ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN

Composición de los ácidos nucleícos Purinas Pirimidinas Adenina Guanina Citosina Uracilo Timina

Polímeros lineales de nucleótidos Polímeros lineales de nucleótidos. Nucleótidos cuyos grupo fosfato unen las posiciones 3’ y 5’ de residuos de azúcar consecutivos. Los fosfatos de estos polinucleótidos tienen carga negativa a pH fisiológico

DNA 22 to 26 Å ancho

Plásmidos Fragmentos de ADN extracromosómicos. Los plásmidos o vectores se replican y transcriben de manera independiente del AND cromosómico.

Algunas características de los plásmidos: Confieren resistencia a antibióticos. Confieren resistencia a metales. pBR322

Mecanismos de transferencia horizontal de material genético: Transformación Transducción Conjugación

Cambio heredable de una célula u organismo conseguido por DNA exógeno Cambio heredable de una célula u organismo conseguido por DNA exógeno. Sólo algunas bacterias pueden ser transformadas, éstas reciben el nombre de competentes.

El virus bacteriófago se comporta como un vector intermediario entre dos bacterias.

Fusión temporal de dos organismos unicelulares para el intercambio sexual de material genético

Factor F Elemento en plásmido que le confiere la capacidad de ser transferido de una bacteria que lo posee a una bacteria que carece de este factor por conjugación. Este factor es portado en el episoma* F * Episoma: elemento genético en bacteria que se puede replicar libre en el citoplasma o puede ser insertado y replicado en el cromosoma bacteriano. Un ejemplo de episoma es el plásmido

Tipos de plásmido de acuerdo al factor F Plásmidos conjugativos contienen “tra-genes”, los cuales ejecutan complejos procesos de conjugación, como la transferencia de plásmidos a otra bacteria. Plásmidos “movilizables” sólo pueden transferirse en presencia de un plásmido conjugativo.

Plasmido F

- Bacterias F+ : si el factor F se encuentra libre en el citoplasma - Bacterias F+ : si el factor F se encuentra libre en el citoplasma. - Bacterias Hfr : si el factor F se encuentra integrado en el cromosoma bacteriano. -Bacterias F-: carecen del factor F (células receptoras)

CONJUGACIÓN BACTERIANA

Apareamiento entre las bacterias: F+ y F-

Células Hfr (high frequency recombination) Apareamiento entre las bacterias: Hfr y F-

Procedimiento experimental E. coli JM1452StrR (Receptora) + E. coli W3110/F´KmTn3 en LB (Donadora) Tubo con 1 mL LB, 0.5 mL de JM y 0.2 mL de W3 Incubación a 37°C por 1 hora sin agitación. Caja petri LB con 2% estreptomicina Sembrado por estría E. coli W3110/F´KmTn3 E. coli JM1452Str Mezcla Incubación por 24 horas a 37 °C, refrigerar a 4 °C Parchar 50 colonias aisladas en LB con 1) Estreptomicina y 2) Kanamicina Incubar 24 h a 37 °C Observar y analizar resultados Reportar % de colonias transconjugantes

Sembrado por estría

Actividades para la siguiente semana