Actualización en Bacilos Gram- positivos aerobios, no esporulados de importancia clínica Marisa N. Almuzara Docente Facultad de Farmacia y Bioquímica.UBA.

Presentación del tema: "Actualización en Bacilos Gram- positivos aerobios, no esporulados de importancia clínica Marisa N. Almuzara Docente Facultad de Farmacia y Bioquímica.UBA."— Transcripción de la presentación:

1 Actualización en Bacilos Gram- positivos aerobios, no esporulados de importancia clínica Marisa N. Almuzara Docente Facultad de Farmacia y Bioquímica.UBA Jefe de Unidad Bacteriología. Hstal Eva Perón. San Martín

2 Bacilos gram-positivos aerobios Bacterias corineformes: Comprenden bacilos gram-positivos irregulares aerobios, no esporulados, no ácido resistentes.Bacterias corineformes: Comprenden bacilos gram-positivos irregulares aerobios, no esporulados, no ácido resistentes. Además de Corynebacterium, incluye muchos otros géneros relacionados.Además de Corynebacterium, incluye muchos otros géneros relacionados. Bacilos gram-positivos regulares: Bacillus, Listeria, Lactobacillus, Erysipelothrix, KurthiaBacilos gram-positivos regulares: Bacillus, Listeria, Lactobacillus, Erysipelothrix, Kurthia

3 Actinomicetos aerobios: Dos grupos:Actinomicetos aerobios: Dos grupos: - AR ( Nocardia, Rhodococcus, Mycobacterium, Gordonia, Tsukamurella) - No AR - No AR Incluye géneros anaerobios que contienen algunas especies aerotolerantes: Clostridium tertium.Incluye géneros anaerobios que contienen algunas especies aerotolerantes: Clostridium tertium. Bacilos gram-positivos aerobios

4 Bacilos gram positivos Identificación Pruebas de 1° línea q Gram q Catalasa q Metabolismo q Lipofilicidad q Pigmento q Hemólisis

5 Bacilos gram positivos aerobios  Corynebacterium y géneros relacionados  Propionibacterium spp  Bacillus  Listeria*  Kurthia  Actinomicetos aerobios  Lactobacillus  Erysipelothrix  Actinomyces *  Arcanobacterium  Gardnerella  Actinobaculum  P. propionicum  Bifidobacterium  Clostridium spp (especies aerotolerantes) Catalasa * Existen excepciones +-

6 Corynebacterium especies ¨Lipofílicos¨ qLa determinación del carácter lipofílico constituye un ¨requisito esencial¨ para la caracterización de las especies de Corynebacterium qSe puede definir una corinebacteria como lipofílica cuando su crecimiento es frecuentemente estimulado en medios que contienen una cantidad significativa de lípidos (Tween 80 o suero 0.1 al 1%) qLas corinebacterias lipofílicas ¨crecen¨ en la mayoría de los medios, tales como agar sangre, pues éstos contienen pequeñas cantidades de lípidos, pero las colonias son puntiformes y a veces se requiere de 48-72 hs. para visualizarlas. qAlgunas especies (C. accolens) o cepas de Corynebacterium lipofílicos pueden mostrar satelitismo sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus

7 Microorganismos corineformes q No Lipofílicos-Fermentadores q No Lipofílicos-No Fermentadores q Lipofílicos

8 C orynebacterium spp Caracteres culturales C. diphtheriae: (C. mitis, C. gravis, C. belfanti) C. afermentans ss afermentans C. amycolatum C. xerosis C. pseudodiphtheriticum C. minutissimum C. striatum C. glucuronolyticum Fácil desarrollo o no lipofílicos (colonia > 0.5 mm) Lento desarrollo o lipofílicos (colonia < 0.5 mm) Estimulan el crecimiento (suero conejo 0.1%; Tween 80 0,1-1%) C. jeikeium C. urealyticum C. afermentans ss lipophilum C. accolens C. CDC grupo G C. CDC grupo F1 C. macginleyi C. diphtheriae ss intermedius

9 Corynebacterium spp, géneros relacionados y otros OerskoviaExiguobacteriumMicrobacteriumCellulomonasL.aquaticumMicrobacteriumNocardia Rhodococcus equi C. minutissimum C. striatum C. xerosis C. pseudodiphtheriticum Corynebacterium nigricans AureobacteriumNocardia Brevibacterium A. odontolyticus (rojo) Amarillo Anaranjado-rojo Rosa-salmón Tostado Negro + PIGMENTO

10 Pruebas fisiológicas y bioquímicas útiles para la caracterización de bacilos gram-positivos aerobios qCatalasa qLipofilicidad- sólo si las colonias miden < 0.5 mm de diámetro - AS con Tween 0.1-1% - TSI con Tween 0.1-1% - (catalasa para las corynebacterias lipofílicas) qOxidación-Fermentación- TSI - OF - CTA qCAMP (S. aureus ATCC 25923)- Estimulación - Inhibición qUtilización de H. De Carbono- Andrade (metabolismo fermentativo) - CTA - Caldo rojo-fenol - Pastillas qUreasa-gelatinasa-DNAsa-FAL-PYZ-PYR-Esculina-LDC-ODC-Nitratos- Movilidad: métodos convencionales

11 Metodología empleda en la identificción de microorganismos coreniformes  Caracterización fenotípica 1) Métodos convencionales 2) Métodos rápidos - API (RAPID) Coryne Freney y col. (98% concordancia) - Biolog System Lindenmann (60% concordancia) - Sustratos fluorogénicos Kampfer  Investigación quimiotaxonómica (Reservados para laboratorios de referencia) - Análisis de la pared celular - Análisis de ácidos grasos celulares (CFA) Sherlock system (MIDI) Sherlock system (MIDI) - Cromatografía líquida alta performance (HPLC) (ác. micólico) (ác. micólico)  Técnicas moleculares - 16 S DNA ribosomal - PCR

12 Correlación entre el método de identificación API-CORYNE y el convencional Identificación correctaIdentificación correcta con pruebas adicionalesIdentificación incorrectaa A. haemolyticum642 Arthrobacter spp11227 Aureobacterium spp413 Brevibacterium spp321 C. afermentans10172 C. amycolatum14410 Corynebcterium CDC grupo F22 C. jeikeium422 C. propinquum22 C. striatum77 C. urealyticum16 C. xerosis88 C. macginlenyi321 C. pseudodiphtheriticum12831 Dermabacter hominis12 Leifsonia aquatica321 Listeria monocytogenes211 Microbacterium spp8521 Propionibacterium acnes11 Rhodococcus equi927 Rhodococcus spp6132 Total14383 (58%)44 (31%)16 (11%)

13 Patógenos oportunistas  C. pseudodiphtheriticum  C. urealyticum (D2)  C. jeikeium (JK)  R. equi  C. striatum  C. amycolatum Infectan individuos no comprometidos (patógenos primarios) (patógenos primarios)  C. diphtheriae  C. ulcerans  C. pseudotuberculosis  A. haemolyticum  C. minutissimum Patógenos en animales  C. renale  C. bovis  A. pyogenes  R. equi  C. kutscheri  C. cystitidis Corynebacterium spp

14 Especies de Corynebacterium y Géneros relacionados cuyo habitat natural es el hombre  C. diphtheriae Nasofaringe - piel  C. striatum Piel  C. pseudodiphtheriticum Nasofaringe - piel  C. jeikeium Piel  C. minutissimum Piel  C. matruchotii Cavidad oral humana y primates  C. urealyticum (D2) Piel  C. afermentans Piel  C. amycolatum Piel  C. xerosis nasofaringe, piel y conjuntiva?  Dermabacter hominis Piel  Arcanobacterium haemolyticum Piel – nasofaringe?

15 Especies de Corynebacterium y Géneros relacionados cuyo habitat natural es diferente al hombre  C. ulcerans Vaca (mastitis), caballo  C. pseudotuberculosis Cabra, oveja, caballo  C. kutscheri Roedores  C. Grupo renale (C. renale - Vacas (infecciones genitourinarias) C. pilosum - C. cystitidis) C. pilosum - C. cystitidis)  C. bovis Vaca (ubre)  C. aquaticum Agua natural y destilada  Rhodococcus equi Suelo con estiércol - neumonía necrotizante en potros  Aureobacterium spp Suelo- ambiente  A. pyogenes Vacas - ovejas (infecciones cutáneas piógenas)  Oerskovia spp Suelo, materia de descomposición de las plantas, geles de hidróxido de Al  Artrhobacter spp Suelo - ambiente

16 Infecciones por Corynebacterium y organismos relacionados  Inmunosupresión y neutropenia  Cateterismo  Interrupción de las barreras muco-cutáneas Hemodiálisis Hemodiálisis  IRC DPAC DPAC  Tratamiento antibiótico (cepas multirresistentes)  Otras maniobras invasivas  Prótesis cardíacas, osteoarticular, ¨shunt¨ V-P

17 Corynebacterium spp con metabolismo fermentativo no lipofílicos

18  C. CN-1 (pigmento negro)  C. ulcerans  C. pseudotuberculosis  C. falsenii  C. imitans  C. glucuronolyticum  C. matruchotii  C. durum  C. striatum  C. coyleae  C. amycolatum  C. sundvallense  C. thomssenii  C. singulare  C. confusum  C. argentoratense  C. minutissimum  C. xerosis  C. simulans gravis mitis belfanti Especies del género Corynebacterium con metabolismo fermentativo, no lipofílicos  C. diphtheriae ss

19 Escasos reportes de infección en la literatura. Infección de herida post quirúrgica esternal. Riche et al. 1989. Presse Med 18: 1033-1034 Vanbosterhout et al. 1992. Eur J. Clin Microbiol Infect. Dis. 11: 628-631: 3 casos de infecciones oportunistas 1) Hemocultivo de paciente oncohematológico 2) Hemocultivo + fístula de pseudoaneurisma 3) Líquido peritoneal de paciente con peritonitis (DPCA) Habitat: piel Colonia seca, blanco-grisácea, cerosa Colonia seca, blanco-grisácea, cerosa O129 R O129 R Multiresistente (solo S a glucopéptidos y tetraciclina) Multiresistente (solo S a glucopéptidos y tetraciclina) Corynebacterium amycolatum Especie de Corynebacterium no lipofílico más frecuentemente aislada en clínica

20 Corynebacterium xerosis Habitat: piel, nasofaringe saco conjuntival saco conjuntival Mayoría de los reportes en la literatura fueron C. striatum o C. amycolatum fueron C. striatum o C. amycolatum Colonia amarillenta, seca, granular Colonia amarillenta, seca, granular O129 S O129 S Tirosina - Tirosina - Multisensible Multisensible Escasos reportes de infecciones en la literatura - Infección de shunt V-P en un infante. Pediatr Infect Dis 1993. 12: 536-538 12: 536-538 - Artritis séptica post cirugía vascular. Rev. Infect. Dis. 1991. 13: 548-549. 13: 548-549. - Osteomielitis vertebral 1989. J. Clin. Microbiol. 27: 2869-2870 - 4 casos de endocartidis asociadas a: drogadicción Neumonía y pericarditis Cirrosis alcohólica - Infección de pseudoquiste pancreático en paciente alcohólico. Wood. 1993. CID 17: 934-935 Wood. 1993. CID 17: 934-935 - PBE en paciente alcohólico. Vettese et al. 1993. CID 17:815

