subsaturación saturación Vmax v Vmax/2 Km1 [S]

Condiciones iniciales y linealidad

Influencia del pH sobre la actividad enzimática

Curva de estabilidad según pH de incubación

AH A- + H+ pH = pKa + log [A-]/[AH] Si el pH = pKa  AH = A- Si el pH = pKa + 1  AH = A-/10 Si el pH = pKa + 2  AH = A-/100

0.94

Influencia de la T sobre la actividad enzimática 70 50 60 40 80 25

Curva de estabilidad según T de incubación

Inhibición de la actividad enzimática

Inhibición competitiva k+1 kp E + S ES  E + P k-1 k+2 E + I EI k-2

S X I

S X I S I S X I

fumarato succinato PABA Sulfanilamida malonato FAD FADH 2 Succinato deshidrogenasa COOH COOH fumarato succinato PABA PABA Sulfanilamida malonato El oxalato es un inhibidor competitivo de la succinato deshidrogenasa, una enzima del ciclo de los ácidos tricarboxílicos Las sulfanilamidas son antibióticos sintéticos. Son inhibidores competitivos de la síntesis de folato en bacterias (inhiben a la dihidrofolato sintetasa), uno de cuyos precursores es el ác. p-aminobenzoico.

DHF metotrexato

GMP AMP

Trimetoprima (más liposoluble) Sulfametoxazol PABA Trimetoprima (más liposoluble)

Ác. fólico

Determinación de la ecuación de velocidad Ks kp E + S ES  E + P + I EI v = kp [ES] Ki [E]t está distribuido en 3 especies: [E], [ES] y [EI].

Por lo tanto [E]t = [E] + [ES] + [EI] dividiendo la ecuación anterior por [E]t como

Entonces, pasando kp al primer miembro y reemplazando [ES] y [EI] queda: Al simplificar [E] y reordenar, queda:

Vmax = 100 Km = 7 [I] = 0 [I] = 5, Ki = 5 [I] = 5, Ki = 2

Parcialmente competitiva Ks kp E + S ES  E + P + + I I EI + S D EIS  E + P Ki´ Ki kp K´s

Inhibición no competitiva k+1 kp E ES  E + P k-1 k-5 k+5 k-3 k+3 k+4 EI  ESI k-4

v = kp [ES] considerando que la concentración de los complejos es

Inhibición parcialmente no competitiva Se da cuando ESI se descompone en EI + P, siendo la velocidad v = k [ES] + k´ [ESI] k+1 kp E ES  E + P k+4 k´p EI ESI  EI + P k-4 k-1 k+3 k-3 k+5 k-5

Inhibición mixta Ks kp E + S ES  E + P k-1 Ki K´i K´s EI + S ESI v = k [ES]

Ki< Ki´ Ki> Ki´

Inhibición acompetitiva k+1 kp E ES  E + P k-1 Ki ESI

([E]t - [ES] - [ESI])*[S] = Ks [ES] [ES][I] = Ki [ESI] v = k+2 [ES]

Inhibición por sustrato k+1 kp E + S ES  E + P k-1 +S Ki ESS

L-malato + NAD+  oxaloacetato + NADH + H+ Otras: invertasa (Glc), piruvato kinasa (ADP)

Ks = 25 Ks = 15 Ks = 7

Gráficos de Dixon [I]1 [I]2 [I]3 [I]4

Activadores Vmax v [A]

100 % activación A0.5 [A]