Application of PCR Prof. Dr. Baron 1 Aplicaciones de la PCR P C R Análisis de alimentos Diagnóstico médico Análisis medioambiental Medicina forense Arqueología Paleontología
Application of PCR Prof. Dr. Baron 2 Application of PCR for Diagnosis Diagnóstico de infecciones.
Application of PCR Prof. Dr. Baron 3 Diagnostico de Infecciones por PCR (selección) * ST = Shiga-like-Toxin Protocolo de la prueba Obtener muestra (sangre, suero, licor, frotis, pelo...) Aislar ADN Amplificar por PCR secuencias relevantes de ADN
Application of PCR Prof. Dr. Baron 4 Diagnosis of Infections by PCR Ventajas del diagnóstico por PCR Rápido diagnóstico en caso de largo periódo de cultivo de microorganismos (MOs), ejem. 3 semanas para mycobacteria, 4 hrs con PCR Diagnóstico de MOs que son dificiles de cultivar (cytomelalovirus, chlamydia) La cuantificación de los patógenos por PCR cuantitativa, importante para organizar una terapia apropiada y evaluar el éxito de la terapia. Para evitar terapias innecesarias o altas dosis. Para reducir efectos secundarios. Para recortar costes. Para evitar el desarrollo de MOs resistentes
Application of PCR Prof. Dr. Baron 5 Application of PCR in Forensic Medicine PCR para huella genética
Application of PCR Prof. Dr. Baron 6 Huella genética con VNTR/STR Gen de mioglobina 4 repeticiones en tándem 33- repetición de par de bases Cromosomas homólogos
Application of PCR Prof. Dr. Baron 7 VNTR / STR para huella genética VNTR (Unidades de repetición de Tándem Diferentes) Cada repetición es 10 – 40 pares de bases (bp) de largo. Un locus VNTR contiene de repeticiones. Hay varios cientos de loci VNTR en el genoma humano. El número de repeticiones varía de una persona a otra e incluso en una persona de cromosomas homólogos.
Application of PCR Prof. Dr. Baron 8 Huella genética con VNTR/STR Cromosomas homólogos Separación de repeticiones aplificadas por el gel de electroforesis
Application of PCR Prof. Dr. Baron 9 VNTR / STR for DNA Fingerprinting VNTR (Unidades de repetición de Tándem Diferentes) Cada repetición es 10 – 40 pares de bases (bp) de largo. Un locus VNTR contiene de repeticiones. Hay varios cientos de loci VNTR en el genoma humano. El número de repeticiones varía de una persona a otra e incluso en una persona de cromosomas homólogos. STR (Repeticiones cortas en Tándem) Cada repetición es de bp de largo. Un locus STR contiene: repeticiones Varios cientos de loci STR en el genoma humano Identificación de 1:6 billones con 8 STR loci, 1:10 17 con 16 STR loci Protocolo del test Aislar ADN del material biológico (sangre, saliva, tejidos, pelos...) multiplex PCR (capilaridad) gel electroforesis leer Applicación Medicina Forense, test de paternidad, alimentación animal, control de carnes,identificación celular ej. Células cancerígenas...