ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLÉICOS Transferencia de Material Genético: Conjugación

Transmisión de Material Genético Vertical Progenitor al hijo Horizontal Transformación Transducción Conjugación

Transformación Una célula bacteriana toma DNA del ambiente y lo incorpora. De manera natural en Gram +.

Transducción Involucra presencia de fagos, los cuáles transfieren el DNA de la célula donadora a la célula receptora, la cual puede incorporarlo a su cromosoma. Ciclo Lítico.

Conjugación Una célula bacteriana transfiere DNA a otra célula bacteriana, por contacto directo célula a célula. DNA transferido: Parte del genoma ó un plásmido.

Descubrimiento de la Conjugación ¿Las bacterias tienen procesos similares a la reproducción sexual y la recombinación? Joshua Lederberg y Edward Tatum (1946) descubren un proceso similar…

Descubrimiento de la Conjugación “Las bacterias absorbían lo que secretaban las otras, y podían crecer…” Bernard Davis: Contacto celular es necesario.

Plásmidos autotransmisibles Escherichia Pseudomonas Enterococcus Streptococcus Bacillus Staphylococcus Streptomyces Gram - Gram + Sistemas de transferencia: codificados por los genes tra del plásmido

Plásmidos

Conjugación: Gram - E. coli. Plásmido F: factor de fertilidad, impone la capacidad de donar material genético: Célula donadora (F+), Célula receptora (F-). Genes tra Dtr Mpf Preparación del plásmido Sistema que mantiene unidas a las células donadora y receptora durante el apareamiento Pili Largo y flexible: transferencia en medio liquido Corto y rígido: transferencia en medio sólido

Conjugación: Gram -

Conjugación: Gram - F+ y F-: Ambas células se vuelven F+ CONJUGACIÓN

Conjugación: Gram - F+ y F+: Se inhiben por contacto CONJUGACIÓN

Conjugación: Gram - Hfr (alta frecuencia de recombinación): el plásmido se integra al cromosoma bacteriano. Sigue siendo donadora.

Conjugación: Gram - Hfr y F-: no se transfiere el cromosoma completo, la parte del plásmido F se escinde.

Conjugación: Gram - F’: Se escinde el plásmido F y se lleva consigo una parte del cromosoma. plásmido F’, donador.

Conjugación: Gram - F’ y F-: Se generan células diploides parciales , la receptora se llama merocigoto y sigue siendo F-. CONJUGACIÓN

Conjugación Gram + Similar a lo que ocurre con Gram -. Sistema Mpf, es más simple. E. faecalis secretan péptidos parecidos a feromonas que estimulan la expresión de genes tra en las bacterias vecinas.

Conjugación ¿Para qué? ¿Cómo seleccionamos? Resistencia: antibióticos, metales pesados Colicinas y Bacteriocinas: proteínas con actividad antimicriobiana. Factores de virulencia: Toxinas. Actividades metabólicas: Síntesis ó degradación de compuestos carbonados Genes marcadores, dentro del plásmido y permite seleccionar colonias conjugantes por fenotipos: auxotrofías, fuente de energía, resistencia/susceptibilidad a antibióticos

En la práctica… E. coli JM1452StrR Resistente a Estreptomicina. No codifica para el pili (genes tra), por lo tanto es... E. coli W3110/F´KmTn3 Resistente a la Kanamicina. Cepa F’, por lo tanto es… RECEPTORA DONADORA

Resistente a Estreptomicina Resistente a Kanamicina En la práctica… 600 µL 120 µL 300 µL Resistente a Estreptomicina Resistente a Kanamicina

En la práctica…

Eficiencia de conjugación   #CT: Número de Colonias Transconjugantes #CP: Número de Colonias Parchadas