21 Endocarditis de válvula nativa y protésicaEndocarditis de válvula nativa y protésica Bacteriemia en pacientes inmunocomprometidos (SIDA, neutropenia)Bacteriemia en pacientes inmunocomprometidos (SIDA, neutropenia) Infecciones del tracto respiratorioInfecciones del tracto respiratorio Aislado de catéter venoso central, líquido peritoneal, heridas, orina, conjuntiva, útero y placenta (RPM)Aislado de catéter venoso central, líquido peritoneal, heridas, orina, conjuntiva, útero y placenta (RPM) Habitat: piel y narinas Habitat: piel y narinas Transmisión nosocomial Transmisión nosocomial S// peni, cefalosp., Imi, glicopéptidos R// macrólidos, clinda, tetra, rifa, cipro V// genta Colonia lisa y Colonia lisa y cremosa ~ SCN cremosa ~ SCN TyR + TyR + O129 S O129 S CAMP V CAMP V Corynebacterium striatum

22 Eritrasma (discutido, proceso polimicrobiano) Escasos reportes de otras infecciones: 1 caso de peritonitis en DPCA 1 caso de peritonitis en DPCA 1 caso de septicemia fatal en un paciente con leucemia mieloide 1 caso de septicemia fatal en un paciente con leucemia mieloide 3 casos de bacteriemia 3 casos de bacteriemia 1 caso de endocarditis en un paciente con prolapso 1 caso de endocarditis en un paciente con prolapso de válvula mitral de válvula mitral 1 caso de absceso de mama en una mujer de 42 años 1 caso de absceso de mama en una mujer de 42 años Habitat: piel Habitat: piel ATB: Variable: ßlactámicos, macrólidos, clinda, genta, rifa, cipro clinda, genta, rifa, cipro Sensible: glucopéptidos Resistente: tetraciclina Colonia lisa, húmeda Colonia lisa, húmeda y brillante y brillante O129 S O129 S Dnasa + Dnasa + TyR + TyR + CAMP - CAMP - La mayoría de las cepas Corynebacterium minutissimum

23 Características diferenciales de C. striatum, C. xerosis, C. amycolatum y C. minutissimum ColoniaO129TyRDnasaCAMPMaltosaATB  glucosidasa NO3 C. striatum Cremosa (≈ SCN) S+-V-Variable-+ C. xerosis Seca y amarillentaS---+ Multi S// +V C. amycolatum Seca, blanco- grisácea, cerosa R---V Multi R// -V C. minutissimum CremosaS++-VVariable--

24 Infecciones genito-urinarias en hombres: Prostatitis y uretritis Habitat: flora del tracto genitourinario masculino Presencia en mujer: incierta ATB: S// bL, rifa, genta, glucopéptidos R// quinolonas, tetra y mino (a menudo), macrólidos, clinda (siempre) Colonias blanco-amarillentas lisas y convexas Colonias blanco-amarillentas lisas y convexas  GUR +  GUR + CAMP + CAMP + Urea +/- (rápida 5 minutos) Urea +/- (rápida 5 minutos) Esc V Esc V Lap + (≠ C. renale IGU en animales) Lap + (≠ C. renale IGU en animales) Corynebacterium glucuronolyticum (C. seminale)

25 Corynebacterium del grupo diphtheriae C. diphtheriae Urea - CAMP - C. ulcerans Urea + CAMP inversa + Glucógeno + Pyrazinamidasa - Pueden albergar el gen de la toxina diftérica C. pseudotuberculosis Urea + CAMP inversa + Glucógeno -

26 Corynebacterium del grupo diphtheriae C. diphtheriae Infección localizada (TRS) Efectos sistémicos por la toxina (corazón, SNC, riñones) Cepas toxigénicas difteriaCepas toxigénicas difteria Cepas no toxigénicassepsis, artritis séptica,Cepas no toxigénicassepsis, artritis séptica, osteomielitis, absceso cerebral, endoftalmitis crónica, endocarditis

27 Corynebacterium del grupo diphtheriae Mastitis en ganadoMastitis en ganado Faringitis (  difteria) con compromiso cardíaco o del SNC en personas expuestas a ganado o a sus productos (ingestión de leche cruda). Cepas no toxigenicas: granulomas necróticos y nódulos pulmonares en pac inmunocompetentesFaringitis (  difteria) con compromiso cardíaco o del SNC en personas expuestas a ganado o a sus productos (ingestión de leche cruda). Cepas no toxigenicas: granulomas necróticos y nódulos pulmonares en pac inmunocompetentes C. ulcerans Infecciones en ganado: linfadenitis supurativa, abscesos y neumoníaInfecciones en ganado: linfadenitis supurativa, abscesos y neumonía Infecciones en humanos son infrecuentes  linfadenitis granulomatosa supurativa post contacto con animales y su piel o sus productos (lecha cruda)Infecciones en humanos son infrecuentes  linfadenitis granulomatosa supurativa post contacto con animales y su piel o sus productos (lecha cruda) C. pseudotuberculosis

28 Bacilos gram positivos con metabolismo fermentativo  Actinomyces spp  Dermabacter hominis  Propionibacterium spp  Rothia dentocariosa  Arcanobacterium spp  Gardnerella vaginalis Géneros y especies relacionados  Oerskovia spp  Microbacterium spp  Cellulomonas spp  Exiguobacterium acetylicum PigmentoPigmento amarilloamarillo Otros Géneros  Listeria spp  Lactobacillus spp  Erysipelothrix rhusiopathiae  Bacillus spp

29 Dermabacter hominis Pruebas claves qBGP cocoide qOlor espermático qMetabolismo fermentativo qEsculina (+) qLDC (+) ODC (+) qPyR (+) qFAL (+) qNitrato (-)

30 Dermabacter hominis Diferenciación con otros bacilos gram positivos, catalasa (+), metabolismo fermentativo, esculina (+) Colonia (Gram/tipo) PyRNitratoCAMPLactosaOtros Rothia dentocariosa BGP filam/rug, adh ++-- Manitol – PIZ + FAL – Cto. Aerob>anaerob C. matruchotii BGP filam/rug, adh -+-+ Hipurato + C. durum BGP filam/rug, adh -+-- Manitol + Aglu - P. avidum BGP dift/lisa --+- B hemólisis FAL - Cto. Anaerob>aerob A. viscosus BGP dift/lisa -+-+ Cto. Anaerob>aerob Hipurato - D. hominis Cb +/lisa +--+ Olor espermático LDC y ODC + FAL + PIZ -

31 Rothia dentocariosa Habitat: orofaringe humana y animales Patología: qCaries dental qEnfermedad periodontal qAbscesos (maxilar, cerebral, pilonidal, dental) qNeumonía en pacientes inmunocomprometidos Endocarditis

32 Rothia dentocariosa Pruebas claves q Metabolismo fermentativo q BGP con ramificaciones rudimentarias q No micelio aéreo q Kinyoun y Ziehl-Neelsen (-) q Esculina (+) q Nitrato (+) q PyR (+)

33 Rothia dentocariosa Diferenciación con otros bacilos gram positivos, catalasa (+), metabolismo fermentativo, esculina (+) Colonia (Gram/tipo) PyRNitratoCAMPLactosaOtros Rothia dentocariosa BGP filam/rug, adh ++-- Manitol – PIZ + FAL – Cto. Aerob>anaerob C. matruchotii BGP filam/rug, adh -+-+ Hipurato + C. durum BGP filam/rug, adh -+-- Manitol + Aglu - P. avidum BGP dift/lisa --+- B hemólisis FAL - Cto. Anaerob>aerob A. viscosus BGP dift/lisa -+-+ Cto. Anaerob>aerob Hipurato - D. hominis Cb +/lisa +--+ Olor espermático LDC y ODC + FAL + PIZ -

34 Rothia dentocariosa Sensibilidad antibiótica Sensible Penicilina (ATB de elección) AmpicilinaAMS Cefalosporinas 3° ImipenemRifampicinaEritromicinaCloranfenicolVancomicinaVariableAminoglucósidosQuinolonasClindamicinaTMS

35 CASO CLÍNICO Almuzara M, Mariñansky A, Valenzuela A, Vay C. Enf Infecc Microbiol Clin, 2004.  Paciente de sexo femenino, 22 años.  Ingresó por fiebre las últimas 48 hs., astenia y deterioro del sensorio. Presentó púrpura en tronco y extremidades y rigidez de nuca.  Tx cerebral: hemorragia subaracnoidea e hipodensidades compatibles con embolia (confirmado con RM).  Se tomaron 2 hemocultivos (Bactec) y LCR.  Dx presuntivo: meningitis meningocóccica.  Tratamiento: Ceftriaxona 4 g/día IV.  Paciente de sexo femenino, 22 años.  Ingresó por fiebre las últimas 48 hs., astenia y deterioro del sensorio. Presentó púrpura en tronco y extremidades y rigidez de nuca.  Tx cerebral: hemorragia subaracnoidea e hipodensidades compatibles con embolia (confirmado con RM).  Se tomaron 2 hemocultivos (Bactec) y LCR.  Dx presuntivo: meningitis meningocóccica.  Tratamiento: Ceftriaxona 4 g/día IV.

36 RESULTADOS DEL LCR  Gram: no bacterias.  Tinta China: negativa.  Antígenos: neumococo, meningococo, HIb, Cryptococcus neoformans, negativos.  Cultivo: negativo.  Gram: no bacterias.  Tinta China: negativa.  Antígenos: neumococo, meningococo, HIb, Cryptococcus neoformans, negativos.  Cultivo: negativo.

37 OTROS ESTUDIOS DIAGNÓSTICOS  Electrocardiograma transesofágico: prolapso de válvula mitral - vegetaciones de gran tamaño en valva anterior mitral sin absceso anular.  Ecodoppler: insuficiencia mitral.  Diagnóstico: endocarditis de válvula nativa.  Electrocardiograma transesofágico: prolapso de válvula mitral - vegetaciones de gran tamaño en valva anterior mitral sin absceso anular.  Ecodoppler: insuficiencia mitral.  Diagnóstico: endocarditis de válvula nativa.

38 RESULTADOS  Agar sangre atmósfera 5% CO 2 24 hs.: desarrollo de pátina visible. Colonias definidas a las 48 hs. blanquecinas.  Beta hemólisis: negativa.  Catalasa: positiva.  TSI: ácido.  Lipofilicidad: negativa.  Agar sangre atmósfera 5% CO 2 24 hs.: desarrollo de pátina visible. Colonias definidas a las 48 hs. blanquecinas.  Beta hemólisis: negativa.  Catalasa: positiva.  TSI: ácido.  Lipofilicidad: negativa.

