AF-6 Uniones hendidura RGL PLD PI3K Akt Raf MAPK Rin1 BCR Mekk JNK Nore-1 ?? EFECTOS BIOLOGICOS

Ras GTP Ras GDP Encendido Apagado Estímulo Externo: Hormonas Factores de crecimiento Citoquinas Miembros: H-Ras, N-Ras y K-Ras (4A + 4B) Bajo peso molecular: ~21kDa ( aa)

GEF: Guanine nucleotide Exchange Factor GAP: GTPase Activating Protein

SH3 PTK GDP Ras inactivo homología CDC25 SH3 PPPVPPRR Grb2 SH2 Sos Receptor EGF PTK P P GTP Ras activo Cascada de kinasas Receptor EGF activo EYINQ

G 10 AAGGVGKSA 18 D 57 TAGQEL 63 N 116 KCD 119 E 143 TSA 146 Región hipervariable Y 32 DPTIEDSY 40 Unión a GTPUnión a efector Switch I (interacción con GAP)Switch II (interacción con GEF) H-Ras Q H K L R K L N P P D E S G P G C M S C K C V L S N-Ras Q Y R M K K L NS S D D G T Q G C M G L P C V V M K-Ras 4A Q Y R L K K I S K E E K T P G C V K I K K C I I M K-Ras 4B R K H K E K M S K D G K K K K K K S K T K C V E M Caja CAAX Unión de Pi  y   Unión de Pi  y Mg +  Unión de anillo de Guanina  ESTRUCTURA DE RAS

Inhibidores de Farnesil Transferasa

Posibles modos de atacar trasformación por Ras

Cascada activada por Ras

Raf-1, A-Raf MEKK 1-3MEKK4 TAK1, ASK1, PAK B-Raf, Mos Tpl-2 DLK MLK3 MEK1 ? MKK5 MKK4, MKK7 MKK3, MKK6 MEK2 ERK1 ERK3 ERK5 JNK1,JNK2 p38 , p38  ERK2 ERK4 JNK3 p38 , p38  Factorcrec. Stress, diferenciación, factor cr. Stress P90 rsk S6 kinasa, Sos MEF2C c-Jun, ATF2, Elk1, MAPKAP kinasa, ATF2 PL A2, EgFR, Elk-1 DC4, NFAT4 Elk1, Cop, Mx, Ets1, Sap1a, c-Myc, c-Jun MEF2C Tal, STATs Crecimiento, Crecimiento, dif., Produx citoquinas diferenciación sobreviv, apoptosis apoptosis

Señal p.ej. EGF  Tirosin kinasa p.ej. Receptor de EGF  Proteína adaptadora p.ej. Grb/Sos  GTPasa pequeña p.ej. Ras  MAPKKK p.ej. Raf  MAPKK p.ej. MEK-1  MAPK p.ej. ERK MAPK Sustrato P P P.ej. PDE4D3 P.ej. Elk-1

Módulos de reconocimiento para MAPK presentes en diversas proteínas MEF2A: myocyte-specific-enhancer-binding factor 2A Rsk1: ribosomal S6 kinase

Estructura de Dominios de Activación Transcripcional (TAD) regulados por MAPK DBD: DNA binding domain D/  : kinase docking domain MEF2A myocyte specific enhancer-binding factor 2A

Fenotipos de ratones K.O. para MAPKK y MAPK MAPKK/MAPK Fenotipo Semejante a MEK1Vascularización de placentaERK2? defectuosa MKK4Desarrollo de hígado defectuosoK.O. de c-Jun MKK7Letalidad embrionaria causa ? MKK3Producción defectuosa de IL-12 ERK1Desarrollo de células T defectuoso MEK1 dn (selección positiva) JNK1Diferenciación a Th2 defectuosa JNK2Diferenciación a Th1 defectuosa JNK1 ó JNK2Proliferación de células T yJNK1 dn transgénicos producción de IL-2 defectuosa JNK1 ó JNK2 Muerte inducida por activación JNK1 dn transgénicos defectuosa JNK1 & JNK2Sobreproducción de IL-2 K.O. MKK7 JNK1 & JNK2Cierre de tubo neural JNK3Resistencia a muerte celular deK.I. c-Jun A63/73 neuronal excitotóxicas p38  Defecto de placenta (células trofoblásticas) p38  Producción insuficiente de eritropoyetina

Regiones para la localización nuclear de MAPKs

Secuencias de Dominios de Docking de MAPK en Secuencias de Dominios de Docking de MAPK en Factores de Transcripción Factores de Transcripción *c-Jun 33 I L K Q S MT - L N L A D P V G S L *JunB 34 L L K P S L A - V N L A D P Y R S L JNK *NFAT4 141 L E R P S R D H L Y L P L E P S Y R ATFa 26 V H K H K H E - MT L K F G P A R T *Elk K G R K P R D - L E L P L S P S L L ERK/JNK *LIN G M K P N P - - L N L T A TS N F S ERK *TFII-I 279 S K R P K A - - N E L P Q P P V P E SAP R S K K P K G - L G L A P T - - L V I ERK/p38 SAP K A K K P K G - L E I S A P P L L V L *MEF2C 250 N - R K P D L R V L I p38 *MEF2A 267 N S R K P D L R V V I ATF-2 44 VH K H K H E - M T L K F G P A R N p38/JNK Característica: Básico (L x L) (  )

RAS - GAP