“APOPTOSIS”

“Apoptosis vs Necrosis”

Características de las células apoptóticas Reducción del volumen celular Compactación de las organelas Condensación de la cromatina Degradación internucleosomal del ADN Exposición de fosfatidil-serinas en el lado externo de la membrana plasmática Formación de “cuerpos apoptóticos”

Extrusión de la célula apoptótica

Apoptosis en células derivadas de epitelio uterino Línea celular RENTROP tratadas en medio con 1% de libre de esteroides durante 24 h A: Control B: RU486 10-6 M C: R5020 10-8 M Pecci et al,J.B.C. 1997,272:11791

Tinción con DAPI

TUNEL

Ensayo de Anexina V

C. elegans.... el principio.... ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

Vías principales de apoptosis en mamíferos Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

Caspasas cysteine-dependent aspartate-specific proteases

Tabla de caspasas

Vías principales de apoptosis en mamíferos Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

Activación por receptores de muerte ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

Eventos mitocondriales

Efecto de la dexametasona sobre la liberación del citocromo C Marcador Mitocondrial Citocromo C Superposición de imágenes Control Dexa 10-8 M

ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

Proteínas de la familia de Bcl-2 Gross et al,Genes Dev. 1999,13:1899

Miembros de la familia de Bcl-2 Los niveles relativos de los miembros anti/pro-apoptóticos determinan el destino celular. Los miembros antiapoptóticos se localizan en membranas. Los proapoptóticos principalmente en citoplasma y se translocan a la mitocondria ante un estímulo de muerte. Regulan la liberación desde la mitocondria de proteínas que inducen la apoptosis.

Vías principales de apoptosis en mamíferos Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

Translocación de GFP-Bax Biochem. J. (2002) 367 (169–178)

(A) GFP–Bax-transfected cells, stimulated with staurosporine (A) GFP–Bax-transfected cells, stimulated with staurosporine. (B) GFP–Bax and GFP were immunoprecipitated and analysed for GFP–Bax, VDAC and ANT. The non-immunoprecipitated VDAC and actin in the supernatant (SN) were also measured. (C) Shows the selectivity of the anti-ANT polyclonal and anti-VDAC monoclantibodies used on mitochondrial extracts. Biochem. J. (2002) 367 (169–178)

Posibles mecanismos de acción de los miembros de la familia de Bcl-2

La dexametasona aumenta los niveles de Bax y disminuye los de Bcl-XL en timocitos in vitro in vivo Control Dexa Control Dexa Bax Bax 1 2,35 1 1,6 Bcl-2 Bcl-2 1 0,9 1 1,1 Bcl-XL Bcl-XL Bcl-XC 1 1,02 1 ---

Regulación por IAPs

Vías principales de apoptosis en mamíferos ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)