39 Propionibacterium spp BGP no esporulados BGP no esporulados Anaerobios facultativos con aerotolerancia variable Anaerobios facultativos con aerotolerancia variable Células con forma bífida o ramificada (no Células con forma bífida o ramificada (no filamentos), dispuestas en forma única, pares, filamentos), dispuestas en forma única, pares, cadenas, con disposición de letras chinas (V, Y) cadenas, con disposición de letras chinas (V, Y) No móviles No móviles Metabolismo fermentativo Metabolismo fermentativo Usualmente catalasa + (P. propionicum es catalasa -) Usualmente catalasa + (P. propionicum es catalasa -) Habitat: piel humana, intestino, boca, conjuntiva ATB: R// metronidazol, aminoglucósidos S// vancomicina, beta lactamicos Factores predisponentes: Presencia de cuerpo extraño Presencia de cuerpo extraño Inmunosupresión Inmunosupresión Cirugía previa Cirugía previa Trauma Trauma Diabetes Diabetes Obstrucción de senos o Obstrucción de senos o conductos conductos

40 Propionibacterium spp Infecciones: Endocarditis de válvula protésica Endocarditis de válvula protésica Endoftalmitis postquirúrgica o postraumática Endoftalmitis postquirúrgica o postraumática Infecciones del SNC: asociadas a shunts o postneuroquirúrgicas (meningitis, Infecciones del SNC: asociadas a shunts o postneuroquirúrgicas (meningitis, abscesos de cerebro, empiema epidural o subdural) abscesos de cerebro, empiema epidural o subdural) Infecciones osteoarticulares: artritis protésica o post inyección de esteroides Infecciones osteoarticulares: artritis protésica o post inyección de esteroides y osteomielitis posquirúrgica y osteomielitis posquirúrgica P. propionicum: canaliculitis y dacriocistitis (mujeres ancianas), abscesos y P. propionicum: canaliculitis y dacriocistitis (mujeres ancianas), abscesos y neumonía neumonía

41 Propionibacterium avidum Pruebas claves qBGP con ramificaciones rudimentarias (medio líquido) qMetabolismo fermentativo qB hemolítico qEsculina (+) qCAMP (+) qNitrato (-) qPyR (-) qMovilidad (-)

42 Propionibacterium avidum Diferenciación con otros bacilos gram positivos,  hemolíticos de importancia clínica CatalasaMotilidadCAMP Propionibacterium avidum +-+ Arcanobacterium haemolyticum --Inversa Listeria monocytogenes +++

43 Propionibacterium spp Diferenciación de especies P. avidum P. granulosum P. acnes P. propionicum Cto. óptimo Ana + Aero AnaAnaAna Nitrato--++ Esculina+--- Indol--+- Catalasa+++-

44 SensiblePenicilinaImipenemCefalosporinasCloranfenicolEritromicinaClindamicinaTetraciclinasVariableAminoglucósidosResistenteMetronidazol Propionibacterium avidum Sensibilidad antibiótica

45 ListeriaListeria Hábitat   Vegetales, animales (40 sp mamíferos, 17 sp aves), suelo, fertilizantes, agua, crustáceos, moscas, garrapatas  ubicuo en la naturaleza   Animales colonizados eliminan L. m por heces abono hombre vegetales   Contaminación de alimentos - Productos crudos de orígen animal (carnes rojas, pescados) frescos o frizados - Productos lácteos crudos (leche pasteurizada y no pasteurizada, quesos, helados) - Frutas y vegetales crudos

46 Animales: Humanos: Neonatos: Listeriosis de aparición temprana (dte. 1a. semana de vida)  prematurez, bajo peso al nacer: - transmisión transplacentaria por sepsis materna - transmisión ascendente por colonización vaginal Listeriosis de aparición tardía (> 1a. semana de vida)  niños nacidos sanos  transmisión a través del canal de parto contaminado Adultos inmunocomprometidos: Ancianos, neoplasias oncohematológicas, neoplasias sólidas, HIV, SIDA, Tx, cirrosis, DBT, DPAC, terapia con corticoides Mujer embarazada Infecciones cutáneas y oculares (veterinarios), endocarditis, osteomielitis, infecciones pleuropulmonares, peritonitis, etc. meningoencefalitis abortos sépticos (repetición) Meningoencefalitis y sepsis Abortos a repetición  frecuencia 15% pac. no IC, no embarazadas Listeria monocytogenes Patogenia

47 Listeria monocytogenes (ß) Diferenciación con otros géneros ß hemolíticos Listeria monocytogenes (ß) Diferenciación con otros géneros ß hemolíticos Catalasa C. ulcerans C.pseudotuberculosis Catalasa + CAMP Inv. + Esculina - Motilidad - C. ulcerans C.pseudotuberculosis Catalasa + CAMP Inv. + Esculina - Motilidad - Propionibacterium avidum (b) Catalasa + Esc. + CAMP + Motilidad - Propionibacterium avidum (b) Catalasa + Esc. + CAMP + Motilidad - EGB Catalasa - BE - Motil - EGB Catalasa - BE - Motil - Enterococcus faecalis Catalasa - PyR + Motilidad - Enterococcus faecalis Catalasa - PyR + Motilidad - Oerskovia Cellulomonas Microbacterium Oerskovia Cellulomonas Microbacterium Catalasa + Pigmento + CAMP - Catalasa + Pigmento + CAMP -

48 Identificación de Listeria monocytogenes Identificación de Listeria monocytogenes Catalasa Bilis Esculina ClNa 6,5% Movilidad CAMP Catalasa Bilis Esculina ClNa 6,5% Movilidad CAMP E. faecalis - + - E. faecalis - + - L. monocytogenes + (cabeza de fósforo) L. monocytogenes + (cabeza de fósforo)

49 PERFIL DE SENSIBILIDAD  Activas: penicilina *, ampicilina *, gentamicina, imipenem *, TMS, rifampicina, tetraciclina  Intermedias: cefalotina, ciprofloxacina, clindamicina  No Activas: cefotaxima, ceftazidima, nalidíxico, fosfomicina * Tolerancia

50  C. afermentans ss afermentans  C. auris  C. propinquum  C. pseudodiphtheriticum  C. mucifaciens  C. riegelii Género Corynebacterium (especies no lipofílicas)  Turicella otitidis  Brevibacterium spp  Arthrobacter spp  Aureobacterium spp  C. aquaticum Géneros y especies relacionados Pigmento amarillo Bacilos gram positivos con metabolismo oxidativo Otros Géneros  Actinomicetos aerobios (con excepción del Género Dermatophilus)  Bacillus spp  Kurthia spp

51 Corynebacterium spp con metabolismo oxidativo no lipofílicos

52 Infecciones respiratorias: bronquitis, traqueobronquitis y neumonía en pacientes: - Inmunocomprometidos - Enf. Pulmonar preexistente (EPOC) - Intubación endotraqueal - Enfermedades de base: falla cardíaca congestiva, DBT, neoplasia 1991. Colt y Morris: Rev Infect Dis: 61 casos Endocarditis: 1991 Morris y col: Rev Infect Dis: 18 casos; 50% asociada a válvula protésica. Otras: poco frecuentes ITU (discutido), osteomielitis vertebral, infección heridas (colonizante secundario) Habitat: piel, orofaringe ATB: S// bL, AG, quinolonas, rifa, tetra V// macrólidos, lincosamidas Colonias blanquecinas, Colonias blanquecinas, ligeramente secas, de ligeramente secas, de bordes enteros bordes enteros TSI s/c TSI s/c NO3 + NO3 + Urea + (rápida) Urea + (rápida) Asacarolítico Asacarolítico Corynebacterium pseudodiphtheriticum

53 Habitat: piel Aislado de hemocultivos Colonias blanquecinas, Colonias blanquecinas, cremosas, de bordes cremosas, de bordes regulares regulares CAMP V (60%) CAMP V (60%) Asacarolítico Asacarolítico Generalmente S// a ATB Generalmente S// a ATB  beta lactámicos Dnasa - Dnasa - Diferenciar de C. auris y T. otitidis: C. auris: - Colonias ligeremente secas y adherentes - Aislado de oído - R// a ATB b lactámicos - Dnasa -, CAMP + T. otititis: - Aislado de oído medio - Colonias cremosas (≈ C. afermentans) pero en el Gram: BGP largos irregulares ramificarse (≠ C. afermentans) BGP largos irregulares ramificarse (≠ C. afermentans) - Dnasa +, CAMP + C. afermentans ss afermentans

54 Géneros relacionados con Corynebacterium con metabolismo oxidativo Catalasa++ MetabolismoOO Ciclo coco-bacilarsísí MotilidadV- Coloniasgrandes, blanco-grisáceasgrandes, blanco-grisáceas y cremosas o amarillo-verdosas, y cremosas o amarillo-verdosas, cremosas  ECN cremosas  ECN Olorno queso - transpiración UreaV- EsculinaV- Dnasa/gelatina++ Hábitat piel humana, sueloalimentos (leche rancia-queso) piel humana mucosas y adyacentes (B. epidermidis y B. casei) CIM penicilinabaja elevada Tipo de infecciónvaginitis, endoftalmitis,osteomielitis, peritonitis (DPCA), ITU, bacteriemia en HIV+septicemia, bacteriemia en hemolizados, meningitis, colonización de shunt OtrasTirosina +; ClNa 6.5% + ArthrobacterBrevibacterium

55 Actinomicetos aerobios 4BGP 4Filamentosos y con ramificaciones 4Pueden presentar ácido resistencia parcial (géneros Nocardia, Rhodococcus, Gordona, Tsukamurella y Mycobacterium) 4Pueden presentar micelio aéreo (géneros Nocardia, Streptomyces, Actinomadura, Amycolata, Amycolaptosis, Nocardiopsis, Saccharomonospora, Saccharopolyspora y Thermoactinomyces) 4Hábitat: ubicuos en el ambiente, ampliamente distribuídos en el suelo, agua fresca, agua marina y participan de la descomposición de la materia orgánica vegetal 4Patógeno oportunista en humanos y animales

56 Género Nocardia 4BGP aerobios filamentosos y ramificados 4Parcial AR (Kinyoun +) 4Micelio aéreo + 4Catalasa + 4Metabolismo oxidativo 4Lisozima resistente 4Lento desarrollo (48 - 72 hs crecimiento visible), colonias secas (yeso) de color blanco, amarillo  anaranjado)

