RECUENTO LEUCOCITARIO Y SU DIFERENCIAL (FÓRMULA)

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1 RECUENTO LEUCOCITARIO Y SU DIFERENCIAL (FÓRMULA)

2 RECUENTO LEUCOCITARIO: EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO.
Actualmente, el recuento y la fórmula leucocitaria se obtienen mediante la conjunción de varios métodos de contaje. Entre ellos cabe destacar: Citometría de flujo. Impedancia o corriente directa (CD). Radiofrecuencia (RF). -Métodos citoquímicos, etc...

3 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:
CITOMETRÍA DE FLUJO:

4 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:

5 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:
ESCATERGRAMA: Eje de la X: intensidad de la dispersión lateral del haz luminoso. Da información del interior celular (como por ejemplo del tamaño del núcleo). Eje de la Y: intensidad de la dispersión frontal del haz luminoso. Da información del número de células y del tamaño celular.

6 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:
ESCATERGRAMA: Eje de la X: intensidad de la dispersión lateral del haz luminoso. Da información del interior celular (como por ejemplo del tamaño del núcleo). Eje de la Y: intensidad de la luz lateral fluorescente. Da información de la intensidad con que se ha teñido la célula.

7 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:
IMPEDANCIA:

8 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:

9 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:
ESCATERGRAMA: DC: cambios en la resistencia de la corriente directa. Da información del número de células y del tamaño celular. RF: cambios en la resistencia de radiofrecuencia. Da información de la densidad del interior celular.

10 RECUENTO LEUCOCITARIO EN EL ANALIZADOR AUTOMÁTICO:
Factores que pueden causar resultados erróneos del WBC en analizadores hematológicos: Aumentando el recuento de WBC: - Presencia de eritroblastos. - Agregados plaquetarios. - Eritrocitos no lisados (disproteinemias, alteraciones lipídicas o trastornos metabólicos). - Crioglobulinas. Disminuyendo el recuento de WBC: - Coagulación de la muestra.

11 RECUENTO LEUCOCITARIO: VALORES DE NORMALIDAD.

12 RECUENTO LEUCOCITARIO: LEUCOCITOSIS Y LEUCOPENIA.
Definición: “Aumento en el número de leucocitos de la sangre periférica (por encima de /mm3)”. Diccionario terminológico de ciencias médicas 13a Edición. Masson La cifra exacta a partir de la cual se consideraría la existencia de leucocitosis es un tema controvertido (¿>11.000/mm3?). Leucopenia: Definición: “Reducción del número de leucocitos en la sangre por debajo de 5.000”. Diccionario terminológico de ciencias médicas 13a Edición. Masson En este caso la cifra parece estar más consensuada considerándose leucopenia las cifras inferiores a 4.000/mm3.

13 RECUENTO LEUCOCITARIO: CAUSAS DE CONTAJE ELEVADO DE WBC.
En el estudio realizado en pacientes ingresados en nuestro hospital: La causa más frecuente de leucocitosis resultó ser el estrés fisiológico (parto o cirugía mayor p.e.). En segundo lugar las infecciones, fundamentalmente las respiratorias. En tercer lugar la necrosis o inflamación. En cuarto lugar la administración de fármacos: corticoides o G-CSF. La causa menos frecuente de leucocitosis resultó ser la hematológica, con sólo un caso.

14 RECUENTO LEUCOCITARIO: ¿LEUCEMIA?.
Un aumento del número de leucocitos trae a la mente cierta inquietud ante la idea de hallarse uno frente a una leucemia. Esta idea no es en modo alguno descabellada, pero conviene quizá establecer algunas acotaciones ante ella: Las leucemias agudas pueden caracterizarse por la aparición en sangre periférica de células indiferenciadas de origen neoplásico. En las crónicas tiene lugar, además de la proliferación, una acumulación de células mieloides o linfoides de aspecto, en general, más diferenciado, similares a las normales. Por otro lado, la leucemia aguda no siempre se acompaña de leucocitosis, y en algunas ocasiones se diagnostica incluso con leucopenia.

