Integración de DNA en microorganismos: herramientas genéticas I
Integración de DNA exogeno en el genoma bacteriano Recombinación homóloga Recombinación sitio-específica Recombinación ilegítima Transposición
Recombinación homóloga Homologous pairing Resolution One-strand repair/replication
Recombinación homóloga: respuesta a DSB 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ RecBCD
Recombinación homóloga: RecBCD y Chi 3’ 5’ RecBCD 3’ 5’ RecBCD Chi sites: E. coli 5’GCTGGTGG3’ B. subtilis 5’ACTGCG3’ L. lactis 5’GCGCGTG3’ RecA 3’ 5’
Recombinación homóloga: desplazamiento de hebra 3’ RecA 5’ RecA
Intermediario de Holliday RuvABC A B A B RuvAB RuvC
Integrando DNA por recombinación homóloga Integración tipo Campbell Conversión génica
Intercambio alélico marker marker
Resolución de secuencias en tandem marker marker marker
Chi mejora el intercambio alélico marker 3’ 5’ RecBCD
Genes marcadores de selección positiva y negativa Production of levansucrasa in presence of 5% sacarosa es tóxica en Gram - sacBR (B.subtilis) Necesario para asimilar nitrato, tóxico en presencia de clorato nar1
Conversión génica Ab Ab
Conversión génica y Chi, haciendo más facil el trabajo
Conversión génica: para KOs y mas... Ab X Ab X X Ab
Integración de DNA exogeno en el genoma bacteriano Recombinación homóloga Recombinación sitio-específica Recombinación ilegítima Transposición
Recombinación específica de sitio
Estructura de una diana de SSR
SSR en acción
SSR en acción
SSR en acción
SSR en acción
Invertasas
Sistemas de variación de fase
Resolvasas/Integrasas
Estabilidad plasmidica, transposición...