57 4Infecciones en el huésped inmunocompetente: colonización piel y TRS, I. ocular (exógena), I. cutánea (micetoma, linfocutánea o superficial) Infecciones en el huésped inmunocomprometido: infecc. ocular, inf. pulmonar invasiva e infección diseminada (cerebro, riñón, hígado, bazo y menos frecuentemente piel, hueso, articulación, ojo) 4Factores de riesgo: Tx renal, Tx cardíaco, Tx hepático, Tx MO, HIV, granulocitopenia, neoplasia, terapia inmunosupresora 4Terapia antibiótica: TMS (de elección) y amika, imipenem, cefalosporinas 3ra., quinolonas, eritro, clinda, tetra y minociclina (drogas alternativas) Género Nocardia

58 Género Rhodococcus 4Estrechamente relacionado con los géneros Nocardia, Mycobacterium y Corynebacterium 4Integrado por 12 especies R. equi (hombre) 4Catalasa + 4Presenta ciclo coco-bacilar 4Parcial AR (Kinyoun +) 4Metabolismo oxidativo 4Hábitat: saprófito del suelo

59 Rhodococcus equi Características culturales y bioquímicas: 4Buen desarrollo en medios habituales: AN - AS 4Desarrollo 24 - 48 hs 4Colonias medianas mucoides con pigmento rosa  salmón 4Caseína, xantina, e hipoxantina -; tirosina v 4Glucosa + (por metabolismo (O), 14 días) 4CAMP + (S. aureus ATCC 25923) Hábitat:animales (caballos, vacas, cerdos) (neumonía necrotizante en potros) Suelo con estiércol

60 Rhodococcus equi 4Patógeno oportunista (Tx renal, HIV, neoplasias sólidas o enf. oncohematológicas, alcoholismo, terapia inmunosupresora (corticoides o quimioterapia) 4Fiebre y síntomas respiratorios en > 75% de los casos  neumonía cavitada, abscedificada de larga evolución  “TBC like” 4Otras infecciones  endoftalmitis y abscesos subcutáneos postraumáticos (también en pacientes inmunocompetentes), bacteriemia asociada a catéter (NPT o catéter venoso central), artritis séptica, peritonitis en DPCA, infección pulmonar diseminada (cerebro, hígado, bazo, piel) 4Las infecciones están asociadas con la exposición a animales (caballos) o suelo contaminado 4Patógeno intracelular  difícil de erradicar 4Antibióticos más activos: eritro y rifa 4Tratamiento antibiótico prolongado (2 a 6 meses) + resección quirúrgica

61 Rhodococcus equi Sensibilidad antibiótica > 50% R Droga de Elección: Droga de Elección: Eritro o Rifa Tratamientos prolongados: Tratamientos prolongados: 2 a 6 meses  Sensible AMC / AMS ImipenemAminoglucósidosTMSVancomicina Eritromicina (3%) Rifampicina (4%) Tetracilina (4%) VariableAmpicilinaCefalotinaPenicilinaOxacilinaClindamicina Quinolonas (16-18 % R//)

62 Micobacterias de rápido crecimiento qTSI sin cambio qKinyoun y Ziehl-Neelsen: positivos qMicelio aéreo: negativo qLisozima resistente qAril sulfatasa (3 días): positiva qM. Fortuitum: Nitrato (+), quinolonas S, fox S M. Chelonae: Nitrato (-), quinolonas R, fox R M. Chelonae: Nitrato (-), quinolonas R, fox R

63 Micobacterias de rápido crecimiento  Patógenos oportunistas  Infecciones de heridas post traumáticas y postquirúrgicas  Infecciones asociadas a catéteres  Infecciones pulmonares crónicas  Osteomielitis post fractura expuesta  Pseudobrotes ( contaminación d los canales de succión de los fibrobroncoscopios)

64 Bacilos gram positivos Kinyoun positivo Pigmento rosado-salmón CAMP + Micelio aéreo + Nocardia spp (Lisozima R) - Arilsulfatasa 3 días + Mycobacterium spp (rápido crecimiento) - Hipoxantina + Tsukamurella spp - Gelatina - / + Tsukamurella spp (Lisozima R) + / - Gordona spp (Lisozima S) - NO3 / ONPG + Rhodococcus spp (Lisozima V) + Mycobacterium fortuitum - chelonae (Lisozima R) - Arilsulfatasa 14 días + Rhodococcus equi

65 Especies de Corynebacterium lipofílicas  C. urealyticum  C. jeikeium  C. afermentans ss lipophilum  C. lipophiloflavum 1) Con Metabolismo Oxidativo  C. kroppenstedtii  Corynebacterium grupo F1  Corynebacterium grupo G  C. macginlenyi  C. accolens  C. diphtheriae ss intermedius 2) Con Metabolismo Fermentativo

66 Endocarditis de válvula nativa o protésicaEndocarditis de válvula nativa o protésica Meningitis asociada a shuntMeningitis asociada a shunt Infecciones osteoarticulares post-quirúrgicasInfecciones osteoarticulares post-quirúrgicas Sepsis en pacientes oncohematológicosSepsis en pacientes oncohematológicos Peritonitis (DPCA)Peritonitis (DPCA) Habitat: piel del paciente internado (región inguinal, rectal, axilar, urogenital) Habitat: piel del paciente internado (región inguinal, rectal, axilar, urogenital) Ambiente inanimado hospitalario. Ambiente inanimado hospitalario. Factores predisponentes: - Inmunocompromiso: neoplasias, neutropenia, SIDA neutropenia, SIDA - Cateterismo y maniobras invasivas - Hospitalización prolongada - Terapia con ATB de amplio espectro - Interrupción barrera cutánea (DPCA) - Dispositivos protésicos Multiresistente - S// glicopéptidos, pristinamicina - V// Ery - Tetra - Rifa - Quinolonas - Glucosa + - NO 3 / Urea - C. jeikeium

67 Factores predisponentes: Inmunocompromiso Inmunocompromiso Manipulación urológica Manipulación urológica Anomalías del TU Anomalías del TU Tx renal Tx renal Hospitalización prolongada Hospitalización prolongada Tto. ATB previo Tto. ATB previo IU recurrente IU recurrente Habitat: piel Habitat: piel Ureasa positiva rápida Lipofílico multiresistente Asacarolítico C. urealyticum Enfermedad infecciosa ITU cistitis incrustada alcalina ITU cistitis incrustada alcalina infección urinaria sin litiasis infección urinaria sin litiasis pielonefritis – pieloureteritis pielonefritis – pieloureteritis Infecciones localizadas en otros sitios, Infecciones localizadas en otros sitios, muy poco frecuentes: bacteriemia, muy poco frecuentes: bacteriemia, endocarditis, osteomielitis, infección endocarditis, osteomielitis, infección de Heridas y TCS de Heridas y TCS

68 Bacilos gram positivos aerobios Catalasa - No  hemolíticos Propionibacterium propionicum A. schaalii Actinomyces spp Lactobacillus spp Erysipelothrix rhusiophatiae Rothia dentocariosa  hemolíticos L. monocytogenes (CAMP +) A. haemolyticum (CAMP inv. +) Gardnerella vaginalis A. pyogenes A. turicensis

69 Géneros Actinomyces, Arcanobacterium y Actinobaculum spp 4BGP rectos o ligeramente curvos y filamentos delgados con ramificaciones verdaderas; con frecuencia pueden disponerse en forma difteroidal (Y, V, T, empalizada) en el mismo preparado. La proporción de formas difteroides y filamentosas varía de acuerdo a la especie 4No ácido resistentes 4No esporulados 4No móviles 4Anaerobios facultativos (mayoría de las especies crecen en atmósfera enriquecida en CO 2 salvo A. bovis, A. meyeri, A. israelii y A. gerencseriae)

70 4Metabolismo fermentativo 4Catalasa negativa (con excepción de A. neuii, A. viscosus y A. naeslundii) 4Las colonias maduras pueden variar desde rugosas y secas a lisas o mucosas con una variación en el diámetro de 0.5 a 5 mm., de color blanco a blanco-grisáceo o blanco crema. Algunas especies pueden presentar a o b hemólisis 4Hábitat: intestino y membranas mucosas y flora normal de la cavidad oral humana y de animales 4ATB: sensibles a ATB b lactámicos. Resistentes a metronidazol Géneros Actinomyces, Arcanobacterium y Actinobaculum spp

71 Actinomyces, Arcanobacterium y Actinobaculum spp Presentaciones clínicas de las infecciones 4Actinomicosis clásica: A. israelii, A. meyeri, A. naeslundii, A. odontolyticus y A. viscosus. La localización más frecuente es la cervico-facial, luego la abdominal, torácica y otras. Se caracteriza por lesiones granulomatosas crónicas que llegan a ser supurativas con formación de abscesos y senos de drenaje, con descarga de gránulos de azufre macroscópicos de color blanco, amarillo o marrón. 4Abscesos de diversa localización 4Enfermedad periodontal y caries dental 4Raras: infecciones del SNC, endocarditis y hepatitis

72 4A. europaeus: abscesos, úlceras, TCS, ITU 4A. graevenitzii: especímenes respiratorios 4A. radingae: abscesos, líquido articular, onfalitis 4A. turicensis: abscesos, sangre, vagina, heridas, colecistitis, apendicitis, otitis media, ITU, etc 4A. bernardiae: abscesos, sangre, oído, úlceras de pie, secreciones oculares, artritis séptica 4A. pyogenes: abscesos, sepsis, úlceras, apendicitis, cistitis 4A. schaalii: sangre, orina 4A. haemolyticum: faringitis en adolescentes, abscesos, infecciones del SNC, osteomielitis, endocarditis Actinomyces, Arcanobacterium y Actinobaculum spp Presentaciones clínicas de las infecciones

73 Actinomyces spp S. Palombarani y col. Hstal de Clínicas. UBA. 2004. Identificación de 45 aislamientos: Morfología Morfología Características culturales Características culturales Catalasa: Catalasa: Resultado Negativo: Resultado Positivo: TSIVancomicinaSPSMRS Metabolismo Metabolismo Lipofilicidad Lipofilicidad CAMP CAMP ß- Glucosidasa ß- Glucosidasa Urea - Hipurato Urea - Hipurato Reduc. Nitrato Reduc. Nitrato Manitol, Lactosa Manitol, Lactosa

74 Actinomyces spp S. Palombarani y col. Hstal de Clínicas. UBA. 2004. Identificación de especies catalasa negativa, ß- hemolíticas A. bernardiae (1) A. bernardiae (1) A. radingae (2) A. radingae (2) A. turicensis (1) A. turicensis (1) -CAMP (-) -ONPG (-) -PYZ (+) -XILOSA (-) -CAMP (-) -ONPG (+) -PYZ (+) -XILOSA (+) -CAMP (-) -ONPG (-) -PYZ (-) -XILOSA (+)

75 Actinomyces spp S. Palombarani y col. Hstal de Clínicas. UBA. 2004 Identificación de especies catalasa negativa, no ß- hemolíticas A europaeus (7) A. radingae (5) A. radingae (5) A. odontolyticus (6) A. odontolyticus (6) A. israelii (5) A. israelii (5) A. turicensis (3) A. turicensis (3) A. bernardiae (2) A. bernardiae (2) A. graevenitzii (3) A. graevenitzii (3) A. funkei (1) A. funkei (1) A. urogenitalis (1) A. urogenitalis (1) EsculinaPigmento NO 3 ONPGUrea  - Glucosidasa  -Fucosidasa ß- NAG PYRPYZ

76 Actinomyces spp S. Palombarani y col. Hstal de Clínicas. UBA. 2004 Identificación de las especies catalasa positiva Actinomyces neuii ss neuii (1) Actinomyces neuii ss anitratus (1) Actinomyces viscosus (4) MetabolismoPigmentoLipofilicidadMovilidadEsculinaNitratosUreaHipuratoCAMPManitolLactosaXilosa  - Glucosidasa PYZODC

77 Actinomyces spp 27 aislamientos, flora única; 18 aislamientos, con flora acompañante Hstal de Clínicas. UBA. 2004 Sitios de aislamiento vs especies de Actinomyces spp ( n = 45)

78 Actinomyces spp Valores de CIM ( µg/ml) Valores de CIM ( µg/ml) A. odontolyticus(4); A. bernardiae (3); A. europaeus (3); A. graevenitzii (3); A. radingae (3); A.sp (2); A. funkei (1); A. neuii ss neuii (1); A. turicensis (1); A. urogenitalis (1); A. viscosus (1).

