Integración de DNA en microorganismos: herramientas genéticas I

Presentación del tema: "Integración de DNA en microorganismos: herramientas genéticas I"— Transcripción de la presentación:

1 Integración de DNA en microorganismos: herramientas genéticas I

2 Integración de DNA exogeno en el genoma bacteriano
Recombinación homóloga Recombinación sitio-específica Recombinación ilegítima Transposición

3 Recombinación homóloga
Homologous pairing Resolution One-strand repair/replication

4 Recombinación homóloga: respuesta a DSB
3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ RecBCD

5 Recombinación homóloga: RecBCD y Chi
3’ 5’ RecBCD 3’ 5’ RecBCD Chi sites: E. coli 5’GCTGGTGG3’ B. subtilis 5’ACTGCG3’ L. lactis 5’GCGCGTG3’ RecA 3’ 5’

6 Recombinación homóloga: desplazamiento de hebra
3’ RecA 5’ RecA

7 Intermediario de Holliday
RuvABC A B A B RuvAB RuvC

8 Integrando DNA por recombinación homóloga
Integración tipo Campbell Conversión génica

9 Intercambio alélico marker marker

10 Resolución de secuencias en tandem
marker marker marker

11 Chi mejora el intercambio alélico
marker 3’ 5’ RecBCD

12 Genes marcadores de selección positiva y negativa
Production of levansucrasa in presence of 5% sacarosa es tóxica en Gram - sacBR (B.subtilis) Necesario para asimilar nitrato, tóxico en presencia de clorato nar1

13 Conversión génica Ab Ab

14 Conversión génica y Chi, haciendo más facil el trabajo

15 Conversión génica: para KOs y mas...
Ab X Ab X X Ab

16 Integración de DNA exogeno en el genoma bacteriano
Recombinación homóloga Recombinación sitio-específica Recombinación ilegítima Transposición

17 Recombinación específica de sitio

18 Estructura de una diana de SSR

19 SSR en acción

20 SSR en acción

21 SSR en acción

22 SSR en acción

23 Invertasas

24 Sistemas de variación de fase

25 Resolvasas/Integrasas

26 Estabilidad plasmidica, transposición...