15 RECUENTO LEUCOCITARIO: REACCIONES LEUCEMOIDES.
DEFINICIÓN: Cuadros que presentan leucocitosis de más de leucocitos/mm3 , pero menos de ETIOLOGÍA: Sepsis : elevacion de la serie mieloide .  Neoplasias  con metástasis óseas.

16 RECUENTO LEUCOCITARIO: REACCIONES LEUCEMOIDES (RL).
DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL: plantean un diagnostico diferencial con las leucemias. Menos de leucocitos las RL. -Cromosoma Philadelphia ausente en la RL (sí en LMC). -Pueden presentar formas inmaduras perifericas, pero casi nunca blastos las RL. Granulación tóxica, vacuolas presentes en RL. Índice de fosfatasa alcalina granulocitaria generalmente alto en las RL. Estudios de medula ósea en casos dudosos.

17 RECUENTO LEUCOCITARIO: CAUSAS DE LEUCOPENIA.
Infecciones: tales como influenza, tifus, malaria, VIH, tuberculosis o sepsis. Enfermedades de la médula ósea. Esplenomegalia. Radiación. Medicamentos/productos químicos y disolventes: los medicamentos como Azatioprina que se administran en transplantados pueden causar leucopenia. Muchos de los medicamentos que se utilizan para tratar el cáncer pueden causar leucopenia también. Hipersensibilidad a varios medicamentos comúnmente usados. Déficit de vitamina B12 y/o folato. Enfermedades autoinmunes, etc..

18 RECUENTO LEUCOCITARIO: VARIACIONES FISIOLÓGICAS.
Edad y sexo: En el grupo de edades de 5 a 17 años, los varones presentan un número de leucocitos inferior a las mujeres (0,5 por 109/litro). El número total de leucocitos es más elevado en hombres mayores de 50 años que en mujeres de ese grupo. Asimismo, las cifras de eosinófilos y las de monocitos (tanto en valores absolutos como en relativos), también son más altos para hombres. Peso corporal: - Existe correlación positiva entre el peso corporal y el WBC. Asimismo también se correlaciona con el número de monocitos circulantes.

19 RECUENTO LEUCOCITARIO: VARIACIONES FISIOLÓGICAS.
Embarazo: La leucocitosis constituye un dato analítico habitual en un embarazo sin problemas; se debe mayoritariamente a un progresivo incremento de granulocitos. Sobre todo en el tercer trimestre. Tabaquismo: Aproximadamente 20 cigarrillos/día producen un aumento de leucocitos de 1000/mm3. El número de neutrófilos aumenta significativamente con el número de cigarrillos fumados al día. Leucocitosis postprandial: Durante la digestión aumenta el número de leucocitos circulantes en sangre periférica.

20 RECUENTO LEUCOCITARIO: IMPLICACIONES PRONÓSTICAS.
Significación pronóstica de la leucocitosis marcada en los pacientes hospitalizados: Un número de leucocitos igual o mayor que /mm3 con un porcentaje de neutrófilos igual o superior al 80%, tiene un considerable valor pronóstico cuando esa leucocitosis dura más de un día, ocurre en un paciente de edad avanzada y se da en ausencia de procedimientos invasivos, y todo ello a despecho de la enfermedad subyacente. Evaluación del riesgo de muerte hospitalaria de pacientes de UCI: Cuando el número de leucocitos es inferior a 1.000/mm3 existe un riesgo aislado de fallecimiento, aproximadamente de un 12%. No hay riesgo elevado, sin embargo, cuando el número de leucocitos está entre y ; y vuelve a presentarse el riesgo mortal –sólo de un 3%- cuando el número de leucocitos sobrepasa o iguala los /mm3.

21 RECUENTO LEUCOCITARIO: ¿CUÁNDO CONTACTAR CON EL CLÍNICO?.
En principio, habría que consultar con el hematólogo ante: Recuento leucocitario inferior a 1.000/mm3. Recuento leucocitario superior a /mm3. Se realizaría la consulta o el aviso, si el paciente no tuviera una patología congruente ya filiada por el clínico solicitante o por hematología (revisar previamente demográficos).