79 CASO CLÍNICO Melero M, Campos A, Benetucci A, Famiglietti A., Vay C. Medicina (Buenos Aires), 2002.  Paciente de sexo masculino, 38 años de edad  Fiebre 38-39 ºC de 10 días de evolución.  Dentadura mal conservada.  Soplo diastólico. Eco Transesofágico: válvula aórtica con vegetación y abscesos perivalvulares. Insuficiencia aórtica con estenosis.  Paciente de sexo masculino, 38 años de edad  Fiebre 38-39 ºC de 10 días de evolución.  Dentadura mal conservada.  Soplo diastólico. Eco Transesofágico: válvula aórtica con vegetación y abscesos perivalvulares. Insuficiencia aórtica con estenosis.

80 ESTUDIO MICROBIOLÓGICO  2 Hemocultivos ( Bact-Alert)

81 RESULTADOS  Hemocultivos: 20 hs  Gram: bacilos gram-positivos, pleomórficos.  Agar Columbia 5% sangre, 5% CO2: Colonias pequeñas definidas a las 48 hs. Hemólisis alfa.  Hemocultivos: 20 hs  Gram: bacilos gram-positivos, pleomórficos.  Agar Columbia 5% sangre, 5% CO2: Colonias pequeñas definidas a las 48 hs. Hemólisis alfa.

82  Catalasa Negativa  TSI (SH2) Positivo  No crece MRS  Catalasa Negativa  TSI (SH2) Positivo  No crece MRS

83  CIM penicilina 0,008 ug/ml  CIM ceftriaxona 0,063 ug/ml  CIM vancomicina: 64 ug/ml  Tratamiento: Ceftriaxona IV 2g/día.  A los 42 días, con buena evolución y HC control negativos, se realizó reemplazo valvular con prótesis mecánica.  Paciente Carnicero!!!!!!!  CIM penicilina 0,008 ug/ml  CIM ceftriaxona 0,063 ug/ml  CIM vancomicina: 64 ug/ml  Tratamiento: Ceftriaxona IV 2g/día.  A los 42 días, con buena evolución y HC control negativos, se realizó reemplazo valvular con prótesis mecánica.  Paciente Carnicero!!!!!!!

84 Erysipelothrix rhusiopathiae

85 - Enfermedad ocupacional - Carniceros, matarifes, pescadores, veterinarios - Celulitis localizada: erisipeloide - Sepsis, artritis o endocarditis (IC) Habitat: ampliamente distribuído en la naturaleza (R//  Ta. y ph alcalino) Parásito de mamíferos (cerdos), aves y peces  contaminación de suelos y agua con heces y orina  erisipela en cerdos erisipela en cerdos ATB: S// b Lactámicos R// glucopéptidos - AG V// Eritro, cloran, tetra, cipro Droga de elección: Penicilina BGP delgado, filamentoso, BGP delgado, filamentoso, pleomórfico, catalasa - pleomórfico, catalasa - TSI H + con SH 2 TSI H + con SH 2 Vanco R Vanco R BE - BE - ClNa + ClNa + VP + VP + Sacarosa - (  E. tonsillarum) Sacarosa - (  E. tonsillarum)

86 Erysipelothrix rhusiopathiae Diferenciación con otros géneros Formación de Esporas Catalasa SH 2 (TSI) Metabolismo Cto. En MRS Motilidad E. rhusiophatiae --+F--Lactobacillus---F+-*Listeria- + - -F-+Kurthia-+-O-+Bacillus++-*F/O-V

87 Lactobacillus spp 4BGP largos, a veces corineformes o cocobacilares, a veces forman cadenas (similares a Leuconostoc, Estreptococos) 4No esporulados 4Movilidad poco común (por flagelos peritricos) 4Catalasa - 4Metabolismo fermentativo 4Capnofílicos, algunos anaerobios estrictos 4No reducen NO3- a NO2- 4No pigmentan la mayoría

88 Lactobacillus spp 4Crecen en caldo MRS 4No producen SH 2 4Algunas especies producen gas de glucosa 4Forman parte de la flora normal de la boca, tracto GI y vagina de muchos animales y del hombre 4Vancomicina resistente (la mayoría de las especies)  En AS: colonias pequeñas, opacas, algunas rugosas, otras secas,  o  hemolíticas 4Aislados de bacteriemia con o sin endocarditis, abscesos (intraabdominales, viscerales, PPB, cabeza y cuello, TGF), heridas, peritonitis, infección pulmonar (neumonía con o sin empiema), meningitis

89 Lactobacillus spp Clasificación (Otto Kandler-Norbert Weiss) ADH- 1 -+ Gas glucosa--+ 45° C+- 2 d Gluconato-+ 3 + 4 Ribosa-+ 3 + 4 Grupo I Homofermentativosobligados Grupo II Heterofermentativosfacultativos Grupo III Heterofermentativosobligados 1. Puede haber excepciones: L. jensenii; 2. L. casei ss rhamnosus crece a 45°C 3. Puede haber excepciones; 4. Puede haber excepciones Especies más frecuentes de aislamiento clínico: Grupo I:L. delbrueckii - L. acidophilus - L. salivarius Grupo II:L. casei ss casei - L. casei ss rhamnosus - L. plantarum Grupo III: L. brevis - L. (W) confusus - L. fermentum

90 Arcanobacterium haemolyticum Faringitis en adultos jóvenes (10-30 años) que puede manifestarse con rash cutáneo escarlatiniformeFaringitis en adultos jóvenes (10-30 años) que puede manifestarse con rash cutáneo escarlatiniforme Abscesos retrofaríngeosAbscesos retrofaríngeos Infección de tejidos blandos, infecciones mixtas de heridas asociadas a traumatismoInfección de tejidos blandos, infecciones mixtas de heridas asociadas a traumatismo Otras infecciones menos frecuentes: osteomielitis, endocarditisOtras infecciones menos frecuentes: osteomielitis, endocarditis BGP catalasa negativaBGP catalasa negativa  hemólisis (sangre humana), g hemólisis (sangre ovina) CAMP inversa +CAMP inversa +  manosidasa + Cuadro Clínico Características bioquímicas destacables

91 SensiblePenicilinaCefalexinaCefuroximaCefotaxima Azitromicina (CIM 90 0.006) Eritromicina (CIM 90 0.006) CiprofloxacinaVancomicina Sensibilidad antibiótica ResistenteTMSVariableTetraciclinaToleranciaPenicilina  Tto. Elección: Macrólidos Arcanobacterium haemolyticum

92 A. haemolyticum CAMP inversa + Gelatina - Xilosa - a manosidasa + BE -, ClNa -, Mot. - CAMP - Almidón + Hipurato + BE + ClNa + Mot. + CAMP inversa - Xilosa + Gelatina + a manosidasa - CAMP inversa - Xilosa + G. vaginalis L. monocytogenes A. pyogenes A. turicensis     Arcanobacterium haemolyticum Diferenciación con otros BGP ß hemolíticos catalasa -

93 Arcanobacterium haemolyticum. Identification and susceptibility testing to nine antimicrobial agents Almuzara Marisa; de Mier Carmen; Barberis Claudia; Mattera Josué; Famiglietti Angela; Vay Carlos. Laboratorio de Bacteriología. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Hospital de Clínicas. Universidad de Buenos Aires. Argentina 11th. European Congress of Microbiology and Infectious Diseases. 2000.

94 Results 13 strains were isolated from throat and others from: DBT foot ulcers, bone, urethral discharge, peritonsillar abscess, pleural fluid and loquia. In none of the throat samples were isolated beta haemolytic streptococci simultaneously with Arcanobacterium haemolyticum. 3 strains were isolated from a mixed culture: one of them from pleural fluid of a patient with traumatic hemothorax, other from urethral discharge and the other from a loquia from spontaneous abortion. All the strains grew well on human blood agar (colony size 0.5 mm after 24 hours incubation) and exhibited a narrow 1 mm zone of beta haemolysis were as at 48 hours the colony diameter was 1 mm with a beta haemolysis zone of 3 – 5 mm. On sheep blood agar overnight colonies were tiny and little and no beta haemolysis was observed. Gram stain showed asporogenous, pleomorphic gram positive rods. The biochemical profiles are shown in Table 1. All the strains were positive for alpha mannosidase, pyrazinaminidase, and reverse CAMP, and negative for gelatin hydrolysis and xylose fermentation. All these tests allow its differentiation from Arcanobacterium pyogenes. 13 strains gave positive Pyr test using disks whereas only 6 strains gave positive with Pyr test / APY CORYNE. Bacitracin inhibition zones were between 8 – 14 mm. The biocodes obtained by API CORYNE were: 2010360, 2110360, 2130360, 2210360, 2230360, 2310360, 2510360, 2530360, 6010360, 6110360, 6130360, 6330360, and 6530361. Antimicrobial susceptibility is shown in Table 2.

