratorio CLASE II A2 EL PROCESAMIENTO Y DIGESTIÓN DEL ESPUTO Y LAS MANIPULACION DE LAS MUESTRAS DEBEN SER REALIZADAS EN LA CSB

29 2. Barrera de protección SECUNDARIA: proteccion del medio ambiente
UNIDIRECCIONALIDAD DEL FLUJO DE AIRE 6-12 CAMBIOS DEL VOLUMEN DE AIRE/HORA RECEPCION DE MUESTRA ANTESALA SECTOR CSB DUCTOS DE SALIDA DE CSB, PARA LOGRAR PRESION NEGATIVA

30 Decontaminación y eliminación de residuos
MATERIAL CONTAMINADO AL SECTOR AUTOCLAVES

31 3. MINIMIZAR LA GENERACIÓN DE AEROSOLES:
a. Centrífuga Centrífuga(s) de seguridad biológica (portatubos con tapa y desmontables) Preferentemente refrigerada Los portatubos son cargados y descargados dentro de la CBS b. Incinerador de ansas

32 4. Decontaminación y eliminación de residuos
Autoclave:  material limpio: 30 minutos a 121ºC, 1 atm  material sucio: 1 hora a 121ºC, 1 atm Estufa de esterilización: 2 horas 170 ºC (material de vidrio limpio)

33 En caso de no contar con autoclave u olla:
Olla a presión :  1 hora En caso de no contar con autoclave u olla: Lavandina al 1% :  al resto de las muestras, se tapa y se deja hasta el día siguiente para eliminarlo luego como desecho patógeno

34 5. USO DE DESINFECTANTES:
FENOL 5 % LAVANDINA 1% TIEMPO MINIMO DE CONTACTO 30 MIN Para muestras y todo lo que haya estado en contacto con ellas (aplicadores y derrames) (1 + 4 ) Para desinfección de superficies: mesadas LAVANDINA % Desinfección de pisos

35 EN RESUMEN Prácticas Equipamiento
El riesgo de infectarse con M. tuberculosis en Laboratorios de Alto Riesgo puede minimizarse mediante la adopción de medidas de seguridad que afectan: Prácticas Equipamiento Diseños de laboratorios (adecuados al riesgo) Vigilancia de salud Entrenamiento

36 CARGAR DERIVADOS POR SIVILA

37 AÑO 2013: 4.402 estudios realizados
PRESTACIONES A OTROS SERVICIOS (centros de salud, otros hospitales, interior, clínicas privadas, UNILAB, etc): AÑO 2013: estudios realizados AÑO 2014: estudios realizados CARGAS EN SIVILA AÑO Cargados por HSM-Laboratorio de TB Cargados por otros nodos como “derivados” 2013 232 2014 202 5