Defectos en el splicing in vitro. Análisis de la composición del compuesto X mediante Northern Blot.

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Objetivo general de esta sección
Analisis situacional.
Transcripción de la presentación:

Defectos en el splicing in vitro

Análisis de la composición del compuesto X mediante Northern Blot

- El complejo X migra como A1 y contiene U1, U2, U4/U6.U5 snRNP - U2 snRNP migra de forma anormal en ausencia de Snu17p, indicando un compromiso en su estructura

Extractos de splicing + pre_mRNA actina biotinilado Incubación a 23° 20 minutos Alícuota para Heparina análisis de RNA total Centrifugación en gradiente de glicerol 10-30% Inmunoprecipitación de las fracciones con Estreptoavidina-agarosa beads Extracción del RNA y Northern blot Este experimento independiente confirma que el complejo X está compuesto por todas las snRNP