95 Biochemical characteristics of 19 strains of Arcanobacterium haemolyticum Test or characteristic Catalase Nitrate reduction Urea hydrolysis Esculin hydrolysis Gelatin hydrolysis DNA hydrolysis a-mannosidase test Lancefield’s Group B antigen Reverse CAMP reaction Fermentation of: GlucoseMaltoseSucroseMannitolXyloseRiboseGlycogen Assayed for the following enzymes (API CORYNE): Alkaline phosphatase Pyrazinamidase Pyrrolidonyl arylamidase ß-glucuronidase ß- galactosidase a- glucosidase N-acetil-ß-glucosaminidase N° of positive strains/total 0 / 19 19 / 19 15 / 19 19 / 19 2 / 19 0 / 19 19 / 19 0 / 19 11 / 19 19 / 19 6 / 19 5 / 19 17 / 19 8 / 19 Result-----++V+++V--+-V+VVVVV % Positive 000001001007910010010011001000581003232268942

96 Antimicrobial susceptibility of 19 strains of Arcanobacterium haemolyticum Antimicrobial agent PenicillinCephalotinCefuroximeErythromycinAzithromycinTetracyclineClindamycinCiprofloxacinVancomycin N° of susceptible strains/total (% susceptible strains) a 18/19 (94.7) b 19/19 (100) c 19/19 (100) 13/19 (68) 19/19 (100) MICs range (µg/ml) 0.004 – 0.25 0.004 – 0.064 0.032 – 0.5 0.004 – 0.25 < 0.004 0.25 – 64 0.004 – 0.032 0.25 – 0.5 0.25 - 0.5 MICs 50 (µg/ml)0.0160.0160.1250.004 < 0.004 0.50.0080.250.25 MICs 90 (µg/ml)0.0320.0320.250.032 < 0.004 320.0160.50.5 a: according to NCCLS interpretative standars (2000); b: the categorie for staphylococci was applied; c: the categorie for Listeria monocytogenes was applied.

97 Bacilos gram positivos regulares Esporas +Bacillus spp Esporas - BGP regulares catalasa + Metabolismo - SH 2 (TSI) Oxidativo Kurthia spp Fermentativo Listeria spp - Lactobacillus spp + Erysipelothrix

98 Género Bacillus 4BGP regulares esporulados 4Aerobios o anaerobios facultativos 4Catalasa usualmente + 4Motilidad + por flagelos peritricos (mayoría de las especies) 4Metabolismo fermentativo o respiratorio 4Crecen en amplios rangos de temperatura (hasta 75°C) y pH (2 a 10)  Colonias grandes, grises o blancas, de bordes irregulares, con  hemólisis (B. anthracis no presenta  hemólisis) 4Hábitat: suelo, agua, polvo. Algunas especies forman parte de la flora normal del intestino humano y de animales

99 Bacillus spp. Patogenicidad  Patógeno obligado: Bacillus anthracis  Patógenos oportunistas: la mayoría de las especies  Débil poder patogénico  Requieren tanto de una puerta de entrada como de un sistema inmune comprometido para producir enfermedad  Tipo de infección predominante (excluyendo la bacteriemia): la neumonía, muchas veces con complicaciones sépticas  Modo de transmisión: por inhalación de esporas  Especies más frecuentes: 1° B. cereus, 2° B. subtilis. Otras especies (menos frecuentes): B. circulans, B. pumilis, B. licheniformis, B. coagulans, B. sphaericus

100  4Patologías: B. anthracis  antrax cutáneo, respiratorio y gastrointestinal  B. cereus  intoxicación alimentaria e infecciones oportunistas: infecciones locales en quemados, infecc. heridas postraumáticas o postquirúrgicas, endolftalmitis postraumática Infecciones en IC: bacteriemia con o sin endocarditis, infecciones del SNC (meningitis, absceso de cerebro e infecciones asociadas a shunts) ATB: resistentes a penicilina(no B. anthracis) y cefalosporinas (hasta las de 3a. Generación). Sensibles a aminoglucósidos, eritro, clinda, cloranfenicol, quinolonas y vancomicina Género Bacillus

101 Bacillus spp Factores predisponentes para la bacteriemia  Neoplasias  Drogadicción EV  Hemodiálisis  Cateterización  Diabetes  Trauma  Neutropenia

102 Anthrax  Etiología: Bacillus anthracis  Infección primaria en herbívoros (ganado, ovejas, cabras, caballos) por ingestión de esporas del suelo.  Anthrax humano:  por contacto directo o indirecto (pelo, piel, lana) con el animal infectado: forma típica  por exposición intencional: forma atípica (anthrax cutáneo o respiratorio)  Tres formas clínicas  Cutánea  Inhalatoria  Gastrointestinal  Transmisión hombre - hombre y animal - animal (misma especie) extremadamente infrecuente

103 Criterios de laboratorio para la identificación de Bacillus anthracis Identificación presuntiva 1) A partir de la muestra clínica - Coloración de Gram: Bacilos gram positivos en cadenas cortas - Tinta china: cápsula + - Esporas: generalmente ausentes (a menos que la muestra sea expuesta al O 2 atmosférico) 2) A partir del cultivo (AS ovina) - Gram: BGP no capsulados en cadenas largas - Verde de malaquita: esporas ovales, centrales o subterminales que no ensanchan la célula - Morfología colonial: colonia gris o blanca, adherente, lisa o ligeramente convexa con proyecciones en forma de coma desde el borde de la colonia (“cabeza de Medusa”) Cuando la colonia se levanta con el ansa tiene la apariencia de una yema de huevo batida - Inmóvil - No hemolítico - Lecitinasa + - Sensible a penicilina 10 U: 15 - 20 mm

104 Criterios de laboratorio para la identificación de Bacillus anthracis Identificación definitiva  Presencia de la cápsula (Tinta china o M´Fadyean)  Sensibilidad (lisis) al fago gamma  Detección de anticuerpos (contra Ag capsular o polisacáridos de pared celular) por fluorescencia directa sobre el material clínico (DFA)  PCR para gen de la toxina de B. anthracis y/o de la cápsula  Inoculación ratón - cobayo (muerte)

105 Anthrax Tratamiento antibiótico  ATB de elección: - Ciprofloxacina - Doxyciclina (no meningitis)  ATB alternativos: - Penicilina - Amoxicilina - ß lactamasa inducible puede activarse durante el tratamiento - Pobre penetración en macrófagos  Duración del tratamiento: 60 días Niños Embarazo Lactancia

106 Diferenciación entre B. anthracis y otras especies de Bacillus  Hemólisis (sangre ovina)-+ Motilidad-+ (>ría) Hidrólisis de gelatina (7 días)-+ Fermentación de salicina-+ Crecimiento en FEA agar-+ B. anthracis B. cereus y Bacillus spp

107 Metabolismo oxidativo Kinyoun Positivo RhodococcusNocardiaGordoniaTsukamurellaMycobacterium Kinyoun Negativo Corynebacterium aquaticum Aureobacterium spp Brevibacterium spp Metabolismo fermentativo Oerskovia spp Microbacterium spp Cellulomonas spp Exiguobacterium acetylicum Bacilos gram positivos aerobios pigmentados

108 Bacteriemia en hemodializadosBacteriemia en hemodializados Bacteriemia asociado a catéter ( LMA, HIV, neutropenia)Bacteriemia asociado a catéter ( LMA, HIV, neutropenia) Bacteriemia asociada a NPT (Oerskovia)Bacteriemia asociada a NPT (Oerskovia) Endolftalmitis ( Microbacterium, Oerskovia)Endolftalmitis ( Microbacterium, Oerskovia) Peritonitis asociada a DPACPeritonitis asociada a DPAC Meningitis asociadas a shuntsMeningitis asociadas a shunts Infección de heridas y PPBInfección de heridas y PPB

109 Género Exiguobacterium 4BGP, catalasa + 4Pigmento amarillo oro a naranja 4Metabolismo fermentativo, no lipofílico 4Móvil por flagelos peritricos 4Oxidasa + (la mayoría de las cepas) 4Esculina + 4Presenta ciclo coco-bacilar 42 especies:E. acetylicum (ex Brevibacterium acetylicum) E. aurantiacum (no aislada de especímenes clínicos) 4Se desconoce si forma parte de la flora habitual humana 4Aislado de piel, heridas y LCR

110 4BGP, no AR, que forma micelio sustrato ramificado que fragmenta en formas cocoides y bacilares. No forma micelio aéreo 4Catalasa + 4Metabolismo fermentativo. Móvil por flagelos peritricos 4Pigmento amarillo 4Motilidad V 4Esculina ++ 42 especies:O. turbata (xantina -, hipoxantina -, CAMP -) O. xanthineolytica (xantina +, hipoxantina +, CAMP inversa +) 4Hábitat: suelo, materia orgánica de descomposición vegetal, aguas residuales, geles de hidróxido de aluminio 4Causa de meningitis, endoftalmitis, infección articular protésica, bacteriemia asociada a catéter, peritonitis asociada a DPAC, colecistitis gangrenosa post endoscopía, pionefrosis, infección de PPB, bacteriemia asociada a NPT contaminada 4ATB más activo (“in vitro”): vancomicina Género Oerskovia

111 4Bacilo gram positivo 4Catalasa + (excepto C. fermentans) 4Motilidad V 4Metabolismo fermentativo 4Esculina + 4Celulasa + (excepto C. hominis) 4NO3 +, Xilosa + 4Colonias cremosas, de borde entero, blanquecinas, que se tornan amarillas después de 3 días o son amarillas desde el comienzo 4Hábitat: suelo 4Formado por 8 especies pero sólo 1 especie: C. hominis es de aislamiento clínico humano (bacteriemia) 4Todas las cepas testeadas son sensibles a Vanco, Tetra y Rifa Género Cellulomonas

112 4Bacilo gram positivo 4Catalasa + (mayoría de las cepas, pero han sido descriptas cepas catalasa - ) 4Motilidad V ( M. arborescens y M. imperiale son las únicas especies móviles) 4Metabolismo fermentativo 4Esculina + 4Pigmento amarillo (excepto M. arborescens y M. imperiale que tienen pigmento naranja) 4NO3 - (mayoría de las cepas), xilosa v   Cellulomonas 4Hábitat: medio ambiente 4Aislado de sangre (septicemia, endocarditis, bacteriemia asociada a catéter) y de muestras oculares (endoftalmitis exógena) 4Sensible a la mayoría de los antibióticos (excepto Penicilina G y aminoglucósidos Género Microbacterium

113 4Bacilos o cocobacilos gram positivos 4Catalasa + 4Esculina V 4Metabolismo oxidativo 4Motilidad + (mayoría de las cepas) 4Gelatina y caseína + 4Pigmento amarillo (pálido  intenso) de aparición precoz 4Hábitat: productos lácteos y medio ambiente 4Aislado de sangre (FOD, bacteriemia en pacientes con LMA, hemodiálisis crónica, sepsis fatal por picadura de insecto o abrasión de la piel contaminada con suelo), infecciones de PPB (absceso epidural, herida profunda abdominal, celulitis en pacientes con porfiria cutánea), LCR 4A. resistens es resistente a vanco (CIM 32 mg/ml) pero sensible a teico Aureobacterium spp

114 CASO CLÍNICO Vay C et al. Congreso Argentino de Microbiología, 1998.  Paciente de sexo masculino, 19 años de edad. Deficiente mental, sordomudo autista.  Antecedentes: IRC terminal secundaria a una malformación urinaria por reflujo, hemodiálisis desde 1993.  1995-1997: se colocaron y removieron 7 catéteres por oclusión por trombos.  Se colocó un catéter doble lumen permanente por vía gonadal para acceder a la vena cava inferior.  Paciente de sexo masculino, 19 años de edad. Deficiente mental, sordomudo autista.  Antecedentes: IRC terminal secundaria a una malformación urinaria por reflujo, hemodiálisis desde 1993.  1995-1997: se colocaron y removieron 7 catéteres por oclusión por trombos.  Se colocó un catéter doble lumen permanente por vía gonadal para acceder a la vena cava inferior.

