Caracterización isoenzimática de Leishmania spp aisladas en zonas endémicas de leishmaniasis cutánea en El Salvador Proyecto 02.30 CIC-UES M.Sc. Miguel Angel Minero Lacayo (director) M.Sc. Rafael Oswaldo Angel Belloso Dr. Carlos Alexander Ortega DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA

Ciclo vital

Diferentes manifestaciones clínicas

Diferentes patrones epidemiológicos

Diferentes criterios taxonómicos Tipo de síndrome clínico: Leishmania mexicana Área geográfica: L. mexicana amazonensis, L.mexicana guyanensis, L. mexicana panamensis Herramientas bioquímicas (zimodemos): L. (Leishmania) mexicana ; L. (Viannia) panamensis Métodos serológicos: L. mexicana BEL21; L. panamensis LS94 Herramientas moleculares (PCR):

Leishmaniasis en las Américas Categoría I Notificación obligatoria, existen programas permanentes de investigación y control no limitados a la detección de casos y tratamiento. Categoría II Notificación obligatoria; programas interrumpidos o sólo en focos endémicos. Categoría III Notificación no es obligatoria, no información epidemiológica detallada, aumento notorio de casos sin programas de control. Según OPS/OMS, 1998

Leishmaniasis en El Salvador 1950: primer caso de LV y LC 1992: 27 casos de LV en Cabañas, La Unión y Santa Ana; 15 de LC En Santa Clara (SV) y Nueva Granada (Us) 1993: 54 LC nuevos en Santa Clara y San Ildefonso (SV) 1999-2001: 44 LC (71% en zona Norte de SV) y 4 LV en Santa Ana y Sonsonate. Fuente: MSPAS

Objetivos General Caracterizar taxonómicamente a través de la determinación de zimodemos a las cepas de Leishmania circulantes en el país. Específicos Aislar cepas circulantes en Santa Clara y San Ildefonso (San Vicente) y caracterizar el respectivo patrón isoenzimático Iniciar una base de datos formal de las especies presentes en los focos endémicos Montar un laboratorio de investigación en esa línea con aspiración a convertirse en un referente nacional. Fortalecer la cooperación interinstitucional UES/ MSPAS/ FIOCRUZ

Diseño Metodológico Tipo de estudio: descriptivo, prospectivo longitudinal Ubicación espacial: zona norte de San Vicente Universo: todos los casos sospechosos que consulten en las unidades de salud Muestra: todos los aislamientos positivos.

Procedimientos técnicos Toma de muestra consentida Cultivo in vitro Expansión en medio de Schneider Preparación de muestras en amortiguador de fosfatos y el correspondiente buffer membrana Corrida electroforética en membrana de acetato de celulosa Sustrato de tinción Medición en papel milimetrado Comparación con cepas OPS/OMS Centro Montpellier, Francia

Marcadores enzimáticos 6-fosfogluconato deshidrogenasa (E.C.1.1.1.44) 6PGDH Glucosa fosfato deshidrogenasa (E.C. 1.1.1.49) G6PDH Fosfoglucomutasa (E.C. 2.7.5.1.) PGM Manosafosfato isomerasa (E.C. 5.3.1.8) MPI Alaninaminotransferasa (E.C.2.6.1.2) ALAT Aspartatoaminotransferasa (E.C.2.6.1.1.1) Aminopeptidasa (E.C.3.4.11.1) PEP Prolinaiminopeptidasa (E.C. 3.4.11.5) PEP-D

Interpretación

Avances Compra de equipos: cámara de flujo laminar, plato de calentamiento, microscopio invertido, cámara de electroforesis, micropipetas, balanza analítica, computadora, refrigeradora y potenciómetro. Compra de accsesorios: filtros de membrana, tanque de nitrógeno, frascos lavadores, puntas de pipeta, viales criogénicos, tubos de centrífuga, etc. Establecimiento de contactos: Licda. Patricia Mira, Subjefa Lab. Central, MSPAS Dra. Claudia Armida Flores, U.S. San Ildefonso. Dra. Rhina Campos Gómez, Jefa UMP, Hosp. Militar Dra. Flora E. Arana, MERTU/CDC, UVA, Guatemala Dr. Armando Bañuelos, OPS/OMS

Problemas Desinterés ante el proyecto por parte de las autoridades de Control y Vigilancia Epidemiológica (MSPAS) Nula comunicación con FIOCRUZ Retraso en la compra de reactivos (UACI-UES)

VII Congreso Centroamericano y del Caribe de Parasitología y Medicina Tropical III Congreso Nacional de Microbiología/ Expolab 2005 Hotel San Salvador Presidente Universidad de El Salvador 18 al 22 de Octubre de 2005 www.geocities.com/congresodeparasitologia congresodeparasitologia@yahoo.com

Gracias