curso: microbiología Alumna: Roció Collazos .M Antibiograma curso: microbiología Alumna: Roció Collazos .M

Conceptos Antibiograma: son métodos in Vitro que determinan la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio específica y estandarizada. Concentración Mínima Inhibitoria (CIM): Es la menor concentración de una gama de diluciones de antibiótico que provoca una inhibición de cualquier crecimiento bacteriano visible. Antibióticos: Son sustancias químicas producidas por organismos vivientes, o sintetizados en el laboratorio capaces de inhibir en pequeñas cantidades los procesos vitales de microorganismos, destruyendo e impidiendo su desarrollo y reproducción.

Clasificación de los Antibióticos ß-lactámicos: Penicilinas, Monobactam. Glicopéptidos: Vancomicina. Aminoglicòsidos: Gentamicina, Amikacina. Macrólidos: Eritromicina, Azitromicina, Claritromicina. Quinolonas: Ciprofloxacino, Levofloxacino. Tetraciclinas Sulfonamidas y trimetoprim: bactrin , exazol.

Método de Difusiòn en Disco (Baeur-Kirby) Es el mas difundido. Prueba la inhibición o resistencia de los microorganismos, enfrentándolos con los medicamentos que se encuentran impregnados en pequeños discos.

Medio de cultivo utilizado Mueller Hinton Su reproducibilidad aceptable. Baja concentración de inhibidores, condición crítica para evaluar sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclina. El crecimiento satisfactorio de patógenos no exigentes. Existir ya gran experiencia en estudios de susceptibilidad.

Factores que influyen en el Agar pH: El rango de pH va de 7,2 a 7,4. variación de cationes divalentes: Ca y Mg: Afectan los halos de inhibición para aminoglucósidos y tetraciclinas en Pseudomonas aeruginosa. Profundidad del Agar: La profundidad recomendada de la capa de agar es de 3 a 5 mm.

Preparación del Inóculo Se prepara el inóculo con ajuste a la turbidez McFarland 0,5 que corresponde aun diámetro de1.5 x10 UFC/ML, directo en caldo de colonias frescas en agar no selectivo.

Inoculación de la placa Con un hisopo estéril en tres direcciones inocule toda la placa (giros de 60°).

Aplicación de sensidiscos separación: los discos deben de estar separados24 mm (del centro de un sensidisco al otro más cercano). Cantidad: 12 unidades en placas de 150mm y 5 unidades en placas se 100mm.

Lectura e interpretación de los resultados Categorías de interpretaron: Sensible: El microorganismo presenta un gran área de inhibición causada por el fármaco. 95% éxito Intermedio: Se presenta un halo de inhibición mas reducido. Resistente: Presenta muy poco o casi nada de halo.

Medición de los halos Después de incuba las placas del antibiograma se procederá a la lectura de este. Se usa una regla y se mide el radio del halo de inhibición partiendo de desde donde está el disco de antibiótico hasta donde se inhibió el crecimiento. La longitud obtenida después se compararán con estándares que nos dirán si el medicamento será efectivo o no en el tratamiento.

Trimetroprim/ Sulfametoxasol Antibiótico Resistente Intermedia Susceptible Ampicilina ≤ 13 14 - 16 ≥ 17 Amikacina ≤ 14 15 – 16 Sulfisoxasol ≤ 12 13 - 16 Gentamicina 13 – 14 ≥ 15 Cloranfenicol 13 - 17 ≥ 18 Ceftriaxona 14 – 20 ≥ 21 Ciprofloxacina ≤ 15 16 - 20 Tetraciclina 15 - 18 ≥ 19 Acido Nalidixico 14 – 18 Estrptomicina ≤ 11 12 – 14 anamicina 14 - 17 Trimetroprim/ Sulfametoxasol ≤ 10 11 – 15 ≥ 16

Otros métodos Dilución en Caldo: En el método de dilución en caldo, base de casi todos los métodos utilizados en la actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano, generalmente diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el desarrollo del microorganismo

Método de E-test: Consiste en aplicar sobre un medio de cultivo, donde se encuentra el microorganismo a ensayar, tiras plásticas que llevan incluidas un gradiente de concentración de un determinado ATB. Luego se incuba adecuadamente y se observa la formación de una elipse de inhibición de crecimiento.

Método Automatizado: Este método se basa en micro diluciones sobre micro tubos. El crecimiento bacteriano se va a observar por la turbidez o fluorescencia de los micro tubos. Es útil para examinar una gran cantidad de muestras

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