115 CASO CLÍNICO  Se registraron varios episodios de bacteriemia por S. aureus oxacilino-resistente.  Recibió vancomicina IV 1g/5 días. malformación urinaria por reflujo, hemodiálisis desde 1993.  Octubre 1997: Escalofríos, fiebre e hipotensión.  Se tomaron dos retroculltivos cuantitativos.  Se registraron varios episodios de bacteriemia por S. aureus oxacilino-resistente.  Recibió vancomicina IV 1g/5 días. malformación urinaria por reflujo, hemodiálisis desde 1993.  Octubre 1997: Escalofríos, fiebre e hipotensión.  Se tomaron dos retroculltivos cuantitativos.

116 Resultados  Recuento de colonias: > 100/ml de sangre  Frascos Bact-Alert: Positivos en 20 hs.  Gram: Bacilos gram-positivos difteroides  AS: 24hs: Colonias puntiformes no definidas  AS: 48-72 hs colonias blanco grisáceas.  AS: después de las 72 hs colonias grandes, bajo convexas, 3 mm diámetro, amarillas.  Frascos Bact-Alert: Positivos en 20 hs.  Gram: Bacilos gram-positivos difteroides  AS: 24hs: Colonias puntiformes no definidas  AS: 48-72 hs colonias blanco grisáceas.  AS: después de las 72 hs colonias grandes, bajo convexas, 3 mm diámetro, amarillas.

117 Pruebas bioquímicas Metabolismo oxidativoMetabolismo oxidativo Catalasa positivaCatalasa positiva Pigmento amarilloPigmento amarillo No lipofílicoNo lipofílico Movilidad positivaMovilidad positiva Esculina positivaEsculina positiva Gelatina +Gelatina + DNAsa +DNAsa +

118 Sensibilidad Antibiótica y Tratamiento CIM ( dilución caldo)  Peni-ampi-cipro: 2 ug/ml  Vanco-TMS: 16 ug/ml  Teico: 0,5 ug/ml  cefalo-eritro-azitro: 32 ug/ml  ceftriaxona: 64 ug/ml  amica-genta: 128 ug/ml CIM ( dilución caldo)  Peni-ampi-cipro: 2 ug/ml  Vanco-TMS: 16 ug/ml  Teico: 0,5 ug/ml  cefalo-eritro-azitro: 32 ug/ml  ceftriaxona: 64 ug/ml  amica-genta: 128 ug/ml Tratamiento:  se interrumpió vancomicina.  Se utilizó ampicilina vo 2g/día 4 semanas.  Hemocultivos control: negativos. Tratamiento:  se interrumpió vancomicina.  Se utilizó ampicilina vo 2g/día 4 semanas.  Hemocultivos control: negativos.

119 Aureobacterium sp

120 Sensiblidad a los Antimicrobianos de Aureobacterium spp Antibiótico Funke et al. 13 cepas CIM µg/ml Nolte et al 1 cepa CIM µg/ml Colaert et al 1 cepa difusión Vay et al 1 cepa CIM µg/ml Rango50%90% Ciprofloxacina0.5-3228 > 2 R2 Clindamicina0.25-1648 NDND Eritromicina < 0.125-16 < 0.125 0.5 > 4 S32 Gentamicina1-648646S > 128 Penicilina < 0.125-16 0.511S2 Rifampicina < 0.125-326 18 < 1 ND > 4 Tetraciclina0.125-20.52NDSND CefalotinaND16S32 CeftriaxonaND16S64 AmicacinaND > 32 ND128 Vancomicina < 0.125-4 0.54 > 16 S16 teicoplaninaND0NDND0.5 ND: no determinado Bacteriología. Hospital de Clínicas. UBA.

121 4Bacilo gram positivo 4Catalasa + 4Motilidad + 4Pigmento amarillo (que desarrolla lentamente dentro de los 3 a 4 días) 4Metabolismo oxidativo, oxidasa +, ciclo coco- bacilo 4Dnasa ++ 4Gelatina -, caseína - 4Esculina V 4Hábitat: agua 4Descripto como agente de bacteriemia, meningitis, peritonitis asociada a DPAC e ITU 4Frecuente sensibilidad intermedia a vancomicina (CIM 8mg/ml)  mecanismo desconocido Leifsonia aquatica

122 Bacilos gram positivos Pruebas de sensibilidad antibiótica

123 Corynebacterium spp

124 MEDIO DE CULTIVO  Mueller Hinton + Tween 80 LIPOFÍLICAS LIPOFÍLICAS  Mueller Hinton + 5% sangre carnero  Mueller Hinton  NO LIPOFÍLICAS

125 CONDICIONES DE INCUBACIÓN  Tiempo: 24 hs. (48)  Temperatura: 35° C  Atmósfera: aire ambiente

126 PUNTOS DE CORTE  No hay puntos de corte definidos para Corynebacterium  Aproximación  puntos de corte estafilococos

127 PUNTOS DE CORTE PENICILINA Criterio CIM (µg/ml) SensibleIntermedioResistente Listeria  2 2 2 2-- Estreptococo  0,12 0,25-2  4 4 4 4 Estafilococo -  0,25

128 CATEGORIZACIÓN DE ERRORES  Very Major: Falsa Sensibilidad  Major: Falsa Resistencia  Minor: Valor intermedio cuando el resultado es sensible o resistente Very Major: < 1% Major: < 5% Major: < 5%

129 DIFUSIÓN VS. DILUCIÓN VARIACIÓN DE ERROR ATBError V. Major MajorMinor General1,50,54,2 Vancomicina000 Ciprofloxacina0,80,88,8 Tetraciclina306,7 Eritromicina4,40,70,7 Martínez-Martínez, 1995 Weiss, 1996ATBError V. Major MajorMinor Vancomicina000 Eritromicina005

130 DIFUSIÓN VS. DILUCIÓN VARIACIÓN ERROR POR PTO. CORTE PENICILINA ATBError V. Major MajorMinor Listeria140 Estreptococo0018 Weiss, 1996 Weiss, 1996

131 CONCLUSIONES  No estandarizada  Medio de Cultivo: M. Hinton  No Lipofílicos T80, sangre  Lipofílicos T80, sangre  Lipofílicos  Errores varían  ATB, Corinebacteria  No hay Puntos de Corte  Infección severa  Dilución / E-Test

132 Arcanobacterium haemolyticum

133 MÉTODOS  CIM (dilución placa) - Gold standard MH + 5% sangre carnero 18 - 24 hs., 35° C, aire ambiente  No difusión

134 E-TEST  MH + 5% sangre carnero 18 - 24 hs., 35° C EXCELENTE CORRELACIÓN  1 dilución98%  2 diluciones99,5%

135 PUNTOS DE CORTE  No hay específicos para A haemolyticum  Penicilina: S  0,12; R  4 µg/ml)  Otros ATB: Estafilococos

136 CONCLUSIONES  MH + 5% sangre carnero  Dilución  E-Test, alternativo  Eritromicina

137 Listeria monocytogenes

138  DIFUSIÓN: No Estandarizada  DILUCIÓN: Mueller Hinton + 5% sangre lisada de caballo 35° C, 16 – 20 hs.  PUNTOS DE CORTE: Ampicilina: Sensible  2 µg/ml Penicilina: Sensible  2 µg/ml

139 E-TEST  Buena alternativa  Chemotherapy 1997  1 dilución86% Correlación

140 Bacilos gram-positivos:Resistencia Natural 4Polipeptídicos, quinolonas antiguas, aztreonam. 4Oxacilina(excepto: Arcanobacterium, Erysipelothix y unas pocas especies más) 4Nitrofurantoína( Excepto Listeria-Erysipelothrix) 4Fosfomicina

141 Bacilos gram-positivos: Resistencia Natural a los Beta-lactámicos y Macrólidos 4Listeria: cefalosporinas de tercera generación. 4C. urealyticum, C jeikeium y C amycolatum: Todos los beta lactámicos  C. urealyticum, C. jeikeium, C. amycolatum, C. pseudodiphtheriticum, C. glucuronolyticum: Resistentes a macrólidos

142 Bacilos gram-positivos: Resistencia Natural a los glucopéptidos 4Actinomicetos: Micobacterias y Nocardia: Natural 4Erysipelothrix y Lactobacillus: Natural  Aureobacterium: sólo una especie

143 Cuando se jerarquiza un bacilo difteroide? 4Aislamiento de sangre en más de una muestra. 4Aislamiento en una muestra de sangre y a partir de un foco (catéter) 4Aislamiento de un especimen estéril ( Liq. Punción): con examen directo positivo o cultivo a partir del aislamiento primario. 4El aislamiento a partir del medio de enriquecimiento debe interpretarse con precaución. 4No descartar el aislamiento a partir de: materiales protésicos osteoarticulares y cardiovasculares, catéteres, LCR + shunt, L peritoneal+DPCA, reemplazo de cristalino. 4A menudo no tienen importancia en hisopados de heridas en cultivo polimicrobiano, 1 sóla muestra de sangre, orina con sedimento < 5 PMN/campo. 4No descartar orina > 5 PMN/campo, pH alcalino y bacilos gram+ en en directo.