22 FÓRMULA: Fórmula manual versus análisis diferencial automatizado.
Problemas técnicos de las fórmulas leucocitarias hechas a mano: El Recuento Diferencial Leucocitario (RDL) realizado manualmente, supone el apercibimiento , recuento y clasificación de 100 leucocitos en una preparación teñida de sangre periférica. Dificultades del mismo: a) En principio, es usual la distribución irregular de los diferentes tipos de leucocitos en los extremos de la extensión de sangre periférica. - Las células más grandes y más densas (neutrófilos, monocitos) se quedan en la cola de la extensión. - Existe, en la parte central de la extensión, un exceso relativo de linfocitos. b) Puede ocurrir que haya un número insuficiente de células en la extensión, cuando existe leucopenia importante, para efectuar un RDL sobre 100 células.

23 Una consideración inicial: fórmula manual versus análisis diferencial automatizado.
c) En el RDL manual, se considera que existe una “variación”, debida al azar, de hasta un 15% en cada línea leucocitaria. d) Otra fuente de error es lo que se conoce como “fiabilidad del observador”; así, una importante variabilidad existe en la percepción de lo que constituye un “cayado”, o en la diferenciación entre un linfocito, linfocito atípico y un monocito. 2. Otras consideraciones estadísticas: Aún asumiendo que exista una distribución uniforme de leucocitos en la extensión de sangre periférica, dado que sólo se recuentan 100 células, existe una gran inseguridad potencial, sobre todo para los componentes menores del RDL. Ejemplo: en un paciente con leucocitos/mm3, el contar un basófilo entre los 100 leucocitos de la fórmula, nos haría encontrarnos ante una basofilia (110 basófilos/mm3). Si no “viéramos” este basófilo entonces el paciente tendría basofilopenia (0 basófilos/mm3). A más células contadas más seguridad. Los contadores automáticos realizan el RDL sobre leucocitos, luego sus RDL son considerablemente más fiables. No obstante, el estudio a microscopio es imprescindible en ocasiones para llegar al diagnóstico (células neoplásicas p.e.).

24 FÓRMULA LEUCOCITARIA: NEUTRÓFILOS.
PMN segmentados. Cayado.

25 FÓRMULA LEUCOCITARIA: NEUTRÓFILOS.
PMN polisegmentados (carencia de vitamina B12 p.e.).

26 CAUSAS DE NEUTROFILIA:
Neutrofilia aguda: Estímulos físicos: frío, calor, ejercicio, convulsiones, dolor, trabajo, anestesia, cirugía. Estímulos psicológicos: pánico, ira, estrés severo, depresión. Infecciones. Inflamación o necrosis tisular: quemaduras, shock eléctrico, traumatismos, infarto, gota, vasculitis, complejos antígeno-anticuerpo, activación del complemento. Fármacos, hormonas y toxinas: factores estimulantes de colonias, epinefrina, endotoxinas, glucocorticoides, fumar, vacunas, etc..

27 CAUSAS DE NEUTROFILIA:
Neutrofilia crónica: Infecciones persistentes. Inflamación: colitis, dermatitis, reacciones de sensibilidad a fármacos, gota, hepatitis, miositis, nefritis, pancreatitis, periodontitis, fiebre reumática, artritis reumatoide, vasculitis, tiroiditis, síndrome de Sweet. Tumores: gástrico, broncogénico, de mama, renal, hepático, pancreático, uterino y de células escamosas. Raramente en enfermedad de Hodgkin, linfoma, tumores cerebrales, melanoma y mieloma múltiple. Medicamentos, hormonas y toxinas: exposición continuada a sustancias que producen neutrofilia aguda, litio. Enfermedades metabólicas y endocrinológicas: eclampsia, tormenta tiroidea, sobreproducción de ACTH. Enfermedades hematológicas: rebote de agranulocitosis o terapia de anemia megaloblástica, hemólisis crónica o hemorragia, asplenia, enfermedades mieloproliferativas, leucocitosis crónica idiopática benigna. Enfermedades hereditarias y congénitas: síndrome de Down.

