Sistema de Identificación Microbiana

Presentación del tema: "Sistema de Identificación Microbiana"— Transcripción de la presentación:

1 Sistema de Identificación Microbiana
API

2 ¿Qué son las galerías API?
API® sistema miniaturizado y estandarizado de identificación, que asocia una galería de pruebas bioquímicas (10 – 20 sustratos) y una base de datos. (manual o digital). Fue creada en 1970, y con el tiempo la gama de galerías API se ha ido ampliando rapidamente, en colaboración con los grandes centros de referencia internacionales en USA, Japón, Australia y Europa…

3 SISTEMA DE IDENTIFICACIÓN MICROBIANA API
Identifica más de 550 especies de Bacterias (gram negativas y positivas) y 15 especies de Levaduras. Es una galería miniaturizada y estandarizada con una base de datos (Apiweb). Es un método de referencia mundial.

4 Enfoques Básicos MORFOLOGIA DE COLONIA (Idx. macroscópica)
COLORACION DE GRAM (Idx. Microcóspica) PRUEBAS BIOQUIMICAS (tradicionales o API) SEROLOGIA (pruebas de complemento)

5 TIPOS DE GALERIAS API 20E : BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES (Enterobacteriaceae): 108 especies

6 TIPOS DE GALERIAS API NE : BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES: 64 especies

7 TIPOS DE GALERIAS API STAPH: ESTAFILOCOCOS Y MICROCOCO: 23 especies

8 TIPOS DE GALERIAS API STREP: ESTREPTOCOCOS: 47 especies

9 TIPOS DE GALERIAS API NH: NEISSERIAS Y HAEMOPHYLUS: 11 especies

10 TIPOS DE GALERIAS

11 TIPOS DE GALERIAS API LISTERIA . 6 especies

12 TIPOS DE GALERIAS API CAMPYLOBACTER: 18 especies
API CORYNEBACTERIA: 42 especies API CH : 22 especies de Bacillus API CHE : 96 especies de Enterobacteriaceae API CHL : 52 especies de Lactobacillus API ANAEROBIOS : 67 especies API 20 C AUX: LEVADURAS:43 especies

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14 Principio La galería del sistema API 20 E se compone de 20 microtubos que contienen los sustratos deshidratados. Los microtubos se inoculan con una suspensión bacteriana que reconstituye los tests. Las reacciones producidas durante el período de incubación se traducen en cambios de color espontáneos o revelados mediante la adición de reactivos. La lectura de estas reacciones se lleva a cabo utilizando la Tabla de Lectura, y la identificación se obtiene con la ayuda del Catalogo Analítico o del software de identificación.

15 REACCIONES BIOQUIMICAS
OXIDACION FERMENTACION ASIMILACION HIDRÓLISIS DEGRADACION

16 Metodología Analítica
Materiales: Cultivo bacteriano (no mayor de 24 horas) en un medio nutritivo. Tubo con 5 mL de NaCl 0.85% Galerías API 20E: galería, y cámara de incubación. Reactivos API: TDA, JAMES, VP1+2, NIT1+2 Reactivo de Oxidasa Aceite de Parafina. Hoja de Resultados. Catálago Analítico o Software APIweb.

17 Metodología Analítica
Muestras (Recolección y Preparación) Aislamiento de V.alginolyticus en Agar TCBS en Agar NUTRITIVO La galería API 20 E no debe ser utilizada directamente a partir de muestras de origen clínico o de otro tipo. Los microorganismos a identificar deben aislarse en una primera fase sobre un MEDIO de cultivo adecuado según las técnicas usuales de bacteriología.

18 Metodología Analítica
Selección de la Galería

19 Metodología Analítica
Test de la Oxidasa Colocar una gota del reactivo de la oxidasa sobre el cultivo (no mayor de 24 horas) o con un palillo tomar una colonia sospechosa y colocar sobre papel filtro humedecido con reactivo. Color morado: OXIDASA (+)

20 Procedimiento 1. Preparación del inóculo

21 2. Llenado de la cámara de incubación con agua estéril (5 mL)

22 3. Colocar la galería API en la cámara de incubación.

23 4. Llenado de la galería API.
VP, GEL -- tubos y cúpulas ADH, LDC, ODC, H2S, URE – cúpula con aceite de parafina

24 5. Incubar la galería API a 36°C durante 18-24 horas
6. Hacer la Lectura de la galería remitiéndose a la TABLA DE LECTURA

25 Tabla de Lectura

26 Galería después de 24 hrs de incubación (Sin Reactivos)
TDA: 1 gota de Reactivo de TDA IND: 1 gota de Reactivo de James VP: 1 gota de Rtvo. VP1 + 1 gota Rtvo. VP2 Galería después de adicionar Reactivos

27 Ejemplos:

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29 Buscar en Catalogo Analítico
Hoja de Resultados VA001 Mx. De alimentos + + + + + - + - + + + + - - - - + - - + - 7 1 4 4 5 7 2 1+2+4 Escherichia coli Buscar en Catalogo Analítico O Api web (software)

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35 LA VOLUNTAD ES ALGO GRANDE PUES LA ACCION Y EL TRABAJO GENERALMENTE SIGUEN A LA VOLUNTAD Y CASI SIEMPRE EL TRABAJO SE ACOMPAÑA DE ÉXITO. ESTAS TRES COSAS TRABAJO, VOLUNTAD Y ÉXITO, LLENAN LA EXISTENCIA HUMANA. LA VOLUNTAD ABRE LA PUERTA AL ÉXITO, AMBOS BRILLANTES Y FELICES PASA ESTAS PUERTAS Y AL FINAL DEL VIAJE EL ÉXITO CORONA NUESTROS ESFUERZOS. LOUIS PASTEUR