144 Caso Clínico 1 Paciente masculino, 57 años, DBT, IRC.Paciente masculino, 57 años, DBT, IRC. En DPCA, tiene dos episodios de peritonitis asociada a la diálisis por ECN meticilino resistente.En DPCA, tiene dos episodios de peritonitis asociada a la diálisis por ECN meticilino resistente. Tratamiento con vancomicina.Tratamiento con vancomicina. Buena evolución clínica.Buena evolución clínica. Tres meses después desarrolla un nuevo episodio y en forma empírica se le vuelve a administrar vancomicina.Tres meses después desarrolla un nuevo episodio y en forma empírica se le vuelve a administrar vancomicina. Mala evolución clínica.Mala evolución clínica. Se rota a imipenem i.p. con resolución de la peritonitisSe rota a imipenem i.p. con resolución de la peritonitis

145 Pruebas bioquímicas TSI ácidoTSI ácido Catalasa negativaCatalasa negativa Pigmento negativoPigmento negativo Movilidad negativaMovilidad negativa Crecimiento en caldo MRS: positivoCrecimiento en caldo MRS: positivo

146 Lactobacillus rhamnosus

147 Caso Clínico 2 Mujer 42 años, adicta endovenosa, con necrosis de cabeza de fémur como consecuencia del tratamiento con esteroides por un síndrome de Guillain-Barré.Mujer 42 años, adicta endovenosa, con necrosis de cabeza de fémur como consecuencia del tratamiento con esteroides por un síndrome de Guillain-Barré. A los 30 años había sido sometida a un reemplazo total de cadera derechaA los 30 años había sido sometida a un reemplazo total de cadera derecha Previo al ingreso al hospital habia sido sometida a manipulación dental por cariesPrevio al ingreso al hospital habia sido sometida a manipulación dental por caries Desarrolla un dolor gradual y progresivo en el sitio de la artroplastiaDesarrolla un dolor gradual y progresivo en el sitio de la artroplastia

148 Gram del líquido articular No se observan bacterias Recuento de leucocitos 72000 /mm 3 (95% neutrófilos)

149 Pruebas bioquímicas Metabolismo fermentativoMetabolismo fermentativo Catalasa negativaCatalasa negativa MRS negativoMRS negativo SH2 negativoSH2 negativo Sensible a vancomicinaSensible a vancomicina Sensible a penicilina, CRO, Eritro y clindaSensible a penicilina, CRO, Eritro y clinda

150 Actinomyces europaeus

151 Caso Clínico 3 Paciente masculino, 76 años, que ingresa al hospital para evaluación de un accidente cerebro vascular del hemisferio izquierdo.Paciente masculino, 76 años, que ingresa al hospital para evaluación de un accidente cerebro vascular del hemisferio izquierdo. Antecedentes de by-pass coronario y reemplazo valvular aórtico hace 4 años.Antecedentes de by-pass coronario y reemplazo valvular aórtico hace 4 años. Datos al ingreso: 13000 blancos y 38.8 ºC de TraDatos al ingreso: 13000 blancos y 38.8 ºC de Tra Eco Transesofágico:ecodensidad de 0.5 cm compatible con una vegetación en válvula aórtica y absceso perivalvularEco Transesofágico:ecodensidad de 0.5 cm compatible con una vegetación en válvula aórtica y absceso perivalvular

152 Caso Clínico 3 Se toman 3 muestras de hemocultivoSe toman 3 muestras de hemocultivo Se inicia tratamiento empírico con vancomicina más gentamicinaSe inicia tratamiento empírico con vancomicina más gentamicina Se reemplaza la válvulaSe reemplaza la válvula De acuerdo a los resultados del cultivo se rota a peni G IV durante 4 sem, seguido por peni oral por 6 semanasDe acuerdo a los resultados del cultivo se rota a peni G IV durante 4 sem, seguido por peni oral por 6 semanas

153 Características bioquímicas Catalasa positivaCatalasa positiva LipofílicoLipofílico Metabolismo oxidativoMetabolismo oxidativo Motilidad negativaMotilidad negativa NO3 negativoNO3 negativo Urea negativaUrea negativa Glucosa negativaGlucosa negativa CAMP positivaCAMP positiva Sensible a penicilina: CIM y CBM 0.03  g/mlSensible a penicilina: CIM y CBM 0.03  g/ml Sensible a vancomicina: CIM y CBM 0.5  g/mlSensible a vancomicina: CIM y CBM 0.5  g/ml

154 Corynebacterium afermentans ss lipophilum

155 Caso clínico 4 Paciente masculino, 28 años, HIV positivo, consumidor activo de droga por vía inhalatoria y antecedentes de TBC pulmonar, 2 episodios de neumonía neumocóccica bacteriemica, infecciones respiratorias a repetición y hepatopatía crónica por virus de la hepatitis B y C.Paciente masculino, 28 años, HIV positivo, consumidor activo de droga por vía inhalatoria y antecedentes de TBC pulmonar, 2 episodios de neumonía neumocóccica bacteriemica, infecciones respiratorias a repetición y hepatopatía crónica por virus de la hepatitis B y C. Ingresa por un cuadro de tos, expectoración purulenta, fiebre y disnea progresiva de una semana de evolución.Ingresa por un cuadro de tos, expectoración purulenta, fiebre y disnea progresiva de una semana de evolución.

156 Caso clínico 4 Rx de tórax: infiltrado pulmonar alveolar paracardial derechoRx de tórax: infiltrado pulmonar alveolar paracardial derecho Se toman por fibrobroncoscopía muestras de secreciones pulmonares por cepillo envainado y BAL.Se toman por fibrobroncoscopía muestras de secreciones pulmonares por cepillo envainado y BAL. Gram: abundantes bacilos gram-positivos difteroidesGram: abundantes bacilos gram-positivos difteroides Cultivos: recuentos > 10 3 y > 10 4 UFC/ml respectivamenteCultivos: recuentos > 10 3 y > 10 4 UFC/ml respectivamente De acuerdo al cultivo, tratamiento con vanco + imipenem con buena evolución clínicaDe acuerdo al cultivo, tratamiento con vanco + imipenem con buena evolución clínica

157 Pruebas bioquímicas Catalasa positivaCatalasa positiva Metabolismo fermentativoMetabolismo fermentativo NO3 positivoNO3 positivo Urea negativaUrea negativa Esculina negativaEsculina negativa CAMP positivaCAMP positiva DNAasa negativaDNAasa negativa Glucosa positiva, maltosa negativaGlucosa positiva, maltosa negativa Sensible a peni, vanco, imipenem y gentaSensible a peni, vanco, imipenem y genta Resistente a macrólidos, clinda, rifa, tetra y ciproResistente a macrólidos, clinda, rifa, tetra y cipro

158 Corynebacterium striatum

159 Caso clínico 5 Mujer de 53 años, con adenocarcinoma gástrico, sometida a gastrectomía total 5 años antes.Mujer de 53 años, con adenocarcinoma gástrico, sometida a gastrectomía total 5 años antes. Se le colocó un Port-A-Cath para la administración semanal de fluorouracilo.Se le colocó un Port-A-Cath para la administración semanal de fluorouracilo. Desarrolló fiebre y escalofríos 1 mes después de la colocación del cateter, posteriormente a la administración de la droga.Desarrolló fiebre y escalofríos 1 mes después de la colocación del cateter, posteriormente a la administración de la droga. Se tomaron muestras de hemocultivos y retro.Se tomaron muestras de hemocultivos y retro.

160 Caso clínico 5 Se removió el cateterSe removió el cateter La paciente recibió claritro, cipro ( 3 meses) y amika ( 1 mes)(IV) con buena evolución clínica.La paciente recibió claritro, cipro ( 3 meses) y amika ( 1 mes)(IV) con buena evolución clínica.

161 Pruebas bioquímicas BGP filamentosoBGP filamentoso TSI sin cambioTSI sin cambio Catalasa positivaCatalasa positiva Vancomicina resistenteVancomicina resistente No lipofílicoNo lipofílico No pigmentadoNo pigmentado

162 Pruebas bioquímicas Kinyoun positivoKinyoun positivo Zielh Neelsen positivoZielh Neelsen positivo Arilsulfatasa (3 días) positivaArilsulfatasa (3 días) positiva NO3 negativoNO3 negativo Citrato +Citrato + Clna -Clna -

163 Mycobacterium chelonae

164 Caso clínico 6 Neonato prematuro (24 semanas de gestación), peso 640 gs.Neonato prematuro (24 semanas de gestación), peso 640 gs. Nacido de madre que había sufrido una infección del líquido ammiótico ( corioammionitis ) luego de RPM 13 días antes del parto.Nacido de madre que había sufrido una infección del líquido ammiótico ( corioammionitis ) luego de RPM 13 días antes del parto. Intubado y ventilado mecánicamente.Intubado y ventilado mecánicamente. Se inició tratamiento con Piper + AkSe inició tratamiento con Piper + Ak

165 Caso clínico 6 Se constatan SDR grado 2, hipotensión severa, coagulopatía y hemorragia intraventricular ventricular.Se constatan SDR grado 2, hipotensión severa, coagulopatía y hemorragia intraventricular ventricular. El paciente falleceEl paciente fallece Se tomaron muestras de oído,boca, lavado gástrico y hemocultivos del neonato e hisopado vaginal y de placenta de la madre.Se tomaron muestras de oído,boca, lavado gástrico y hemocultivos del neonato e hisopado vaginal y de placenta de la madre. En todas las muestras desarrolló la misma bacteria.En todas las muestras desarrolló la misma bacteria.

166 Pruebas bioquímicas TSI ácidoTSI ácido Lipofílico??Lipofílico?? Catalasa positivaCatalasa positiva CAMP negativaCAMP negativa Maltosa positivaMaltosa positiva O 129 resistenteO 129 resistente Alfa- glucosidasa negativaAlfa- glucosidasa negativa DNAasa negativaDNAasa negativa

167 Corynebacterium amycolatum

168 Caso clínico 7 Mujer, 45 años, con alveolitis alérgica crónica, en tratamiento con corticoides, que ingresa al hstal por un episodio de reagudización de su enfermedad basal.Mujer, 45 años, con alveolitis alérgica crónica, en tratamiento con corticoides, que ingresa al hstal por un episodio de reagudización de su enfermedad basal. Presenta fiebre, leucocitosis y derrame pleural en la Rx de tórax.Presenta fiebre, leucocitosis y derrame pleural en la Rx de tórax. TC: colección en pleura lateral y cisura del pulmón derecho.TC: colección en pleura lateral y cisura del pulmón derecho.

169 Caso clínico 7 Se practica toracocentesis obteníendose un material purulento con alto contenido en leucocitosSe practica toracocentesis obteníendose un material purulento con alto contenido en leucocitos De acuerdo al cultivo, se inicia tratamiento con AMC y se coloca un tubo de drenaje.De acuerdo al cultivo, se inicia tratamiento con AMC y se coloca un tubo de drenaje. Evolución favorableEvolución favorable

170 Pruebas bioquímicas Catalasa negativaCatalasa negativa Metabolismo fermentativoMetabolismo fermentativo Beta hemólisisBeta hemólisis Bilis esculina negativaBilis esculina negativa CLNA negativoCLNA negativo CAMP positivaCAMP positiva

171 Arcanobacterium haemolyticum

172 Caso clínico 8 Mujer, 60 años, con sintomatología de infección urinaria.Mujer, 60 años, con sintomatología de infección urinaria. Sin enfermedad de base.Sin enfermedad de base. Sedimento de orina: leucocitos > 10; hematíes y cristales ausentes.Sedimento de orina: leucocitos > 10; hematíes y cristales ausentes. PH orina: 8.0PH orina: 8.0

173 Pruebas bioquímicas BGP difteroideBGP difteroide Catalasa positivaCatalasa positiva Metabolismo oxidativoMetabolismo oxidativo Urea positiva rápida ( 5 minutos)Urea positiva rápida ( 5 minutos) Glucosa negativaGlucosa negativa

174 Pruebas bioquímicas NO LIPOFÍLICO!!!NO LIPOFÍLICO!!! SENSIBLE A PENICILINA!!!!SENSIBLE A PENICILINA!!!! Glucosa –Glucosa – Maltosa +Maltosa +

175 Corynebacterium riegelii