28 CAUSAS DE NEUTROPENIA:
Neutropenia secundaria: Secundaria a agentes infecciosos específicos: virus, incluyendo hepatitis viral, VEB, HIV-1. Bacterias, especialmente fiebre tifoidea, infecciones por Rickettsia, protozoos. Secundaria a sepsis o infección diseminada por micobacterias. Enfermedades autoinmunes del colágeno: LES, síndrome de Felty. Marasmo y Kwasiorkor. Hipotermia. Alcoholismo. Enfermedades hematológicas (neutropenia primaria): Mielodisplasia, neutropenia autoinmune, neutropenia tras quimioterapia o radiación, neutropenia cíclica, aplasia pura de la serie blanca, enfermedad linfoproliferativa T-gamma.

29 FÓRMULA LEUCOCITARIA: LINFOCITOS.
Linfocito en sangre periférica. Linfocito activado.

30 CAUSAS DE LINFOCITOSIS:
Linfocitosis primaria: Leucemias linfocíticas. Linfocitosis de células B de significado incierto. Linfocitosis de células B policlonales persistente. Linfocitosis reactiva: -Síndromes mononucleósicos. -Infección por Bordetella pertussis. -Linfocitosis persistente: enfermedades autoinmunes, cáncer, tabaquismo, inflamación crónica, hipoesplenismo, etc.. -Linfocitosis de estrés: colapso cardiovascular, fallo cardíaco, infarto miocárdico, shock séptico, inducido por fármacos, reaciones de sensibilidad, cirugía mayor, etc.

31 CAUSAS DE LINFOPENIA: Causas congénitas: Causas adquiridas:
Enfermedades de inmunodeficiencia congénita: inmunodeficiencia severa combinada, ataxia-telangiectasia, síndrome de Wiskott-Aldrich, etc.. Causas adquiridas: -Anemia aplásica. -Enfermedades infecciosas: virales (SIDA, hepatitis, gripe..), bacterianas (tuberculosis, fiebre tifoidea, neumonía, sepsis). -Iatrogénicas: agentes inmunosupresores, tratamiento a altas dosis con PUVA, quimioterapia antineoplásica, procedimientos de aféresis plaquetar, radiación, cirugía mayor.. -Asociadas a enfermedades sistémicas: enfermedades autoinmunes (artritis, LES, miastenia gravis, vasculitis sistémica, síndrome de Behçet), enfermedad de Hodgkin, carcinoma, enteropatía pierdeproteínas, fallo renal, sarcoidosis, daño térmico. -Nutricionales y dietéticas: abuso de etanol, deficiencia de Zinc. Causas idiopáticas: linfocitopenia idiopática de células T CD4+.

32 FÓRMULA LEUCOCITARIA: MONOCITOS.

33 CAUSAS DE MONOCITOSIS:
Enfermedades hematológicas: Alteraciones de las células hematopoyéticas: preleucemia, leucemia mieloide aguda (monocítica y mielomonocítica), leucemia mieloide crónica (idem), Policitemia Vera. Tumores Linfocíticos: leucemia linfocítica crónica, linfoma, enfermedad de Hodgkin, macroglobulinemia, mieloma múltiple. Histiocitosis. Anemia hemolítica. Púrpura trombocitopénica idiopática. Neutropenias crónicas: benigna familiar, cíclica, genética infantil, etc.. Postesplenectomía.

34 CAUSAS DE MONOCITOSIS:
Enfermedades inflamatorias y autoinmunes: Enfermedades del colágeno: AR, LES, arteritis de la temporal, miositis, poliarteritis nodosa. Enfermedades gastrointestinales: enfermedad alcohólica del hígado, colitis ulcerosa, enteritis regional, esprúe. Sarcoidosis. Infecciones: CMV,VVZ, endocarditis bacteriana subaguda, sífilis. Tumores no hemopoyéticos. Miscelánea: -Envenenamiento por tetracloroetano, histiocitosis de células de Langerhans, toma de glucocorticoides, parto, relacionado con medicamentos, depresión, administración exógena de citocinas, infarto de miocardio.

35 FÓRMULA LEUCOCITARIA: EOSINÓFILOS.

36 CAUSAS DE EOSINOFILIA:
Parásitos: protozoos, nemátodos, tremátodos, céstodos, artrópodos. Enfermedades alérgicas: asma, edema angioneurótico, urticaria y angioedema, enfermedad del suero, vasculitis alérgica, etc.. Dermatitis: psoriasis, eczema, dermatitis herpetiforme, pénfigo, ictiosis, pitiriasis rubra, etc.. Síndromes hipereosinofílicos: leucemia eosinófila, síndrome de Loeffler, endocarditis de Loeffler, enfermedad diseminada eosinofílica del tejido conectivo, poliarteritis nodosa. Enfermedades gastrointestinales: gastroenteritis eosinófila, colitis ulcerosa, enteropatía pierdeproteínas, enteritis regional, granulomatosis alérgica, etc.. Tumores: carcinomatosis, tumores epiteliales, tumores cerebrales, melanoma, micosis fungoide, enfermedad de Hodgkin y linfoma, leucemia aguda linfocítica, granuloma eosinófilo, enfermedades mieloproliferativas, etc.. Miscelánea: enfermedades del timo, hipoxia, diálisis peritoneal, enfermedad renal crónica, esplenectomía, convalecencia de enfermedad febril, neumonía, etc..

37 FÓRMULA LEUCOCITARIA: BASÓFILOS.

38 ENFERMEDADES RELACIONADAS CON ALTERACIONES SANGUÍNEAS DE LOS BASÓFILOS:
Basofilopenias: Ausencia hereditaria de basófilos. Glucocorticoides. Reacciones de hipersensibilidad. Hipertiroidismo. Basofilocitosis: -Alergias o inflamación: colitis, eritroderma, urticaria, AR, etc.. -Endocrinopatías: diabetes mellitus, administración de estrógenos, hipotiroidismo (mixedema). -Infecciones: influenza, sarampión, tuberculosis, etc.. -Deficiencia de hierro. -Neoplasias: leucemia basofílica, carcinoma, enfermedades mieloproliferativas (especialmente LMC, Policitemia Vera, metaplasia agnogénica mieloide, trombocitosis primaria)

39 FÓRMULA LEUCOCITARIA: LEUCEMIAS.

40 RECUENTO LEUCOCITARIO: INVERSIÓN LINFOCITOS/POLIMORFONUCLEARES.
Grupo etario Cifra leucocitos Promedio y rango Fórmula porcentual ± 10% Neutrófilos Linfocitos RN 1 año 2-5 años 6-12 años ( ) ( ) ( ) 8 000 ( ) 60 30 40 50

41 PROBLEMA: ES MUY SENSIBLE PERO POCO ESPECÍFICO.
FÓRMULA LEUCOCITARIA: ALARMAS DEL ANALIZADOR QUE PUEDEN SUGERIR LA NECESIDAD DE REALIZACIÓN DE UN FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA. -Blasts?: se esperaría encontrar mieloblastos en el frotis. Aparece cuando el analizador cuenta un 2% de mieloblastos o blastos no clasificables. Imm gran?: se esperaría encontrar en el frotis promielocitos, mielocitos y /o metamielocitos. Aparece cuando el autoanalizador encuentra al menos un 2% de promielocitos, mielocitos o metamielocitos en sangre. Left shift?: se esperaría encontrar cayados. Aparece cuando el número de cayados excede los 900/mm3 o el 6% y/o existe una proporción de neutrófilos mayor del 80%. Atypical/abnormal lymphocites/lymphoblasts: el número de linfocitos atípicos, células plasmáticas o linfoblastos excede de 700/mm3 y/o hay una proporción de linfocitos superior al 50%. PROBLEMA: ES MUY SENSIBLE PERO POCO ESPECÍFICO.